植物呼吸速率的测定.ppt

实验4-1微体积压力计测定植物的呼吸率1，原则：1。气体从密闭、恒温和固定量的系统中吸收后，气体分子减少，压力减少。相反，气体产生时压力增加。压力的变化可以用微量测量仪测量，从而计算气体吸收或释放的量。因此，微压探测器可用于研究与呼吸作用、光合作用和O2、CO2及其他气体交换相关的特定酶的活性等反应。一、原则：2。在呼吸过程中，吸收氧气和产生二氧化碳是同时进行的，因此压力计观察到的压力变化是氧气吸收量和二氧化碳释放量的总和。如果将碱液(如氢氧化钾)添加到反应瓶中，呼吸过程中产生的二氧化碳被碱吸收，那么氧气的吸收量可以通过压力的变化来计算。二、材料、设备和试剂(a)材料：发芽小麦种子。(b)设备设备：1。巴布格呼吸计(微型呼吸压力计)；2.吸管；测量汽缸；小镊子；橡皮筋；吸水纸，(c)试剂：1.20% KOH；凡士林；布罗迪溶液：NaCl23g，酒精酸钠5g，溶于500毫升水，添加一些染料(酸性品红)对溶液进行染色，将浓缩麝香酚乙醇溶液用作防腐剂。3，实验阶段(a)种子吸氧量测定(压力计)1。种子处理：发芽小麦种子6-8粒的提取，用吸水纸干燥种子表面水分，其新鲜重量(w)。用排水法测定体积(v种子):取10毫升的两桶，盛约5毫升的水，将种子充分放入两桶，第二次水分量的差异是种子体积。去除种子，再用吸墨纸吸干附着在种子外观上的水分。将种子放在反应瓶底部，将0.5毫升的水放在反应瓶底部。2 .反应瓶和压力表处理：在中央槽中添加20% KOH 0.2ml以吸收CO2。为了提高CO2吸收力，将1cm2cm滤纸折叠后放在中央的小槽里，在中央的小槽里涂一些凡士林，这样可以防止碱液排出。侧管玻璃棒涂有凡士林，固定牢固。在压力计入口也涂上凡士林和反应瓶连接，转动反应瓶使密封的凡士林透明，然后用橡皮筋将反应瓶固定在压力计上。3 .压力表考虑反应瓶和水槽之间的温度平衡：将压力表固定在水槽上，打开压力表活塞。设定温控器水槽温度，启动水槽搅拌机，启动转盘振动，使压力表平衡10-15分钟左右。在这个过程中，要注意检查反应瓶是否泄漏。4 .测量和读取：反应瓶内温度与水槽温度平衡时，停止振动，关闭压力表的活塞，然后重新启动振动，记录开始时间。以15分钟为间隔记录压力计左侧的毛细管布罗迪水平高度(h)。读数时暂停振动，将压力计右侧管道标高调整为150mm，将左侧管道标高高度记录为总共4次(共1h)。(b)毛坯实验和压力表压力值修正压力表左侧喷嘴与大气连接，实验时室内气压或水槽温度的微小变化影响读数，应进行修正。校正方法：除反应瓶没有种子的情况外，其他处理、测量和读数与压力表完全相同(即温度压力表用空实验)。压力表读数和温度压力表读数之间的差异，得出压力表的实际压力值(修正值)。4，计算结果(2)呼吸率计算： (样品消耗氧气)呼吸率( l/GH)=hk/wt。其中hK是根据实际压力差(h，mm)的吸氧量( l)。w是新鲜样品质量(g)；t表示响应时间(h) 5，分析讨论，主要考虑因素：1。操作过程中不要对种子造成物理或化学损伤；压力计是精密玻璃设备，必须防止损坏。压力计和反应瓶号必须匹配。压力计和反应瓶必须保证机密性良好。5.压力表读数时，不能暂停振动，打开活塞或从水槽中取出压力表。讨论的问题：1。在这个实验中，为什么要设计恒温器？反应瓶常数k与哪些因素相关？这个实验如何满足条件？实验4-2小篮子法(光球病法)测量植物呼吸速度，第一，原理植物呼吸时释放CO2，特定量的植物样品在单位时间内释放CO2量，可以用作该样品的呼吸速度。植物呼吸过程中释放的CO2被氢氧化钡溶液吸收，呼吸过程结束后，剩下的碱液可以用已知浓度的草酸溶液滴定，从空格和样品中消耗草酸溶液，从而计算呼吸过程中释放的二氧化碳量。二、材料、设备和试剂(a)材料：发芽小麦种子。(b)设备：1。呼吸测量装置；2.秤；秤。3.手表；手表。酸碱滴定管；5.温度计(3)试剂：1)约0.05毫升/L的ba (oh) 2: ba (oh) 28.6g溶于1000毫升蒸馏水；2) 1/44 mol/l草酸溶液：准确地称为再结晶的H2C2O42H2O2.8651g溶于蒸馏水，常数为1000ml(相当于每ml 1mg CO2)。(3)酚酞指示剂：1g酚酞溶于100ml95%乙醇，储存在滴瓶中。3，实验阶段1。1个500毫升的光球瓶，3个瓶盖用的橡胶塞紧，插入装有碱性石灰的干燥管，将温度计插入一个孔，使其在呼吸中进入没有CO2的空气，在另一个孔中插入直径约1厘米，适当的使用，通常用小的橡胶塞拧紧，在瓶盖下挂一个铁丝小篮子，装入植物样品，整个装置是光球瓶呼吸测量装置。3，实验阶段2。将0.05毫升/L的Ba(OH)2溶液放入20毫升，立即拧紧橡胶塞(没有小篮子)，拔下小橡胶塞(使瓶子中的CO2全部吸收)，加入2滴酚酞指示剂后摇晃，将液滴管放进洞里，用标准草酸溶液冲下去，直到红水刚刚消失记录滴定中使用的草酸量(V0，ml)，3，实验阶段3。将废液倒入瓶子，用没有CO2的蒸馏水(煮沸)冲洗，然后再次添加上述Ba(OH)2溶液20毫升。取5g左右的发芽小麦种子(据说要晒干种子表面的水分)，放在小篮子里，挂在橡胶塞下，拧紧软木，开始录像，然后在20 30分钟内轻轻摇晃多次(破坏溶液表面的BaCO3薄膜有助于吸收CO2)。到了预约时间，打开塞子，迅速拿出包含植物材料的小篮子，在瓶子里放入2滴酚酞指示剂，立即密封塞子，摇晃以草酸滴定的方法与前面相同。记录滴定中使用的草酸的数量(大，ml)。第四，结果是样品的呼吸率(mg CO2/GH)=(V0-vs) 1/(wt)式，V0:空白滴定中使用的草酸量(ml)；Vs:用于样品滴定的草酸(ml)；w:样品的新鲜重量(g)；t:测量时间(h)。1表示滴定中使用的每毫升1/44 mol/l的草