WT1基因在肾母细胞瘤中研究进展

2(X)X 年第02卷增刊 W TI 基因在肾母细胞瘤中研究进展 深圳市中心医院外科( 158 036)蔡志明 周锦棠综述 肾母细胞瘤 , 又称Wi业瘤 、 肾胚胎瘤 , 是 2 一 5岁儿童最常 见的恶性实体瘤之一 , 发病率约为 11 /o , 仰 。 研几飞基因 是世 界上继视网膜母细胞瘤抑制基因(B R) I之后被成功克隆的第二 个抑癌基因 , 它首先发现存在于肾母细胞瘤和一些先天性泌尿 系畸形中 , 本文就Wll基因在肾母细胞瘤中的作用研究进展和 一些可能的发生机制作一综述 , 以供参考 。 Wl , 1的分子生物学研究进展 遗传学分析肾母细胞瘤抑制基因(Wl , 基因)定位在染色体 l l P z3(解z) 、 l zPzs(w几)和16q(硒叹3) 。 目前研 究较多的是 W,1 。 它编码1 0个外显子 , 长约5 0K B , 其中有四个锌指蛋白 。 确Tl蛋白质分子量为5 2 一 5 4幼 。 含有两个功能区 : 一个定位于 敖基端 , 富含脯氨酸和谷氨酸胺 ;另一个定位于按基端 , 含有 4 个半胧氨酸一组氨酸锌指结构区 。 从 刃)1被认为是肾母细胞瘤 中唯一起作用 的抑癌基 因 。 但许多资料表明 , 留rl是一个双重 作用因子 。 它通过 Wll基因编码不同的剪切蛋白来发挥它生 长抑制或生长促进作用 。 Wl ,1 基 因在锌指结构 3 一 4 之间有一 段 DN A连接区易发生期S三种氨基酸插入突变 , 产生 K IS + 和 幻s 一 两种蛋白亚型川 。 K巧 十 在任何时候表现为生长抑制作 用 , 而K l导则视其他情况而定 , 如 KIS 一 可诱导细胞发生 凋亡 , 且不易被 Bd 一2, BA1等凋亡抑制基因所抑制s ; 在锌指结构 NH Z末端有人认为可能存在或缺少1 7 个氨基酸 , 因而也产生两 种Wr l基因剪切蛋白亚型 , 17从+和1 7 从 一 , 1 7 从 + 可与Wr l 基因的 DN A 连接区连接后起生长抑制作用 , 11 7AA 一 的生长抑 制作用可被其它因素减轻 , 它参与机体细胞的异常生长 。 因此 人们认为wl ,l 可产生四种亚型 , 即 K巧 + 1 7AA + , K IS 一 1 7 从 十 , K IS + 1 7 从 一 , K巧 一 1 7 从 一 。 它们之间的功能不同 , 决定了 wl l 是一种双重转录因子 。 构区域A娜男变成 TnO9 4 ;在 wi i ln s合并功认GR综合征中 , 经常 有226个碱基发生缺失 , 从而导致移码突变 , 这使锌指结构少了 2 15个氨基酸 , 从而使锌指结构遭到破坏 , 以上这些变异都可使 w rl基因正常功能丧失v 。 在对单侧Wil n 阳 瘤突变研究中发现 , 1 8例单侧Wib阴瘤仅 有 1例发生突变 , 突变部位在第 9个外显子 , 突变部位与 e D n” , D诩h综合征一样 , 但此病人没有e D nys 肠朋h综合征的三联征 的临床症状 。 用代- R义芜P方法对 9 8个病人的1 0个外显子进 行检测8 l , 仅有 6个点突变 , 且都为体突变 , 不可能产生遗传性 (及m宙 ne )变异 。 双 仃 , 1发生遗传性变异仅在Wr 合并有严重的 泌尿系统畸形才出现 。 而且发生的概率很小 。 因此有人认为 T n 结构变异可能是T r或隐翠发生的诱发因素 。 当然 , 目前对于突变研究尚有许多不 足之处 : 虽然有许 多报道 , 但大多数为偶发性报道 ; 且多数的研究方法均采用杂 合性分析 (C P- RO L H分析)作为基因突变存在的证据 , 但这种方 法有一定程度的缺陷0 J ;确Tl 产生 突变 , 怎样导致肿瘤的发 生 , 关于这一方面属于深层次的研究 , 难度较大 , 故报道也不算 太多 。 3 WT1与细胞增殖 2 Wr 1基因突变研究进展 目前对Wn基因的研究重点也集中在突变方面 。 研究认 为认ql突变发生率低 , 仅有1 0% 一 巧% 。 且 硒印1 突变与生殖 泌尿系异常有关 。 尤其是合并隐皋或尿道下裂的 双 几 , 1发生突 变的可能性远大于没有发生生殖泌尿系异常的Wi i l n s 瘤 。 而双 侧Wi i l l” 瘤发生 从门1 基因突 变的机率远大于单侧Wil r n s 瘤 , , j 。 W? 1基因由o r 个外显子构成 , Wl , l 基因突变首先在 W人G R 综合征和e D - n y s D ra sh 综合征有报道 。 在w山加瘤合并有e D哪 - 压朋h合征中 , 外显子 8一9经常发生突变 , 如第 9个外显子的等 位基因经常发生点突变 , C 一 115 0 变成,115 0 , 导致第三个锌指结 细胞增殖 的调控受正负两类因素所调节 , 两者相对稳定以 维持细胞正常的增殖和分化 , 正常的正性调节是促使细胞进行 增殖 , 阻止其分化 , 而正常的负性调节是抑制增殖 , 促进分化成 熟 。 而抑制癌基 因的调控应着重在正常负性调节 , 即抑制增 殖 , 促进分化成熟 。 Wll是目前公认的抑癌基因 。 它可抑制一些原癌基 因和 生长因子的表达 , 如胰岛素样生长因子2(G I - F2 ) , 表皮生长因子 ( EG F) , 转化生长因子爪哪田等 0 J 。 解 1表达高的组织中 IG- F2 的表达较弱 , 细胞的生 长受到抑制 。 目前认为是因为 确叮】能够抑制某些生长因子或原癌基因启动子 的启动而发挥 作用 。 但由于 Wr l作用的生理靶基因没有被找到 , 因此也有人 认为Wrl发挥其生长抑制作用是通过另一种抑制癌基因蛋白 即B R抑制相关蛋白朋月、起作用l l 。 但现在研究发现孵1 是一种双重作用 因子 , 它可以促进或抑制细胞的增殖 。 如在对 急性白血病中Wrl的研究发现 , 它具有生长因子样作用 , 即促 进细胞增殖 。 关于它的调节机制 , 我们认为与Wl ,1 基因的四种 表达蛋白亚型有关 。 但有人也认为在Wr l的启动子中有一高 度保守区 , 它位于 3 4和7 1核着酸之间 , 有 - S P l 、刊以 2 、刊以. 8的 结合位点 , 这些结合位点与W”启动子之间的调控是Wr生 长 调控的关键l z . 1 3 几 国外医学泌尿系统分册 钙拮抗剂在肾移植领域中的应用 重庆第三军医大学新桥医院泌尿外科 (4仪刃37)范 明齐综述 莫华根审校 钙拮抗剂在肾脏移植领域中的应用研究 , 源于八十年代中 期中始 。 随着肾移植工作的广泛开展 , 钙拮抗剂的应用 可渗透 到肾脏移植领域中的各个环节包括 : 肾脏保存 、移植术中及术 后的应用 。 本文以肾脏保存为重点 ,对其在 肾移植方面应用研 究进展作一综述 。 钙拮抗剂在肾脏保存中的作用及应用 w卿e r K首先将钙拮抗剂( c a l c iu ma n tag0 l u s s t)应用 于人体 肾移植术中 , 并发现其能预防术后急性肾功能衰竭 , 提高环抱 素( A c s A )血药浓度的作用川 。 目前在肾移植工柞中 ,供肾缺乏 已成为一个普遍 突出 的问题 , 尽管如此 , 据国外权威机构统计 仍有 4%的供肾由于种种因素而废弃z , 国内尚无有关统计资 料 。 现零上温度肾脏低温保存只能有7 0小时左右 , 尸体肾脏得 不到充分合理利用 , 也无法进行更精确的组织配型及对受者进 行充分的术前准备 , 这已成为进一步提高肾移植质量的严重障 碍 。 随着环抱素 A在肾移植的常规应用 , 肾保存的研究有向着 4WI T 与细胞分化 叼 一凡 可能参与从门细胞凋亡的调控 。 B d , Z n川四A 在分化好 w T 中较多 , 而在分化差 Wr中没有 B C I一2 的表达 , 显示 B C I 一 2不 是职汀预后不良的标志 。 W口 n13 瘤是小儿最常见的恶性实体瘤 , 它可分为胚细胞型 , 上皮细胞型 , 间质型和混合型四大类 。 我们发现上皮细胞 、 间叶 细胞和胚细胞是肿瘤三种主要成分 。 而确T l基 因蛋白在胚细 胞中一直都有表达 , 而间质细胞和上皮细胞总表达较少或不表 达 4 J 。 目前尚不清楚在间质型中WTI的表达总是很低的原因 。 但有人认为刃了r l基因表达是细胞分化的标志(M掀e r) , 它与细 胞分化有关 。 胚细胞可能经历上皮或间质分化过程 , 它可能是 上皮细胞或间质细胞分化的前体细胞 , Wrl的缺失或失活可能 使胚细胞向间质方向发展 t5 。 关于这一点可从急性白血病中 得到证明 6, w T I与细胞分化成反比 。 6 展望 肿瘤的发生是多因素 、 多基因参与的过程 。 原癌基因的激 活和抑癌基回的失活在肿瘤发生中起重要作用 。 但尤以抑癌基 因失活占主要地位 。 目前对Wll的基因认识深度仍很有限 , 它 对细胞增殖 、分 化 、 凋亡的调节以及它与其他癌基因与抑癌基因 的关系都不是很清楚 。 从Tl基因突变在从门 , 病人中仅占一小部 分 , 因此双n l基因与其他基因的相互作用以及它与增殖 、分化之 凋亡的关系应是以后 Vr r研究的重点和难点 。 5 Wl 、1 与细胞凋亡 参考 文 献 在恶性肿瘤的发生过程中 , 除了增殖和分化异常外 , 大多数 肿瘤还存在细胞凋亡减少的情况 。 因为细胞凋亡的减少也可导 致肿瘤细胞的异常生长 。 细胞凋亡的调控因素很多 , 目前尚不 清楚具体作用途径 。 c B- l 2和。my 。 在细胞凋亡的调节中非常 重要 。 叼 一 1 2基因是1 98 5年研究滤泡性淋巴瘤中被发现的一种新 型的原癌基因 , 它能够抑制细胞凋亡 ,它 的过表达一直被认为是 肿瘤产生的重要原因 , 同时也是衡量肿瘤对治疗反应的指标 。 Gm yc既能促进细胞的增殖 , 又能促进细胞凋亡 。 研究发现 恻 能够抑制 d - B 2 和Gc m y 启 动子转录活动【 0 , 故有人猜测 W, 1功能失活或丧失可导致Bd . 2和GD Iyc功能失常引起肿瘤 的发生 。 Ta r园山等 7 对 2 6例wr病人进行细胞凋亡 Bd 2的检 测 , 发现细胞凋亡在Wi il n s瘤 中 1用病人较 m 病人明显减少 ; 高 分化较低分化明显较少 , 提示细胞凋亡参与了Wr的形成过 程 。 叼一在Wr中与细胞凋亡调节 中无关 , 这可能是因为Wn 基因剪切蛋白KIS .本 身可诱导细胞凋亡 , 它不能够被 Bd . 2 调 节所抑制 。 显示氏1 . 2虽然在细胞凋亡调节中非常重要 ,但它不 是影响细胞凋亡的唯一因素 。 又有人l s t 提出氏LZ相关蛋白 IG倪目erM , e ta l . N8t U re , l夕男);洲3:刀4 一 刀8 2Da朽e sR , e t a l . c R图 , l卿;59刀(s u耐) : 274 7 一7 5 2 3 W七b 日te r N J . d a l . iB佣he mMo fM曰 , 1卯7;6 2 ; 1 39 一 15 0 4M.水eAL , e ta l . Ca nc e r R。 , l卯7;57 : 135 3 一 136 3 5Kd公e rB , e ta l . P.五曲摘R翻 , 19性 珍;4 5:l8 7 一 19 0 6D日le rL , e t日 . J已n O n c o l , 19 98;5:363 4 一 3引O 7A上a sa k a y , d目 . 几B S Ug 门 , 19 93;3 17 :39一 4 3 8Va z .翅困 R , e t日 . 1、忱N司A。日翻 , 1卯4;9 卜3 5 5 4 一3558 gQ 用日1JK , 改a l . i B r i th s JQ叨 ee r , 1卯3;6 7 : 12 59 一 12 61 10 压丽 t t SM , d日 . 0叨c e rR。 , l卯5;5 5 :538 6 538 9 110皿1 巧 , e ta l . JBio lh C助 , 1卯8;刀3:刀仓幻 一 刀仪刃 12F I 川廿CC , e t目 . JBio f C h翻 , 19 97;刀2 :汉巧7 8一义拓幻 13 压 s C. .已Ml , e t目 . Nud eie Add sR . , 1卯7;2 5 : 4 3 14 一 4 3 刀