实验七+微生物大小和数量的测定（张理珉）.ppt

实验7掌握了使用微生物大小和数量测量、目的要求、1、显微镜微表测量微生物大小的基本原理和方法。2、利用血细胞计数器直接测量微生物数量，掌握其原理和传统方法。利用微生物大小、显微成像原理、显微镜物镜和目镜的二次放大制作肉眼可见的放大物像(虚像)的实验内容。结构和原理，安装在目镜微英尺显微镜目镜部分；显微镜测量台微英尺校准时，放置在显微镜载体(样品位置)上，测量时不需要。使用镜头微米(已知尺度长度)校正目镜微尺在其他物镜下表示的实际长度(m)。镜测微计校正目镜微计，显微镜测微计组成目镜测量微尺肉眼可见图像初级放大(7种，根据测量的材料选择)。显微镜测量台微英尺肉眼可见的物体与样品在同一个焦平面上的二次放大。不能用实际的尺子量(小)。不能制作，或者制作费太高，不能和观察到的样品一起用假想的统治者测量(事物上)。校对。对于四大物镜的微米四大物镜，对于40大物镜，对于镜微米，对于目镜微米，对于镜表微米，对于镜表微米，对于四大物镜下的校正图，对于目镜微米，对于镜微米，对于镜微米下的校正图，对于目镜微米，对于10大物镜下的校正图，对于目镜微米，对于镜下的校正图目镜千分尺校正(代表)大小随物镜倍率的增加而反比例减小。注：刻度上的刻线根据物镜的倍率以粗体显示(图像)。校正后的目镜微表在不同物镜下所代表的长度与物镜的放大率成反比。在实际校正过程中，加工精度和刻度的放大可能会导致小误差。实验阶段，菌株：sacharomyces cerevisiae(sachromayces cerevice)1，目镜微标尺(放入或直接使用微目镜)2，镜微标尺(100等分1毫米) 实验微生物名称：实验内容2是利用血细胞计数板测量酵母细胞数量，显微镜直接计数法将被测试样品的悬浮液放在特别确定面积和体积的幻灯片(也称为计数器)上，直接用显微镜计数的简单、快速、直观的方法。 国内常用的计数器有血球(血细胞)计数板、Petroff-Hausser系菌机、Hawksley系菌机。血细胞(血细胞)计数板是一种特殊的运载幻灯片，由四个插槽组成，由三个平台组成；中间的宽木板又分为一个短槽，每边的平台上都刻有一个隔板，每个隔板都分为九个大正方形，中间的大格子是系数室。血细胞计数仪上表面，血细胞计数仪轮廓，各种规格的血细胞计数仪(a)马克西血细胞计数仪；(b)希里血球计数板、血细胞计数板的大棋盘格显微镜照片、血细胞计数板的中间棋盘格显微镜照片、小方格显微镜照片、实验阶段、菌株：酿酒厂酵母稀释显微镜检查室(熟悉计数室结构)观察出芽情况，计算细菌总数，出芽率。计算公式：(B=100)，结果显示在下表中，记录a表示5个中间框中的细菌总数。b表示细菌稀释倍数。注意：位于网格上的细菌通常只计入上面和右边的细胞；以酵母为例，出芽生殖的芽大小达到母细胞的一半，计算为两个细菌(细胞)，反之计算为一个。血细胞计数板仅适用于计算单细胞生物。像细菌这样的原核生物必须在油镜中观察，因此不能使用普通的血细胞计数板，而使用Petroff-Hausser计数板(作为进口购买，计数室有效空间的高度为0.02毫米)。附：活细菌染色美兰法，显微镜下如何区分生与死，观察活细菌？注意生与死的区别，分别计数，计算生存率。原理：活细菌细胞的新陈代谢有很多脱氢作用，还原性强，使米兰无色脱色，活细胞未感染颜色，死细胞感染蓝色。实验阶段，菌株：Saccharomycescerevisiae操作阶段：将1mL细胞悬浮放入小试管中，加入1mL0.5% merlan溶液混合后，立即制作观察(海豹)，或使用血细胞计数板进行计算(通过区分活细胞，可以计算细胞的存活率)。操作要求：动作要快。否则，活细胞接触黑色素染料太久也会死亡。一般要求系数在510分钟内完成。测试问题，1，记录实验结果，计算细菌悬浮液中酵母的大小、数量、发芽率和存活率。2、平板殖民计数法与显微镜直接计数法的优缺点及应用比较？3.不改变目镜和目镜的微米，用不同比例的物镜测量相同细菌的大小，结果是