立式压力蒸汽灭菌器效果验证报告

重庆西南制药二厂有限责任公司页 数共10页文件编码：SVR-09002-00-2011 文件名称立式压力蒸汽灭菌器效果验证报告制 定 人制定日期审 核 人审核日期QA审阅人审阅日期批 准 人批准日期受控状态分发号生效日期分发部门质量部QA质量部QC技术部综合部供销部设备工程部动力车间EHS部财务部生产部一车间二车间三车间制剂车间文件历史日期变更原因变更前文件版本号验证小组人员名单组 长姓名职务/职称职责李辉质量部负责验证方案和报告的审核工作；负责组织实施灭菌效果确认 组 员姓名职务/职称职 责付娜QC负责验证方案和报告的起草； 负责实施灭菌效果确认；负责进行检测；统计检测数据；陈静QC主管负责验证方案和报告的起草； 负责实施灭菌效果确认；负责进行检测；统计检测数据；黄福鹏QA协调验证工作目录序号项目名称页码1 目的52 验证类别53 验证时间54 验证依据55 验证内容56 接受标准57 验证的实施步骤58 偏差及异常处理99 验证报告、结果分析和结论910 验证结论批准、会签及日期911 验证证书10摘要公司对立式高压蒸汽灭菌器121高压灭菌30分钟的灭菌效果进行了验证，为确认立式压力蒸汽灭菌器的可靠性，确保微生物学检验及环境监测数据的真实可靠。验证结果如下： 当加入未灭菌枯草杆菌黑色变种芽胞菌片的培养肉汤经培养后显混浊，而在115灭菌20分钟后的枯草杆菌黑色变种芽胞菌片的培养肉汤经培养后清亮，无混浊，说明枯草杆菌黑色变种芽胞菌全部被灭活。当未灭菌的嗜热脂肪芽孢杆菌生物指剂经培养后由紫色变为黄色，而在121压力蒸汽灭菌20分钟后的仍为紫色时，说明嗜热脂肪芽孢杆菌全部被灭活。枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、沙门菌、铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌培养在121灭菌30分钟后，经培养无菌生长，细菌挑战性试验合格。1 目的：提供足够的数据和文件依据，确认立式压力蒸汽灭菌器的可靠性，确保微生物学检验及环境监测数据的真实可靠。2 验证类别：同步验证3 验证时间：2011年12月4 验证依据：药品生产质量管理规范（2010年修订）； 药品生产验证指南（2003年修订）； 验证管理规定SMP-10002-035.验证可接受标准验证项目验证可接受标准验证方法细菌挑战性试验灭菌后指示菌应全部死亡微生物限度检查121压力蒸汽灭菌化学指示卡变色反应灭菌后指示卡颜色应达到或深于标准颜色（黑色）目测法生物指示剂灭活实验灭菌后指示菌应全部被灭活培养法6.验证的实施步骤6.1 试验条件6.1.1 检测用仪表确认名称型号编号校验日期校验结论有效时间压力表02010015642011.09.30符合规定2012.09.30结论： 符合规定检查人/日期复核人/日期7.1.2检测用菌种、指示剂（卡）等的确认名称规格来源枯草芽孢杆菌中国药品生物制品检定所大肠埃希菌中国药品生物制品检定所沙门菌中国药品生物制品检定所铜绿假单孢菌中国药品生物制品检定所金黄色葡萄球菌中国药品生物制品检定所嗜热脂肪芽孢杆菌生物指示剂北京四环卫生药械厂有限公司枯草杆菌黑色变种芽胞菌片中国药品生物制品检定所121压力蒸汽灭菌化学指示卡北京四环卫生药械厂有限公司结论： 符合规定检验人/日期：复核人/日期：7.1.3 菌培养物制备：分别取枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌1白金耳于装有9ml营养肉汤培养基的试管中，于3035培养1824小时后，出现浑浊，说明各种菌均有生长，即得枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌的培养物，备用。7.2取样方法：7.2.1 取样点：立式压力蒸汽灭菌器内上、中、下三部位各取样点（见物品放置图）321645897物品放置图7.2.2取样频次：每个试验进行三次。7.3生物指示剂灭活试验：7.3.1枯草杆菌黑色变种芽胞菌片(115灭菌20分钟)7.3.1.1 验证方法：取9张枯草杆菌黑色变种芽胞菌片按物品放置图位置放于立式压力蒸汽灭菌器内，按立式压力蒸汽灭菌器标准操作程序，于115灭菌20分钟后，取出于3035培养2448小时。同时取两片未灭菌枯草杆菌黑色变种芽胞菌片作对照，分别于24小时和48小时观察，记录结果。7.3.1.2 结果判定：当加入未灭菌枯草杆菌黑色变种芽胞菌片的培养肉汤经培养后显混浊，而灭菌后的枯草杆菌黑色变种芽胞菌片的培养肉汤经培养后清亮，无混浊，说明枯草杆菌黑色变种芽胞菌全部被灭活。7.3.1.3 验证结果：取样点标准培养后现象结论第一次第二次第三次1培养基清亮、无混浊清亮、无混浊清亮、无混浊清亮、无混浊符合规定2清亮、无混浊清亮、无混浊清亮、无混浊3清亮、无混浊清亮、无混浊清亮、无混浊4清亮、无混浊清亮、无混浊清亮、无混浊5清亮、无混浊清亮、无混浊清亮、无混浊6清亮、无混浊清亮、无混浊清亮、无混浊7清亮、无混浊清亮、无混浊清亮、无混浊8清亮、无混浊清亮、无混浊清亮、无混浊9清亮、无混浊清亮、无混浊清亮、无混浊阳性对照1号培养基混浊浑浊浑浊浑浊2号浑浊浑浊浑浊检验人/日期：复核人/日期：7.3.2 嗜热脂肪芽孢杆菌生物指示剂(121灭菌15分钟)7.3.2.1 验证方法：取9瓶嗜热脂肪芽孢杆菌生物指示剂按物品放置图位置放于立式压力蒸汽灭菌器内，按立式压力蒸汽灭菌器标准操作程序，于121灭菌15分钟后，取出于54培养48小时。同时取2支未灭菌的嗜热脂肪芽孢杆菌生物指示剂作对照。7.3.2.2 结果判定：当未灭菌的嗜热脂肪芽孢杆菌生物指剂经培养后由紫色变为黄色、而灭菌后的仍为紫色时，说明嗜热脂肪芽孢杆菌全部被灭活。7.3.2.3.1 验证结果：检测结果灭菌时间及温度123456789阳性对照1212115分钟第一次紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色黄色黄色第二次紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色黄色黄色第三次紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色黄色黄色结论：符合规定检查人/日期复核人/日期7.4 121压力蒸汽灭菌化学指示卡变色反应试验：7.4.1 验证方法：将每组9张“121压力蒸汽灭菌化学指示卡”按物品放置图位置放于立式压力蒸汽灭菌器内，按立式压力蒸汽灭菌器标准操作程序，于121灭菌15和30分钟各一次后，取出与化学指示卡自带标准颜色（黑色）比较。7.4.2 结果判定： 121压力蒸汽灭菌化学指示卡灭菌后颜色如达到或深于标准颜色（黑色），则本试验合格。7.4.3 验证结果：检测结果灭菌时间及温度12345678912115分钟第一次相同相同相同相同相同相同相同相同相同第二次相同相同相同相同相同相同相同相同相同第三次相同相同相同相同相同相同相同相同相同12130分钟第一次深于深于深于深于深于深于深于深于深于第二次深于深于深于深于深于深于深于深于深于第三次深于深于深于深于深于深于深于深于深于结论：符合规定检查人/日期复核人/日期7.5 细菌挑战性试验：7.5.1 验证方法：将枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌的培养物各9支培养物按物品放置图位置放于立式压力蒸汽灭菌器内，按立式压力蒸汽灭菌器标准操作程序，于121灭菌30分钟后，取出，即得枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌的灭菌培养物。取各灭菌培养物1ml，置直径90mm的灭菌平皿中，将预先准备好的营养琼脂培养基熔化，冷至约45时，倾注上述平皿各约15-20mL，混匀待凝。将各凝固平板倒置于3035培养箱中培养，分别于24小时和48小时观察，记录结果，每管平行测定2份。同时用两个灭菌平皿各加注0.9%的无菌氯化钠溶液1mL作为阴性对照；并用大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌作阳性对照。7.5.2 结果判定：枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、沙门菌、铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌培养物灭菌后，经培养应无菌生长，则细菌挑战性试验合格。7.5.3 验证结果：检测结果灭菌培养物123456789阳性对照12枯草芽孢杆菌第一次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性第二次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性第三次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性大肠杆菌第一次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性第二次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性第三次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性沙门菌第一次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性第二次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性第三次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性铜绿假单孢菌第一次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性第二次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性第三次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性金黄色葡萄球菌第一次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性第二次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性第三次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性结论：符合规定检查人/日期复核人/日期8. 异常及偏差处理 无9. 验证报告、结果分析和结论：9.1 当加入未灭菌枯草杆菌黑色变种芽胞菌片的培养肉汤经培养后显混浊，而在115灭菌20分钟后的枯草杆菌黑色变种芽胞菌片的培养肉汤经培养后清亮，无混浊，说明枯草杆菌黑色变种芽胞菌全部被灭活。9.2 当未灭菌的嗜热脂肪芽孢杆菌生物指剂经培养后由紫色变为黄色，而在121压力蒸汽灭菌20分钟后的仍为紫色时，说明嗜热脂肪芽孢杆菌全部被灭活。9.3 枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、沙门菌、铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌培养在121灭菌30分钟后，经培养无菌生长，细菌挑战性试验合格。验证小组组员： 日期： 验证小组组长： 日期： 10. 验证结论批准、会签及日期验证证书 编号：SVR-09002-00-2011验证项目立式高压灭菌器效果验证验证要求及目的确认立式压力蒸汽灭菌器的可靠性，确保微生物学检验及环境监测数据的真实可靠验证文件编号SVR-09002-00-2011验证文件名称立式高压灭菌器效果验证报告验证小组按照立式高压灭菌器效果验证方案（SVP-09002-00-2011）对对立式高压蒸汽灭菌器121高压灭菌30分钟的灭菌效果进行了验证，为确认立式压力蒸汽灭菌器的可靠性，确保微生物学检验及环境监测数据的真实可靠。验证结果如下： 当加入未灭菌枯草杆菌黑色变种芽胞菌片的培养肉汤经培养后显混浊，而在115灭菌20分钟后的枯