安捷伦液相基本操作ppt课件

安捷伦液相的基本操作,1,目录一.色谱基础知识二.Agilent液相色谱仪基本操作三.常见色谱故障,2,一.色谱基础知识,3,1.色谱法的分离原理溶于流动相(mobilephase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationaryphase)发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。,4,2.HPLC的特点和优点,高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在1530分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。,5,高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在L数量级。应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。,6,二.Agilent液相色谱仪基本操作,7,流动相瓶,排气阀,电源开关,二元泵,自动进样器,柱温箱,检测器,8,进入工作站,9,主界面,10,编辑完整方法,仪器方法设置,方法信息仪器/采集数据分析运行时选项表,11,仪器方法设置,12,仪器方法设置,13,仪器方法设置,14,仪器方法设置,15,单次样品：样品命名,工作站使用,16,序列样品：命名与序列表设置,工作站使用,17,打开仪器1脱机,18,数据文件夹,序列样品数据,单次样品数据,色谱图,样品数据,色谱图编辑,色谱峰数据,数据分析,数据分析,19,数据分析,调节积分参数,20,数据分析,报告打印报告,21,三.常见色谱故障,22,常见色谱故障-基线噪音可能原因:a、检测池脏b、检测池灯能量下降c、由泵引起的脉冲d、检测器上的温度效应e、检测其中有气泡通过,23,常见色谱故障-基线漂移可能原因:a、梯度洗脱所用溶剂有吸收b、流动相脏c、色谱柱没有用流动相平衡d、系统中污染物溢出e、实验温度不稳定,24,常见色谱故障-拖尾峰可能原因：a、柱效降低或有柱塌陷b、进样体积过大c、柱外扩散效应d、碱性基质与硅羟基作用e、重金属反应常见色谱故障-前伸峰可能原因：a、色谱柱过载b、进样体积过大c、大峰之前有未彻底分离的小峰,25,常见色谱故障-负峰可能原因：a、样品吸收比流动相吸收小b、溶解样品的溶剂通过色谱柱平衡被破坏c、示差检测器中最常见，溶质的折光指数小于溶剂的折光指数。,26,常见色谱故障-鬼峰常见原因是流动相脏，尤其是水相。要求使用超纯水，最多两天就换常见色谱故障-双峰可能原因：a、柱头塌陷或柱床运动b、柱前滤芯堵塞c、组分共流出d、样品量过大f、进样器的进样流路存在分叉流路,27,常见色谱故障-峰扩展可能原因：a、柱效降低或有柱塌陷b、进样体积过大c、流动相粘度大,28,常见色谱故障-压力过高可能原因：a、色谱柱进样口过滤芯被污染b、冲洗阀过滤芯被污染c、色谱柱被污染d、连接管路的毛细管堵塞e、进样器转子上凹槽被堵塞f、进样针或针座被阻塞常见色谱故障-压力过低可能原因：a、溶剂进