分光光度计测定微量铁

分光光度法测定痕量铁一、目的1、学习如何选择吸入强度分析的实验条件。2、用分光光度计掌握铁的原理和方法。3、掌握分光光度计的使用方法。二、原则1、分光光度计的条件：物质含量测定时要注意的条件主要是显色反应的条件和吸光度测定的条件。发色剂的使用条件、介质的酸度、发色时温度、发色时间、干涉物质的去除方法等。测量吸光度的条件包括入射光波长的选择、吸光度范围和基准溶液等。2，二氮-第一铁配合物：o-二亚胺菲是测定微量铁的更好试剂。在Ph=2 9的条件下，Fe2离子与1.1104的lgK稳定=21.3、摩尔吸光系数510=1.1104的相邻二氧化硅一起生成稳定的橙色复合物染色前先用盐酸羟胺将Fe3+离子还原为Fe2+离子，其反应如下。2fe 3 2n H2O HCl2fe 2 N2 2h2o 4h 2cl-测量，溶液的酸度更适合约pH=5。酸度太高，反应慢。酸度太低，Fe2离子水解，影响比色。Bi3、Cd2、Hg2、Ag、Zn2等离子体和显色剂生成沉淀，Ca2、Cu2、Ni2等离子体和显色剂形成着色复合。因此，离子共存时要注意干涉。三、试剂10 g/mL的铁标准溶液；盐酸羟胺固体和10%溶液(由于不稳定，需要临时使用)；0.1%相邻的氮杂菲(新准备)；1mol/LNaAc溶液。四、标准铁的制备取0.7022g硫酸亚铁铵Fe (NH4) 2 (SO4) 26h2o，放入烧杯中，加入6mol/L HCL 20ml和少量水溶解溶出1L溶出后，在70ml硫酸溶液中加入0.02mol/L的高锰酸钾溶液不会变成微红这种储备溶液1.00毫升含有0.100毫克铁。五、指示剂选择原则指示剂也是酸碱性的。指示剂一般是有机物。酸碱浓度太高会破坏指示剂(小数)，浓度太高会使你每滴大量酸碱浓度不能滴落合适的滴。总是要滴大部分，浓度越高，越多取决于想要的PH值，其值是选择的指示剂的突然范围。这样溶液才能通过颜色的变化来判断终点六、阶段1、绘制吸收曲线在50mL容量瓶中正确移动10 g/mL铁标准溶液5mL，加入10%羟胺1mL盐酸盐，摇晃，微冷，加入1mol/L NaAc溶液5mL和0.1% o-dia MIP 3mL，用水稀释，以刻度，在分光光度计上1cm非碟状然后，以波长作为横坐标，以吸光度作为纵坐标绘制吸收曲线，以确定吸收曲线上相应测量的适当波长。2、铁含量的测定*(1)绘制标准曲线：取6个50毫升容量瓶(或有色管)，分别将2毫升、4毫升、6毫升、8毫升、铁标准溶液放入5个容量瓶，其他容量瓶不放铁标准溶液(对照标准)。然后分别加入1mL10%羟胺盐酸盐，2分钟后加入5ml 1mol/LNaAc溶液和3ml 0.1%相邻二苯，通过吸水稀释到水垢中摇晃。各溶液的吸光度是在分光光度计上用1厘米比较盘在最大吸收波长(510nm)下测量的。以铁含量为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。(2)在未知液体中测定铁含量：各吸收10毫升未知液体两次，而不是标准溶液，其他步骤与测量吸光度相同。通过未知液体的吸光度检测标准曲线上未知10mL液体的铁含量，然后使用每未知mL铁的微克显示结果。3、绘制吸收曲线(a)分析每个测量结果并得出结论；例如，可以从吸收曲线中计算出来。相邻双焦apaid铁配合物的波长为510nm，具有最大的吸光度，因此测量时可用的波长为510nm。1、绘制吸收曲线波长nm吸光度a570550530520510500490470450430(2)绘制标准曲线和测定铁含量测试流体编号标准溶液的量V/mL总铁含量m(g)吸光度a123456未知液体02.04.06.08.010.0020406080100七、未知铁含量的测定测量的每种标准液体的吸光度，绘制标准曲线；另外，以未知铁液的吸光度为标准，在标准曲线中寻找相应的铁量，在未知溶液中寻找铁的含量。八、使用分光光度计分光光度计的理论基础是朗伯-比尔定律。单色光束通过一定浓度的稀有颜色溶液时，溶液的选择性吸收度a与溶液的浓度或液层成正比。也就是说，A=kcL=log(I0/I)，表达式中的：A是吸光度，表示光线通过溶液时吸收的强度。着色溶液的浓度。I0是入射光强度。I是透射光强度。l是液体层的厚度。k吸收系数，与入射光的波长和溶液的特性、温度等相关，如右侧1所示。图1光线通过溶液IlI0图2分光光度计工作图l入射光强度I0、吸光系数k和溶液厚度l保持不变的话，透射光强度I仅根据溶液中的物质量c发生变化。因此，通过溶液的光通过测光装置的光电转换接收器转换为电能时，通过从微米中读取相应的透光率来估计溶液浓度，工作原理如图2所示。分光光度计的工作原理八、注意事项1.气球预热后，测量开始前重复透射比0%和透射比100%。2、连续使用仪器不得超过2h。否则，最好在间歇0.5h后使用。3、洗碟子必须干净，只能用手捏住碟子的两面，盛试验用液体时，应冲洗2-3次，将测定用溶液倒入2/3-3/4，此时毛笔的溶液不太满，通过光路时要透光。