临床检验方法评价PPT课件

临床检测方法评价，王治国卫生部临床检测中心，cncc新方法进入常规应用过程流程图，包括临床实验室检测系统、临床检测系统检测结果所需的试剂、校准物、仪器、消耗品和具体操作步骤。 试剂为化学溶液，用可预测的方法给出分析项目反应的可预测反应，可以测定每本书中存在的分析物的量。 校准物是含有已知量分析物的物质。 仪器将样品与试剂混合，参考已知的校准物值，患者、房间质量评价和质量控制样品的反应，或者分析物可预测的化学反应产生各样品的结果。 消耗品包括放入样品、分配样品和试剂、测定化学反应所需的物品。 工艺包括准备检验样品、准备试剂和校样、建立和维护仪器、结合样品和试剂、计算分析物的量、报告结果所需的一切步骤。临床实验室试剂的选择、SFDA批准分析系统(试剂校准仪器)及检测结果的计量学可追溯性试剂的稳定性：(有效期、待机稳定期)及校准周期方法学性能：精度、线性、可比性、分析方法排序、决策方法(definitivemethod ) :未发现不准确或不确定性的原因参考方法(referencemethod ) :经过详细的研究，证明了可以忽略其不正确性和不正确性的方法。 常用方法(routingmethod ) :满足临床和其他目的的日常使用方法。 临床检验方法学分类、临床检验方法学分类、临床检验方法分类、临床检验方法分类、参考方法、决策方法、准确度、应用范围、不同方法之间的关系、标准品等级、标准品(reference material ) :具有一个或多个良好特性值的材料或物质，可用于仪器设备的校正、评估测量方法或分配给其他物质一级标准品(一级参考物):具有最高计量学特性，一级参考测量程序值二级标准品：用一级标准品校准，设定二级参考方法值。 校样(calibrator ) :用辅助标准品校样和校样的常规方法值。 一级标准物质，人血清无机成分分析标准物质GBW09135血清胆固醇标准物质GBW09138， 二级标准物质红细胞微粒标准物质GBW(E)090001胆红素标准物质GBW(E)090002氰化血红蛋白溶液标准物质GBW(E)090004纯化血红蛋白标准物质GBW(E)090011、可追溯链的不确定度、真值，初级二级参考方法，厂家标准方法，厂家标准方法，实验室常规方法，不确定度，方法选择要求，(1)实用要求在决定新方法和仪器是否在某个实验室运行之前，必须先考虑一些实际因素。 包括样品种类、样品量、分析能力、旋转时间、试验菜单、样品处理、分析批量大小、人员技能要求、各试验成本、校准方法、校准频率、随机处理能力、质量控制方法、空间需求(包括试剂贮藏)、废弃物处理要求、化学危险品和安全考虑。 (二)性能参数与方法和设备性能相关的特点包括其精度、分析范围、分析回收、分析灵敏度、分析奇异度、空白读数、检测界限、干扰、精度、试剂稳定性、“鲁棒性”以及样品的相互作用等。 有关分析方法的基本概念、校准(calibration )是指用于特定测定器或测定系统所指示的测定值、或者以实物测定器或标准物质所代表的测定值与以对应的标准再现的测定值之间的关系的一系列操作。(JIF1001-1998 )、分析方法基本概念、方法评价主要内容定量实验室方法初步评价(CLSIEP10 )临床化学设备操作精度评价(CLSIEP5)采用患者标本进行方法学比较与偏差评价(CLSIEP9)定量分析方法线性(CLSIEP6)临床化学干扰试验(CLSIEP6) 基质效果评价(CLSIEP14 )精度和精度性能的用户实验(EP15-A )临床实验方法综合分析误差的推定(EP15-A )临床精度评价(CLSIGP10 )临床实验室如何定义和确定参照区间(C28-A2)。 ncclsnationalcommitteeforclinilicallorystanddlscicclicallandlortytandardsinstitute . 临床化学设备精度评估evaluationofprecisionformationformenconforcinicalchemistrydevices，ApprovedGuideline，1984，EP5，精度内容，批次内不精度批次间不精度日不精度总不精度实验方法、试剂和校正物：同批号样品：基质与临床样品相似，浓度不低于2个(参考医学决定水平)。 实验天数： 20天以上的实验次数：每天2次，每批2次，每样品2次，精密的实验，批次内的不精密度，I=总实验天数(一般为20天) j=每天测定的批次(一般为2次) Xij1=第I天j次实验的第1次结果Xij2=第I天j次实验的第2次(重复批次间的不精确度I=实验天数(通常为20天) Xi1=第一天的第一次实验结果的平均值(通常为2次) Xi2=第二天的第二次实验结果的平均值(通常为2次) xi2、日间不精确度、I=实验天数X=全部结果的平均值Xi=第一天的全部结果的平均值、总不精确度、精度性能的用户验证、实验较少利用方差分析进行数据统计。 计算批次内的不精度(CV和SD )，与制造商批次内的不精度进行比较。 计算总不精度(CV和SD )，与制造商的总不精度进行比较。 或者比较总不精度和不精度分析目标。 采用，NCCLS文件EP9-A，患者样本对方法比较与偏差进行评估，批准指南，1995年12月.目的与用途，在引入新方法前，或在替代其他方法时进行偏差分析，对同一分析项目的两种分析方法之间的偏差进行评估。熟悉评价操作要求、仪器操作，对评价方案质量控制充分的数据、实验样品要求、来源于健康人和患者，无干扰，尽量避免贮藏的测定物浓度范围应在医学决定水平范围内均匀分布至少40例，增加数量可以提高可靠性对于与已知干扰物具有良好精度的同一单位的国家标准和参考方法的偏差是众所周知的。 测定方法是每天分别用两种方法进行测定。 测定顺序为： 1、2、3、4、5、6、7、88、7、6、5、4、3、2、1测定次数：至少5天，共计40个样本，数据监视，通常品质管理：系统误差人为误差，熟悉实验步骤仪器和方法收集数据的检查方法内的偏离点的边界：(双重测定)相对差的平均值的4倍，绘图， 散点图：平均散点图(x，y )所有值散点图(Yij，Xi )的偏差图：散点图(Yij-Xij )，Xi )、平均散点图(x，y )、偏差图：每次测定的y平均值和x平均值之差-对应的x平均图2个方法间的偏差值的目视检测、 边界： 4倍的两种方法之间的绝对偏差的平均绝对偏差允许范围：相对偏差允许范围：适合范围：计算r，r2=0.95的范围扩大r20.95的数据范围线性回归：计算均匀离散度的直观检验期待偏差和信赖范围线性回归方程偏差(高、中、低三组) 计算解释实验结果，与内部标准相比，正确的用户选择了20名患者的新鲜标本，其中包含的分析物浓度分布在实验方法的可报告范围内。不要使用分析物浓度超出可报告范围的样品。 两种方法必须在同一天的4小时内完成标本的检查。 如果计划进行35天的试验，每天进行57件标本检查，得出最可靠的结论。比较、评价方法的接受性、1 .试验中确定的误差推定和分析目标中确定的规范中确定的界限。 2 .如果所得总误差值小于方法中可接受的总误差，则认为候选方法的性能是可接受的。 3 .如果发现一个或多个分析参数大于方法的容许误差，则候选方法的性能被认为是不可接受的。 发生这种情况时，如果必须改善方法的性能不能改善的话，就必须废弃这个方法。根据允许不正确制定的本国各实验室的室内变异系数水平来决定。 基于房间质量评估容许总误差(TEa )而容许的基于CV33601/4TEa、1/5TEa、1/6TEa生物学变异而容许的CV3360、临床检查方法评估决策图的制作与应用、定量测量程序的线性评价evaluationofthelinearityofquantitativemeasurementprocedures : astatisticalapproachep6- a. 用户可以为分析方法设置路线范围。定义、实验范围(AssayRange ) :或线性范围(LinearRange ) :与分析系统最终输出的、浓度或活性值范围、定义、线性：曲线接近直线程度的量完全系统反应有关(这是最后的分析结果或解释)。 不仅是仪器的输出结果)、ScopeandLimitations、线性是分析方法的特征，正确性和精度不同。 线性实验应采用与被分析物基质类似的样品。 线性检测“系统”反应包括校准、线性化技术、系数和仪器反应。包括检测系统、TestingSystem的所有检测过程、仪器、样品、人员、试剂、消耗品和程序注意：样品类型、温度、湿度等使用者需求，具有通过简单的实验验证厂家标识线性范围和定量分析方法分析范围的属性(方法特征)作为实验室的方法论、执行仪器熟悉过程、分析过程的实验室人员应掌握仪器操作和维护步骤、样品准备方法和校准。 简单的设备需要五天以下的时间。 复杂的多通道设备需要5天以上的时间。实验周期在完成仪器熟悉过程后开始实验，收集数据。 所有实验和数据采集必须在同一工作日内完成。线性评价实验样品要求、样品数：线性验证：57个浓度水平，重复2次测定。 建立线性：在7-11个浓度水平上测定24次基质：应使用与患者样品类似的样品，或注明基质种类。可用样品，患者混合血清(理想样品基质)确立线性范围：高值样品：比上限低20-30%样品：线性下限以下。可使用的样品、含添加物的混合患者血清：添加物在不存在干扰物的情况下，不需要高纯度。 经处理材料稀释的混合血清可降低分析物浓度，材料处理：透析、热处理、色谱法。可用样品、生理盐水稀释的混合血清：在线实验中使用这样的样品，可以隐藏不同的基质效果。 商品质量控制和校样：这样的样品不是正常的生理形式，可以隐藏实际的线性结果。可使用样品，以不同比例稀释商品质量控制物的水溶液：一般无基质效果的其他溶液：基质效果与有机溶剂类似，推荐样品添加材料，ALB :白蛋白干燥粉， humanfractionV .乙醇：无水乙醇AMS :腮腺或胰腺提取物BIL :胆红素纯品Ca:CaCO3Cl:NaCl， CHOL :胆固醇纯品或稀释品质控制品CO2:CaCO3CREA :标准液或高值血清-ALT :纯酶GLU :右旋糖AST :纯酶alt :纯酶，推荐样品添加材料，Lipase :胰腺提取物Mg:MgCl2P:K(H)2PO4或Na(H)PO4TP BUN :得不到高值患者样品时，使用标准储备液或干尿素。样品的分析顺序、分析顺序应随机排列。 如有显着的携带污染，应用空白分离样品。 在各实验组内至少分析57个不同浓度水平的样品。样本浓度范围必须复盖待评估的线性范围的上下限。 如果评价结果不满意，请重新设定浓度。 直线范围至少应保留5-7个浓度。 样品准备，足量混合血清。 低浓度混合血清(No1)高浓度混合血清(No5)血清(No2):3份“No1” 1份“No5”血清(No3):2份“No1” 2份“No5”血清(No4):1份“No1” 3份“No5”、样品浓度计算、 C1V1 C5V5浓度=-v1 V5，数据收集x1y1-1y1-2 y1-3 y1-4 x2y2-1 y2-2 y2-3 y2-4x 3y3-1 y3-4y4-1y4- 2y4- 4x 5y5-1y5- 2y5- 3y5- 4，数据评价，有无明显的数据错误的观察有明显的异常的情况，必须判断是否是偏离点的偏离点超过2点的话，保持所有的数据，或者重做所有的实验。离群点检查被用于特定浓度y值的离群点的检查。 将4个重复值从大到小排列(Y1到Y4)。 计算： D=Y1-Y4可能是离群点，计算： D1=(Y1-Y2)/D或Y4可能是离群点，计算： D4=(Y3-Y4)/D，离群点确定，判决值(critical value ) (0.05 ) 0.765 (0.01 ) 0.889，绘图和评估，线性X-Y图，线性X-Y图反应值或设备的输出值为y轴的目视离群值： (Y=aX b )目视线性判断是否满足要求进行统计学判断和评价。多项式回归分析、一次方程式： y=b b1x二次方程式： y=b b1x b2x2三次方程式： y=b1xb2x3x3、EP6-A准则的主旨是采用多项式回归分析方法来判定线性。 多项式回归分析是比较1次(直线)、2次(抛物线)和3次(s字线)多项式的回归分析法。 多项式回归分析的最大优点是通过增加x的高次项近似直到满足实测点，能够建立最佳的多项式回归方程式。 注意：统计学标