葡萄酒中还原糖和总糖的测定

葡萄酒中还原糖和总糖的测定一、 实验目的掌握还原糖和总糖的测定的基本原理，学习费林试剂法测定还原糖和总糖的操作方法。二、 实验原理还原糖和总糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，其中乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来，对没有还原性的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量（还原糖以葡萄糖含量计）。利用费林溶液与还原糖共沸，生成氧化亚铜沉淀的反应，以次甲基蓝为指示液，以样品或经水解后的样品滴定煮沸的费林溶液， 达到终点时， 稍微过量的还原糖将蓝色的次甲基蓝还原为无色，以示终点。根据样品消耗量求得总糖或还原糖的含量。 三、 试剂和材料3.1 盐酸溶液（11）。 3.2 氢氧化钠溶液：200 gL。 3.3 标准葡萄糖溶液 2.5 gL：精确称取 2.5g（称准至 0.0001g）在 105110烘箱内烘干3h并在干燥器中冷却的葡萄糖，用水溶解并定容至1000 mL。 3.4 次甲基蓝指示液 10gL：称取1.0g次甲基蓝，溶解于水中，稀释至 100mL。 3.5 费林溶液 费林溶液：称取34.7g 硫酸铜(CuSO4*5H2O)，溶于水，稀释至500mL。费林溶液：称取173g酒石酸钾钠和50g NaOH，溶于水，稀释至500mL。使用时将溶液、按等体积混合。四、 实验步骤4.1费林溶液标定预备试验：吸取费林溶液、 各 5.00 mL 于 250 mL 三角瓶中，加 50 mL 水，摇匀，在电炉上加热至沸，在沸腾状态下用制备好的葡萄糖标准溶液滴定，当溶液的蓝色将消失呈红色时，加 2滴次甲基蓝指示液，继续滴至蓝色消失，记录消耗的葡萄糖标准溶液的体积。4.2费林溶液标定正式试验：吸取费林溶液、各 5.00 mL于 250 mL三角瓶中，加 50 mL水和比预备试验少1mL的葡萄糖标准溶液，加热至沸，并保持2 min，加2滴次甲基蓝指示液，在沸腾状态下于1 min内用葡萄糖标准溶液滴至终点，记录消耗的葡萄糖标准溶液的总体积。 4.3计算 F= m / 1000V式中： F费林溶液、各5 mL相当于葡萄糖的克数，g； m称取葡萄糖的质量，g； V消耗葡萄糖标准溶液的总体积，mL。 4.4试样的制备 4.4.1 测总糖用试样：准确吸取一定量的样品（V1）于 100mL容量瓶中，使之所含总糖量为 0.20.4 g，加5 mL盐酸溶液（11）.加水至 20 mL，摇匀。于 681水浴上水解 15 min，取出，冷却。用 200 gL 氢氧化钠溶液中和至中性，调温至 20，加水定容至刻度（V2）。 4.4.2 测还原糖用试样：准确吸取一定量的样品（V1）于 100 mL容量瓶中，使之所含还原糖量为 0.20.4g，加水定容至刻度。4.5 酒样还原糖和总糖的测定以试样代替葡萄糖标准溶液，按 3.5b同样操作，记录消耗试样的体积（V3），结果按式（4）计算。 测定干葡萄酒或含糖量较低的半干葡萄酒，先吸取一定量样品（V3），于预先装有费林溶液、各 5.00 mL 的 250 mL 三角瓶中，再用葡萄糖标准溶液3.5b 滴定至终点。记录消耗葡萄糖标准溶液的体积（V），结果按式（5）计算。 五、 实验结果分析结果计算 ：（V1/V2）V3X=1000 F（V1/V2）V3X=1000 FGV式中：X总糖或还原糖的含量，gL； F费林溶液、各 5 mL相当于葡萄糖的克数，g； V1吸取的样品体积，mL； V2样品稀释后或水解定容的体积，mL； V3消耗试样的体积，mL； G葡萄糖标准