蛋白质翻译课件

.,1,ProteinBiosynthesis(Translation),蛋白质的生物合成(翻译),第十二章,.,2,蛋白质的生物合成过程就是将mRNA分子中由碱基序列组成的遗传信息，通过遗传密码破译的方式转变成为蛋白质中的氨基酸排列顺序，因而称为翻译（translation)。,.,3,第一节蛋白质合成体系ProteinBiosynthesisSystem,.,4,.,5,20种氨基酸作为原料酶及蛋白因子，如IF、eIF等ATP、GTP、无机离子,参与蛋白质生物合成的物质包括：,三种RNAmRNArRNAtRNA,.,6,mRNA是遗传信息的携带者,遗传学将编码一个多肽的遗传单位称为顺反子（cistron）。原核细胞中数个结构基因常串联为一个转录单位，转录生成的mRNA可编码几种功能相关的蛋白质，为多顺反子（polycistron）。真核生物一个mRNA只编码一种蛋白质，为单顺反子（singlecistron）。,.,7,mRNA结构简图,.,8,mRNA上存在遗传密码,mRNA分子上从5至3方向，由AUG开始，每3个核苷酸为一组，决定肽链上某一个氨基酸或蛋白质合成的起始、终止信号，称为三联体密码（tripletcodon）。,.,9,ORF,从mRNA5端起始密码子AUG到3端终止密码子之间的核苷酸序列，各个三联体密码连续排列编码一条多肽链，称为开放阅读框架(openreadingframe,ORF)。,.,10,遗传密码表,密码子的第一个字母,密码子的第二个字母,.,11,1.连续性（commaless）,遗传密码的特点,编码蛋白质氨基酸序列的各个三联体密码连续阅读，密码间既无间隔也无重叠。,.,12,重叠密码,非重叠连续的密码,不连续的密码,.,13,基因损伤引起mRNA阅读框架内的碱基发生插入或缺失，可能导致框移突变(frameshiftmutation)。,.,14,由于对mRNA外显子的加工，造成mRNA与其DNA模板序列之间不匹配，使同一mRNA前体翻译出序列、功能不同的蛋白质。这种基因表达的调节方式称为mRNA编辑（mRNAediting)。,mRNA编辑,.,15,2.简并性（degeneracy）,遗传密码中，除色氨酸和甲硫氨酸仅有一个密码子外，其余氨基酸有24个或多至6个密码子为之编码。,.,16,遗传密码的简并性,.,17,密码子简并性的生物学意义：减少有害突变。遗传密码的特异性主要取决于前两位碱基。GCUACUGCCACCGCAACAGCGACG,Ala,Thr,.,18,3.通用性（universal）,蛋白质生物合成的整套密码，从原核生物到人类都通用。有少数例外，如动物细胞的线粒体、植物细胞的叶绿体。密码的通用性进一步证明各种生物进化自同一祖先。,.,19,4.摆动性（wobble）,tRNA上反密码子的第1位碱基与mRNA密码子的第3位碱基配对时，可以在一定范围内变动，即并不严格遵循碱基配对规律，这一现象称为摆动性。,.,20,摆动配对,.,21,.,22,二、核蛋白体是多肽链合成的装置,.,23,核蛋白体的组成,.,24,.,25,原核生物核蛋白体结构模式,.,26,30S小亚基：有mRNA结合位点50S大亚基：E位：排出位（Exitsite）转肽酶活性大小亚基共同组成：A位：氨基酰位(aminoacylsite)P位：肽酰位(peptidylsite),.,27,三、tRNA与氨基酸的活化,反密码环,氨基酸臂,tRNA在翻译过程中起接合体（adaptor）作用，又是氨基酸的运载体。,.,28,氨基酸+tRNA,氨基酰-tRNA,ATP,AMPPPi,氨基酰-tRNA合成酶,（一）氨基酰-tRNA合成酶(aminoacyl-tRNAsynthetase),氨基酸的活化,.,29,第一步反应,氨基酸ATPE氨基酰-AMP-EAMPPPi,.,30,第二步反应,氨基酰-AMP-EtRNA氨基酰-tRNAAMPE,.,31,.,32,氨基酰-tRNA合成酶对氨基酸和tRNA都有高度特异性。氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性(proof-readingactivity)。氨基酰-tRNA的表示方法：Ala-tRNAAlaSer-tRNASerMet-tRNAMet,.,33,氨基酸的活化形式：氨基酰tRNA氨基酸的活化部位：羧基氨基酸与tRNA连接方式：酯键氨基酸活化耗能：2个P,.,34,真核生物：Met-tRNAiMet原核生物：fMet-tRNAifMet,（二）起始肽链合成的氨基酰-tRNA,.,35,fMet-tRNAifMet的生成：,.,36,第二节蛋白质生物合成过程TheProcessofProteinBiosynthesis,.,37,蛋白质合成中mRNA模板的方向：53；蛋白质的合成方向：N端C端。蛋白质合成过程：起始延长终止,.,38,一、肽链合成起始,指mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核蛋白体结合而形成翻译起始复合物(translationalinitiationcomplex)。参与起始过程的蛋白质因子称起始因子（initiationfactor，IF）。,.,39,参与起始过程的蛋白质因子称起始因子（initiationfactor，IF）。原核生物起始因子有三种：IF-1：占据A位防止结合其他tRNA。IF-2：促进起始tRNA与小亚基结合。IF-3：促进大小亚基分离，提高P位对结合起始tRNA敏感性。,.,40,（一）原核生物翻译起始复合物形成,核蛋白体大小亚基分离；mRNA在小亚基定位结合；起始氨基酰-tRNA的结合；核蛋白体大亚基结合。,.,41,IF-3,IF-1,1.核蛋白体大小亚基分离,.,42,IF-3,IF-1,2.mRNA在小亚基定位结合,.,43,S-D序列：在原核生物mRNA起始密码AUG上游，存在49个富含嘌呤碱的一致性序列，如-AGGAGG-，称为S-D序列。又称为核蛋白体结合位点（ribosomalbindingsite，RBS),.,44,S-D序列,.,45,IF-3,IF-1,3.起始氨基酰tRNA与小亚基结合,.,46,IF-3,IF-1,IF-2,GTP,GDP,Pi,4.核蛋白体大亚基结合,.,47,IF-3,IF-1,IF-2,-GTP,GDP,Pi,起始过程消耗1个GTP。,.,48,二、肽链的延长,指按照mRNA密码序列的指导，依次添加氨基酸从N端向C端延伸肽链，直到合成终止的过程。,.,49,肽链的延长是在核蛋白体上连续性循环式进行，又称为核蛋白体循环（ribosomalcycle)，每次循环增加一个氨基酸，分为以下三步：进位（entrance）成肽（peptidebondformation）转位（translocation）,.,50,肽链合成的延长因子,.,51,（一）进位,指根据mRNA下一组遗传密码指导，使相应氨基酰-tRNA进入核蛋白体A位。,.,52,延长因子EF-T催化进位（原核生物）,.,53,.,54,Tu,Ts,GTP,GDP,Tu,Ts,GTP,.,55,（二）成肽,是由转肽酶（transpeptidase）催化的肽键形成过程。,.,56,（三）转位,延长因子EF-G有转位酶（translocase）活性，可结合并水解1分子GTP，促进核蛋白体向mRNA的3侧移动。,.,57,.,58,fMet,fMet,.,59,.,60,三、肽链合成的终止,当mRNA上终止密码出现后，多肽链合成停止，肽链从肽酰-tRNA中释出，mRNA、核蛋白体等分离，这些过程称为肽链合成终止。,.,61,终止相关的蛋白因子称为释放因子(releasefactor,RF),识别终止密码，如RF-1特异识别UAA、UAG；而RF-2可识别UAA、UGA。诱导转