[史上最强生物]动物细胞工程ppt课件

1.为什么要培养动物细胞？培养动物细胞有什么要求？选择实验材料、药性、毒性检查、细胞分泌物提取等胚胎细胞或幼年动物组织，是因为分裂增殖能力强。徽章是液体还是固体？徽章的成分是什么？培养基是液体，成分与动物环境相似。动物血清，4。动物细胞培养条件的特征是什么？体温和PH应类似于动物的环境。1，动物细胞培养是从动物身体中移除相关组织，将其分散到个别细胞中，然后放入适当的培养基中，使这些细胞生长和增殖。培养动物细胞需要什么条件？液体、营养(血清)、PH、温度、气体、无菌等；2、动物组织块、细胞悬浮、原代培养、传代培养、胰蛋白酶处理均分布在单个细胞中，是年轻动物的长期组织；动物胚胎，抑制细胞附着接触，原代培养传代培养，添加培养液，胰蛋白酶等处理附着细胞，适当条件，不死细胞，3，胚胎移植，体核移植过程(体细胞克隆动物)，4，体核移植技术问题，(1)成功率极低人鼠细胞如何实现融合？动物细胞融合的实用意义是什么？6，3，动物细胞融合和单克隆抗体1。细胞融合：是指两个或多个细胞融合成一个细胞的过程。自然发生：受精卵人工诱导：使用诱导剂的动物细胞融合诱导因子：聚乙二醇、惰性病毒或电击等。7，什么是病毒灭活？消亡是指可以利用物理或化学手段感染病毒，但不会破坏病毒的抗原结构。惰性病毒诱导细胞融合的原理病毒表面包含的糖蛋白和部分酶与细胞膜的糖蛋白起作用，使细胞相互凝集，细胞膜的蛋白质分子和脂质分子重新排列，细胞膜打开，细胞融合。8，灭活病毒将细胞膜的蛋白质分子和脂质分子重新排列，细胞膜打开，细胞融合，9，正在融合的淋巴细胞和骨髓瘤细胞，正在融合的鸡血细胞，动物细胞融合的原理：细胞膜的流动性，10，将两个不同的动物细胞放在一起，用消灭的病毒处理细胞。有丝分裂后形成两个完整的杂交细胞，11，2。动物细胞融合技术的应用：克服性杂交的局限性，实现远距离杂交；为制造单克隆抗体开辟了新的途径，12、使用相应抗体检测乙型肝炎病毒抗原，3 .单克隆抗体制造医院一般如何检测人体是否有乙型肝炎病毒？乙型肝炎病毒模式，引起身体特定免疫反应的物质称为抗原。什么是抗原？例如花粉、细菌、病毒等。有时，自己的组织或细胞成为癌细胞等抗原。13，抗原决定基：抗原表面的特定化学基决定抗原特异性，是免疫细胞识别抗原的重要依据。如果各抗原的晶体数不同，同一抗原的晶体可能有多种。14，抗体是什么？产生什么样的细胞？主要分布在哪里？扮演什么角色？如果身体接受抗原刺激剂，由效果b细胞(血浆细胞)产生，并具有免疫功能的球蛋白抗体，能与抗原特定结合。抗体也分布在血清和组织液及外分泌液中。15，抗体是相应抗原特异性结合，16，抗体是由什么细胞产生的？主要分布在哪里？17，18，血清抗体(也称为多克隆抗体)是从血清中提取的抗体混合不同淋巴细胞产生的多种抗体，可以说是多克隆抗体。特征：产量低，纯度低，特异性低，反应不够灵敏。抗原不纯，抗体不纯，19，每个b淋巴细胞只分泌一种化学性质，特定的强抗体。利用一个b淋巴细胞进行无性生殖(克隆)，这种细胞群可以产生化学性质单一、特定抗体的单克隆抗体。问题：如何获得化学性质单一、特定的抗体？20，在培养条件下，一个b淋巴细胞能否无限增殖，形成细胞群？哪些细胞能在体外无限增殖？肿瘤细胞！1984年获得诺贝尔生理医学奖的milstein 21，corer，b淋巴细胞和体外可增殖的骨髓瘤细胞融合后产生的融合细胞可以增殖，并能产生足够的特定抗体。22，如何诱导融合？添加聚乙二醇(peg)，如何获得b淋巴细胞？3 .单克隆抗体制造过程，23，细胞2融合后是什么样的？如何筛选b-b-肿瘤(异种杂交瘤细胞)肿瘤-肿瘤，杂交瘤细胞？在单克隆抗体制造过程中，共进行两种筛选检查，第一次筛选杂交瘤细胞，第二次筛选产生特定抗体的杂交瘤细胞，两种筛选的原理和方法不相同。首先用选择培养基筛选杂交细胞，在细胞合成DNA中有d和s两种途径，其中d途径可以被氨基嘌呤阻断。人类淋巴细胞有这两种DNA的合成途径，但一般不会分裂增殖。大鼠骨髓瘤细胞只有d通路，没有s通路，但可以继续分裂增殖。你考虑过筛选异种杂交瘤细胞的方案吗？消泡剂：25，在培养液中加入甲氨蝶呤，收集增殖细胞！添加氨茶碱后，阻断d合成途径，只有d合成途径中的骨髓瘤细胞和相互融合的细胞不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的杂交细胞可以利用淋巴细胞的s途径合成DNA，因此会增殖。26，27，一般采用限制性稀释克隆细胞方法多次稀释杂交瘤细胞，在多孔细胞培养板培养液中培养，每个孔细胞1个以下，这些单细胞克隆生长，并检测出可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔的每个孔上清液分泌细胞的抗体。最终选择并培养分泌预定特异性抗体的交配细胞株。筛选能分泌所需抗体的杂交绵羊细胞，28，阳性孔，方法抗原抗体杂交法，在单克隆抗体制造过程中两种筛选的原理和方法不同。29，如何获得很多单克隆抗体？体内培养体外培养，单克隆抗体化学性质单，特异性，30，抗体抗原反应抗体的不纯度，动物细胞受抗原刺激，引起免疫反应的球蛋白。不是本人，但引起免疫反应的物质是抗原，抗原。抗原有多种不同的决定簇，作用于不同的b细胞，不同的b细胞，然后产生多种抗体，这是多克隆，所以不纯！1.单克隆抗体制造理念，31，如何获得纯抗体？不能单纯，还要多。怎么办？哪些细胞能无限繁殖？想法是：为了获得单个纯抗体，必须从一个b细胞出发。b细胞大量生成(克隆)，就能产生大量抗体。b细胞不能无限繁殖。怎么办？癌症！只有癌细胞。但是不能产生抗体。癌细胞可以无限繁殖，但不能产生抗体。b细胞能产生抗体，但不能增殖。是融合！融合两个细胞可以互相补充。32，2。技术事故的重点问题：是培养系统中的4个细胞。b细胞，肿瘤细胞，杂交细胞。我们还是拿不到McAb。我该怎么办？主审！筛选异种杂交瘤细胞。怎么体质？是另一个想法问题。，33，34，单克隆抗体，杂交细胞，杂交细胞，骨髓瘤细胞，特定杂交细胞，杂交细胞株，提取，免疫b淋巴细胞，动物细胞融合技术，动物细胞培养技术，单克隆抗体制备过程：特性：产生特异性抗体，可大规模增殖为了运送疾病和药物，使用同位素标记单抗剂，在特定组织中成像，制作生物导弹，将药物定向到癌细胞所在的地方，现场杀死癌细胞，疗效高，副作用小。单克隆抗体的优点：特异性强，敏感性强，可大量制造。36，37，38，38，治疗疾病和载药特异性，敏感性高的生物导弹单克隆抗体抗癌剂疗效高，毒性低的副作用，39，单抗，生物导弹，单抗，放射性同位素， 受体、核移植方法、动物克隆方法、克隆动物的遗传特性、应用迁移、植物细胞工程比较：植物组织培养技术和动物细胞培养技术、植物体细胞杂交技术以及动物细胞融合技术； 42，b是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _过程，通常是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _过程下图是一位同学根据杂交育种技术设计出用于破伤风杆菌生产的抗体实验程序，1。这个实验方案的目的是；A可以从老鼠的脾脏中获得_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。单克隆抗体，b细胞，特异性抗体，细胞融合，停用病毒，双亲细胞，特异性抗体分泌，无限增殖，43，单克隆抗体的制造，1，分泌特异性抗体的b淋巴细胞如何获得？2、在哪里可以得到更多的b淋巴细胞？怎样才能使b淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合？4、如何筛选杂交瘤细胞？5、筛选的杂交瘤细胞产生抗体吗？6、如何获得只产生特定抗体的杂交瘤细胞？7、如何获得大量单抗体？特定抗原，免疫小鼠的重复注射。小鼠脾脏，peg，停用病毒等，HAT选择培养基培养，筛选，否，用多孔细胞培养板培养，稀释度应保证每个孔中没有一个以上细胞。抗原抗体杂交体呈阳性反应，在体内或体外大量培养特定异种杂交细胞，提取单个抗体。44，单克隆抗体，杂交细胞，杂交细胞，骨髓瘤细胞，特定杂交细胞，杂交细胞株，提取，免疫b淋巴细胞，动物细胞融合技术，动物细胞培养技术，单克隆抗体制备过程：特征：特异性抗体生成和大规模繁殖，特征：图10显示了单克隆抗体制备过程步骤图。根据图片，请回答以下问题：图10(1)该技术是基于动物细胞培养技术和技术开发的。(2)图10中的细胞a在体外培养也没有分裂能力，但可以分泌，细胞b可以在体外培养。(3)动物细胞融合中常用的方法是。图10，(1)动物细胞融合(2)特定抗体分泌，无限增殖(3)peg(惰性病毒，电刺激)，46，(4)细胞融合是随机过程，在HAT培养基中培养，筛选细胞。在细胞培养过程中，为了促进细胞葡萄糖的摄取，经常向培养液中添加(激素)。(5)培养两周后，测量培养细胞的特性，将细胞放入其他孔(见图)进行培养。(。其目的是在这样做之前，将培养细胞稀释为7 10个细胞/ml，在每个孔中注入0.1ml细胞稀释剂。(6)要获得大量的单克隆抗体，可以培养获得的异种杂交瘤细胞。(4)杂交，胰岛素(5)抗x蛋白抗体的特定分泌，确保每个孔至少有一个细胞以上，实现单克隆培养的目的(为了确保抗体的纯度，单细胞培养)，(6)体外或体内，47，a，实施细胞工程a时需要的受体细胞大部分利用动物卵细胞，原因如下。多莉脸的毛色，判断的依据是：继植物组织培养后，克隆羊栽培成功，证明也有动物细胞。请举例说明培育克隆羊的实际重要性：2 .图中显示了世界上第一个克隆羊“多莉”培育等程序。仔细看照片回答：核移植、胚胎移植、卵细胞大小大，操作方便，卵细胞中有开始表达核基因的物质。白色，多莉的核基因都来自白面棉绵羊。全能，保存濒危物种，繁殖优良品种，医学上复制器官，48，3。科学家将小鼠骨髓癌细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，产生很多单克隆抗体，与骨髓癌细胞融合的是A .经免疫的b淋巴细胞b .经免疫的t淋巴细胞c .经免疫的t淋巴细胞d .未经免疫的b淋巴细胞A，4 .科学家们将雌性黑老鼠乳腺细胞的核转移到老鼠清除核的卵细胞中，发育成早期胚胎，然后移植到棕色老鼠的子宫中。这只棕色老鼠的体色和性别分别是a .黑、女性b .棕色、女性c .白、男性d .黑、男性、a、49、5。将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合后，根据A.B淋巴细胞能产生抗体的基础，融合细胞能产生单克隆抗体，但B.B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后，抗体C .骨髓瘤细胞才能无限增殖，抗体d .骨髓瘤细胞不能增殖，但不能增殖(多选)，AC，50，C，C单克隆抗体是a，单个骨髓瘤细胞增殖引起的抗体b，单个b淋巴细胞增殖引起的抗体c，单个杂交细胞增殖引起的抗体d，单个抗体通过克隆产生很多抗体，5。以下哪一项属于复制？a .将鸡的一个DNA片段整合到老鼠的DNA分子中。b .抗药菌的一个基因与引起草绿虫的细胞内c .老鼠骨髓瘤细胞与免疫脾细胞融合，合并为异种杂交瘤细胞，D .肿瘤细胞体外培养，形成一个细胞株D，51，6。一个数量的卵细胞核被另一个数量的体细胞核取代后，这个卵细胞经过多次分裂，移植到第三个数量的子宫内，发育结果产生下一个羔羊。这种克隆技术有多种用途，但不能有选择地繁殖任何性别的家畜。繁殖家畜的优秀个体c .用于保存物种D .改变动物的基因型D，52，7。在动物细胞融合和植物细胞杂交的比较中，准确地说()a .结果是相同的b .杂交细胞的形成过程基本相同。c .在工作过程中酶的作用相同。b，53，8。已知细胞合成DNA有d和s两种途径。其中，d途径可以被氨基嘌呤阻断。人的淋巴细胞合成了这两种DNA，但一般的DNA不会分裂增殖。老鼠的骨髓瘤细胞即使没有s途径，也可以继续分裂增殖，在试管中混合这两个细胞，并加入聚乙二醇，得到融化的杂交细胞。请回答：试管中除了融合的杂交细胞外，还有融合的细胞，2，54，不管机械方法如何，在培养液中分离杂交细胞，称为原理。在培养液中添加氨基嘌呤，收集增殖的细胞。添加氨茶碱后，阻断d合成途径，只有d合成途径中的骨髓瘤细胞和相互融合的细胞不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的杂交细胞可以利用淋