注射用多烯磷脂酰胆碱与胰岛素在葡萄糖注射液中的配伍稳定性考察

基金项目: : 上海市药学会基金资助项目( HYXH004) 作者简介: 章娟， 女， 硕士研究方向: 医院药学 * 通讯作者: 翟青， 女， 主任药师， 硕士生导师研究方向: 临床药学Tel/Fax: ( 021) 64175590E- mail: zhaiqing63 hotmail. com 科研简报 注射用多烯磷脂酰胆碱与胰岛素在葡 萄糖注射液中的配伍稳定性考察 章娟a， b， 翟青a， b( 复旦大学， a. 附属肿瘤医院药剂科; b. 上海医 学院肿瘤学系， 上海 200032) 关键词: 高效液相色谱法; 胰岛素注射液; 多烯磷脂酰胆碱注 射液; 配伍; 稳定性 doi: 10.11669/cpj.2013.08.020中图分类号: R917文献 标志码: A文章编号: 1001 2494( 2013) 08 0652 03 近年来， 糖尿病患者恶性肿瘤的发生率呈上升 趋势。在肿瘤的治疗过程中常出现药物性肝损伤。 临床多常用易善复( 多烯磷脂酰胆碱) 作肿瘤化疗 的辅助保肝药物 1 。静脉输注易善复注射液时只 能用不含电解质的葡萄糖溶液稀释， 但这一溶液对 于糖尿病肿瘤患者来说， 存在血糖升高风险。因此， 临床医生常加入一定量的胰岛素来对抗葡萄糖对糖 尿病肿瘤患者血糖的升高， 这一做法笔者并未见任 何报道。因此设计本实验， 为临床安全、 合理用药提 供理论依据， 保证药物的临床使用质量。 1仪器和试药 Agilent 1100 高效液相色谱系统， pH 计( 赛默飞 世尔公司， 美国， 型号: Orion 4 star，d = 0. 002) ， 紫 外可见分光光度计( 铂金埃尔默公司， 美国， 型号: Lambda35) 。 注射用多烯磷脂酰胆碱( 101679， 232. 5 mg， 杭 州赛诺菲民生药业) ; 多烯磷脂酰胆碱对照品( 自 制， 归一化法计算纯度达到 98% 以上) ; 胰岛素注射 液( 优泌林， HRZ057， 400 u10 mL 1， 礼来制药有 限公司) ， 胰岛素标准品( 中国药品生物制品鉴定 所， 规格 27. 2 umg 1， 批号: 7337865) ; 5% 葡萄糖 注射液， 甲醇、 乙腈、 正己烷、 异丙醇均为色谱纯， 其 余试剂为分析纯， 水为超纯水。 2方法与结果 2. 1多烯磷脂酰胆碱含量测定方法的确立 2. 1. 1色谱条件色谱柱: Agilent- C18柱 ( 4. 6 mm 250 mm，5 m) ; 流动相: 异丙醇- 正己烷- 水 ( 115 22 32) ; 流速: 0. 8 mLmin 1; 检测波长: 206 nm; 柱温: 常温; 进样量: 20 L。 2. 1. 2干扰实验模拟临床用药条件， 配置含胰岛 素为 0. 02 umL 1的葡萄糖溶液， 按“2. 1. 1” 的色 谱条件， 进样 20 L， 记录色谱图， 结果见图 1。在此 条件下胰岛素与葡萄糖溶液的存在不会影响多烯磷 脂酰胆碱的含量测定。 2. 1. 3线性关系考察配置 0. 2、 0. 5、 1. 0、 1. 5、 2. 0 mgmL 1 的对照品溶液， 分别取 20 L， 在 “ 2. 1. 1” 的色谱条件下依次进样， 以峰面积( A) 为横 坐标， 质量浓度( ) 为纵坐标进行线性回归， 回归方 程为 A =17 257 +79. 749，r =0. 999 2( n = 5) ，结 果表明， 多烯磷脂酰胆碱在 0. 2 2. 0 mgmL 1内 与峰面积线性关系较好。 2. 1. 4精密度实验取 1. 0 mgmL 1的多烯磷脂 酰胆碱对照品溶液， 连续进样 6 次， 测定峰面积， 计 算其 RSD 值， 结果为 0. 87%。 2. 1. 5稳定性实验取 1. 0 mgmL 1 的标准溶 液， 在 0、 0. 5、 1、 2、 4、 6、 8 h 进样， 测定峰面积， 计算 RSD 为 0. 75%。结果表明， 多烯磷脂酰胆碱在 8 h 内稳定性良好。 2. 1. 6回收率实验精密称取多烯磷脂酰胆碱对 照品 18. 6 mg 于10 mL 量瓶中， 流动相稀释至刻度， 得到 1. 86 mgmL 1的对照品溶液。精密量取易善 复注射液 0. 4 mL， 置 10 mL 量瓶中， 甲醇溶解并稀 释至刻度， 取 2. 5 mL 该溶液置 10 mL 量瓶中， 加入 1. 86 mgmL 1的对照品溶液 2. 5 mL， 甲醇稀释至 刻度。配置 6 份， 分别进样 20 L。计算回收率为 101. 3%， RSD 为 0. 73%。 2. 2胰岛素含量测定方法的确立3- 4 2. 2. 1色谱条件色谱柱: Agilent- C18柱 ( 4. 6 mm 250 mm， 5 m) ; 流动相: 0. 01 mol L 1磷酸- 乙腈( 62 38) ; 流速: 1 mLmin 1; 检测波长: 214 nm; 柱温: 40 ; 进样量: 20 L。 2. 2. 2干扰实验模拟临床用药条件， 配置含多烯 磷脂酰胆碱 0. 93 mgmL 1 的 5% 的葡萄糖溶液， 256 Chin Pharm J， 2013 April， Vol. 48 No. 8中国药学杂志 2013 年 4 月第 48 卷第 8 期 按照” 2. 2. 1” 色谱条件， 进样 20 L， 记录色谱图。 结果见图 2。在此条件下多烯磷脂酰胆碱与葡萄糖 的存在不会影响胰岛素的含量测定。 2. 2. 3线性关系考察称取适量胰岛素标准品配 置成胰岛素 0. 4 umL 1 的标准品溶液， 分别取 0. 1、 0. 5、 1. 0、2. 5、 5 mL 该溶液置 20 mL 量瓶中， 用流动相稀释至刻度， 摇匀， 制成浓度依次 为 0. 002、 0. 01、 0. 02、 0. 05、 0. 1 umL 1 的对照品溶 液。取上述对照品溶液各 20 L 进样， 记录色谱图， 重复 3 次， 取平均值。以峰面积( A) 为横坐标， 浓度 ( c) 为纵坐标进行线性回归， 得回归方程为 A = 4 658. 8c +3. 991 2， r = 0. 999 8( n = 5) ， 结果表明， 胰岛素浓度在 0. 002 0. 1 umL 1 内与峰面积线 性关系较好。 2. 2. 4精密度实验取浓度为 0. 02 umL 1的胰 岛素标准溶液， 连续进样 6 次， 测定峰面积， RSD 值 为 0. 35%。 2. 2. 5稳定性实验取浓度为 0. 02 umL 1的胰 岛素标准溶液， 在 0、 0. 5、 1、 2、 4、 6、 8 h 进样， 测定峰 面积， 计算 RSD 为0. 41%。结果表明， 胰岛素在8 h 内稳定性良好。 2. 2. 6回收率实验精密称取胰岛素标准品 3. 68 mg， 置 100 mL 量瓶中， 0. 01 molL 1的盐酸溶解， 超纯水定容， 摇匀， 得到 1. 0 umL 1 的对照品溶 液。精密量取 0. 1 mL 该溶液， 置 10 mL 量瓶中， 加 入 0. 1 umL 1的胰岛素注射液 1 mL， 水稀释至刻 度， 摇匀。平行配置 6 份该溶液， 分别进样， 计算回 收率为 100. 9%， RSD 为 0. 89%。 2. 3配伍液稳定性实验 模拟临床浓度， 将胰岛素注射液与易善复注射 液同时溶解到100 mL 5%的葡萄糖中， 摇匀， 同时配 置临床浓度的易善复葡萄糖溶液， 以及胰岛素葡萄 糖溶液， 在室温下放置， 在 0、 0. 5、 1、 2、 4、 6、 8 h 分别 对其外观、 pH 值、 含量进行观察及测定。 2. 3. 1外观5 取洁净的20 mL 具塞比色管4 支， 分别加入易善复胰岛素配伍溶液， 易善复溶液、 胰岛 素溶液和空白葡萄糖溶液 15 mL， 在 0、 0. 5、 1、 2、 4、 6、 8 h 观察配伍液外观变化， 有无颜色、 气味、 沉淀、 浑浊产生。 结果显示， 易善复胰岛素配伍溶液以及易善复 溶液为黄绿色， 胰岛素溶液和空白葡萄糖溶液为无 色。各溶液在不同时间内外观均澄清透明， 无颜色、 气体、 沉淀、 浑浊产生， 与各原注射液比也无差异。 2. 3. 2pH 值取配伍溶液以及各空白对照， 分别 在 0、 0. 5、 1、 2、 4、 6、 8 h 测定其 pH 值， 结果显示， 胰 岛素与易善复配伍液在 8 h 内 pH 值的变化小于 0. 2。结果表明， 在 8 h 内溶液 pH 值稳定， 结果 见表 1。 表 1胰岛素与易善复配伍液不同时刻的 pH 值测定结果 0 h0. 5 h1 h2 h4 h6 h8 h 5%葡萄糖 5. 315. 335. 325. 355. 315. 295. 28 易善复葡萄糖溶液8. 118. 128. 148. 098. 078. 038. 00 胰岛素葡萄糖溶液6. 907. 057. 107. 037. 037. 016. 98 配伍溶液7. 257. 337. 407. 357. 317. 297. 22 356 中国药学杂志 2013 年 4 月第 48 卷第 8 期Chin Pharm J， 2013 April， Vol. 48 No. 8 2. 3. 3含量测定按“2. 1. 1” 和“2. 2. 1” 项下的色 谱条件， 分别测定配伍溶液、 易善复溶液， 以及配伍 溶液和胰岛素溶液的含量。记录峰面积， 以 0 时刻 含量为 100%， 测定不同时间点溶液中多烯磷脂酰 胆碱和胰岛素的含量变化情况。结果见表 2， 结果 显示， 胰岛素与易善复配伍后 8 h 内， 胰岛素含量以 及多烯磷脂酰胆碱含量均在 4%以内。 3讨论 胰岛素作为一种生物活性药物， 用于增加葡萄 糖的体内利用和血糖控制。在临床应用中， 胰岛素 常用于治疗糖尿病合并其他疾病， 因药物或疾病的 原因， 输液不宜采用生理盐水而需用葡萄糖液时， 加 少量胰岛素对抗液体中的葡萄糖。 多烯磷脂酰胆碱注射液及胰岛素注射液的说明 书中明确规定药品需冷藏保存， 胰岛素注射液说明 书中还规定严禁放置于高于 30 条件下保存。因 此本实验考察在常温条件下( 20 25 ) 配伍液8 h 内的稳定性， 同时将冷藏保存作为对照组。结果发 现， 配伍后， 在常温与冷藏条件下， 各组分含量均无 明显变化。因此， 临床配伍溶液可在短时间内常温 保存。 输液药物一般应现用现配， 但由于静脉配置中 心机制的引入， 从药物配好到送至病房给患者输注 有一定的等候时间， 本实验考察配伍溶液在 8 h 的 稳定性， 因此建议临床上应在混合后 8 h 滴完， 以确 保临床用药的安全性。 研究提示， 一定时间内， 胰岛素与多烯磷脂酰胆 碱注射液在 5%葡萄糖注射液中是稳定的。但在实 际应用中， 两种药能否达到各自的剂量效果， 还需要 对实际应用中的病例进行分析研究。 表 2配伍溶液以及胰岛素和多烯磷脂酰胆碱溶液不同时刻的浓度及与 0 时刻的比值 . n =5， 珋 x s 时间 /h 胰岛素浓度与比值多烯磷脂酰胆碱浓度及比值 胰岛素 葡萄糖溶液 胰岛素多烯磷脂酰胆碱 配伍葡萄糖溶液 多烯磷脂酰胆碱 葡萄糖溶液 胰岛素多烯磷脂酰胆碱 配伍葡萄糖溶液 浓度 /umL1 与 0 时 浓度比值 浓度 /umL1 与 0 时刻 浓度比值 浓度 /mg mL1 与 0 时刻 浓度比值 浓度 /mg mL1 与 0 时刻 浓度比值 00. 016 6 0. 000 3100. 0%0. 017 1 0. 000 3100. 0%0. 932 0. 016100. 0%0. 946 0. 006100. 0% 0. 50. 016 7 0. 000 3100. 6%0. 017 5 0. 000 4102. 3%0. 953 0. 008102. 3%0. 945 0. 01499. 9% 10. 016 5 0. 000 499. 4%0. 017 3 0. 000 5101. 2%0. 94 0. 008100. 9%0. 948 0. 016100. 2% 20. 016 8 0. 000 3101. 2%0. 017 2 0. 000 3100. 6%0. 944 0. 005101. 3%0. 951 0. 019100. 5% 40. 016 7 0. 000 2100. 6%0. 016 7 0. 000 397. 7%0. 953 0. 004102. 3%0. 947 0. 014100. 1% 60. 017 1 0. 000 3103. 0%0. 017 4 0. 000 4101. 8%0. 944 0. 008101. 3%0. 952 0. 015100. 6% 80. 017 2 0. 000 4103. 6%0. 017 7 0. 000 4103. 5%0. 947 0. 006101. 6%0. 943 0. 01799. 7% REFERENCES 1SONG Y L，XU J M. 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