《细胞工程动物》PPT课件.ppt

2.2动物细胞工程，安徽省淮安市第16中学潘荣，选择3个现代生物科学主题2细胞工程，安徽省远程教育优秀作品，教育目标，主要困难，讨论问题，课程，知识结构，教育反馈，课后练习，教育参考，2.2.2动物细胞融合和单克隆抗体了解单克隆抗体的制造过程和应用，主要困难，1。教育重点：单克隆抗体的制备和应用2。教育困难：通过单克隆抗体的制造过程、问题讨论、“西红柿-土豆”(异常图)长期实验，科学家们利用体细胞杂交技术获得了“西红柿-土豆”植物。如果把奶牛细胞与植物细胞杂交，得到绿色的小奶牛，晒太阳会不会挤牛奶？动物细胞也能融合吗？课程、一。动物细胞融合1。动物融合过程让学生阅读课本P52动物融合，动物细胞融合过程，不同DNA的两个细胞，惰性病毒，有丝分裂，两个完整的杂交细胞，惰性病毒灭活会使病毒或细菌以物理或化学手段失去感染能力，但不会破坏该病原体的抗原结构。试题，1。植物体细胞杂交时，如何先去除细胞壁？酶解，如纤维素酶或果胶酶，2 .动物细胞融合时需要脱壁处理吗？怎么了？因为动物细胞没有细胞壁，所以不需要。3.植物细胞杂交诱导原生质体融合的一般方法是什么？离心、电击等物理方法；佩格等化学方法，4 .动物细胞融合能利用上述两种方法吗？还有其他方法吗？5.植物体细胞杂交原生质体融合后，需要经过组织培养形成完整的杂交个体，动物细胞融合后能否形成杂交动物个体？不，不，7。猜猜动物细胞融合在哪些方面的应用？测试问题，利用动物细胞融合技术诱导异种交配细胞的形成，8。实际杂交细胞的生产有什么应用？产生单克隆抗体，6。能诱导被称为动物细胞融合的东西吗？主要是准备，单克隆抗体，用于获取杂交植物，主要用途，物理、化学方法，(左)，停用病毒，物理(离心、振动、电刺激)，化学(聚乙二醇)，诱导方法，分散后诱导，动物细胞融合的概念，动物细胞融合也称为细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后，原来有两个以上细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞。1。抗体是由什么细胞产生的？效果b细胞(血浆细胞)。2.一个b淋巴细胞(血浆细胞)能分泌多种抗体吗？每个b淋巴细胞只分泌一种特定抗体。3.抗原侵入身体后，引起身体免疫反应的抗体只有一种吗？动物在免疫反应过程中在体内产生的特异性抗体种类可能超过数百万种。简述获得抗体的传统方法。抗原动物抗体抗原不纯抗体不纯，2，单克隆抗体，刺激，浆细胞，6。化学性质单一，如何获得特定抗体？体外培养单个b淋巴细胞，提取分泌抗体。7.淋巴细胞体外培养能无限增殖吗？如何解决这个问题？5。用这种方法得到的抗体有什么缺陷吗？产量低，纯度低，特异性低，1 .设计：b淋巴细胞-只分泌一种特定抗体小鼠骨髓瘤细胞-无限增殖，杂交细胞，2，单克隆抗体，2。准备过程：免疫小鼠，骨髓瘤细胞培养，融合，骨髓瘤细胞，b淋巴细胞，注射特定抗原蛋白，注射特定抗原蛋白，培养基培养，特异性抗体检测阳性，单克隆抗体应用：在基础理论研究中具有重要意义，在疾病诊断、治疗和预防方面，例，生物导弹，2，单克隆抗体，特异性，高灵敏度。由抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体制成的“早期妊娠诊断工具包”灵敏度高，可以在怀孕8天内做出诊断，比原来的诊断方法提前10天左右，避免孕妇不知道怀孕就服用药物，从而对胎儿产生不良影响。该方法的检测精度在90%以上。知识结构，两个过程，动物细胞培养过程，单克隆抗体制造过程，三个“一个”，诱导细胞融合的新方法惰性病毒，新细胞杂交瘤细胞，优点单克隆抗体特异性，高灵敏度的优点，教育反馈，动物细胞融合技术最重要的用途是：(a .克服远距离杂交不兼容)B .制备单克隆抗体c .培养新物种d .杂交细胞生产，B，2 .单克隆抗体是由以下哪种细胞产生的()A.B淋巴细胞B.T淋巴细胞c .骨髓瘤细胞D .杂交瘤细胞D，3 .(多重选择)1975年，米尔斯坦和科勒成功获得了单克隆抗体。与以下细胞制造单克隆抗体有关的是()a .效果B. t淋巴细胞c .骨髓瘤细胞d .杂交细胞ABCD，4，4。下图是一名学生根据杂交技术生产破伤风菌的实验程序，准备单克隆抗体，不，不将抗原注入鼠标，就无法获得产生单抗体的b淋巴细胞。(1)。这个实验计划的目的是._ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _，(2)。这个程序能达到预期的效果吗？怎么了？(3)。a表示如果从鼠标脾脏中获取_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _，(4)。图中，b表示_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _c过程是指细胞培养，过程包括_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _培养和其中_ _ _ _代内的细胞属于细胞株。，b淋巴细胞，抗体，细胞融合，惰性病毒，双亲细胞，分泌抗体，无限增殖，第一，系，50，课后练习，1。在单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，用特定培养基筛选杂交细胞，在该培养基中存活和不增殖的细胞()淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞()B淋巴细胞()B淋巴细胞()淋巴细胞)B淋巴细胞()淋巴细胞()B淋巴细胞()淋巴细胞()B淋巴细胞()自身融合细胞()B动物细胞融合和植物原生质体融合是()A .细胞膜的流动性b .细胞膜选择通透性d .细胞质酶活性，A，I .多项式提问，3 .“生物导弹”是()a .单克隆抗体b .杂交瘤细胞c .生产特定抗体的b淋巴细胞d .单克隆抗体与抗癌药物连接，d，4 .仅启用动物细胞融合的一般诱导方法是()a. pegb。惰性病毒c .电刺激d .离心，a，2。回答性，1。淋巴细胞发展为动物体-属-细胞分化。2.杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖，氨基酸的主要方法是-骨髓，造血，周血转运，3。思考和探索1。植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有何不同？2.制造单克隆抗体的时候，为什么选择b淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，制造杂交细胞呢？提示：植物细胞杂交技术与植物细胞融合技术基本相同，但不同之处在于在植物细胞融合之前，必须先去除细胞壁，然后再融合；动物细胞融合是两个单独的细胞直接融合。提示：哺乳动物感染抗原后，身体形成相应的b淋巴细胞，b淋巴细胞分泌相应的抗体，使其凝集或杀死。动物在免疫反应过程中，每个b淋巴细胞可以分泌出一种特定的抗体，要获得很多特定的抗体，就必须增殖能够分泌该单个抗体的b淋巴细胞。b淋巴细胞有产生单一抗体的能力，但不能在体外增殖；骨髓瘤细胞是在体外培养条件下能无限增殖的癌细胞，但不能产生抗体。因此，将b淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，产生杂交细胞，在两个亲本细胞的特性体外培养条件下持续增殖，同时产生特定抗体。教育参考，1 .动物细胞融合的成功例子是什么？生物种细胞衍生成功时代酵母-鸡原生质体-红细胞1975年人类-胡萝卜多癌细胞-原生质体1976年人类-老鼠纤维肉瘤细胞-畸胎瘤细胞1978年，要了解更多病例，需要经常查看更多的研究报告。2。为什么用多个细胞代替两个，作为动物细胞间的融合？就目前常用的细胞融合方法而言，无论使用物理、化学还是生物方法，其融合率都不能达到100%。如果只融合两个细胞，其效率太低，不一定能得到融合细胞。更重要的是，即使两个细胞融合，也不一定是研究者期待的细胞类型。动物细胞融合技术最重要的应用是单克隆抗体的制备。我们以制造单克隆抗体为例说明这个问题。我们的身体能产生数百万种以上的特定抗体，但每个b淋巴细胞只分泌一种特定抗体。如果将一个脾细胞(包括b淋巴细胞)和一个肿瘤细胞杂交，我们不能确定该脾细胞分泌的抗体是否正是我们需要的；如果将大量脾细胞和肿瘤细胞融合，可以从融合细胞中筛选出分泌所需抗体的杂交瘤细胞。3。如何进行异种杂交瘤细胞的抗体检测及克隆培养？融合的细胞通过选择培养基培养后能存活的细胞是杂交细胞。但是，这种异种杂交瘤细胞并非都是分泌必要抗体的细胞。通常选择“有限稀释法”。稀释异种杂交瘤