玫瑰组织培养及再生技术研究进展.ppt

玫瑰组织培养及再生方法研究进展,玫瑰简介,玫瑰属蔷薇科蔷薇属植物，具有治病、美容、保健、观赏等多种用途。常规以扦插或嫁接繁殖，繁殖系数低且病毒感染严重，产量和品质的提高受到很大限制，难以满足规模化生产的需要。利用组织培养技术可以实现玫瑰优良品种的快速繁殖，提高品质.加速品种的更新换代，促进玫瑰产业的发展。,供试材料：从生长在较好环境中的优良品种植株上，选取长势较好、无病虫害的当年生枝条的茎尖和幼茎。玫瑰除用茎尖和幼茎做外植体外，也可以用叶片、叶柄、根、茎、原生质体、胚、花药、子房、花萼和花托做外植体3。,材料选取,培养基是外植体生长发育的能源和营养基质1，分为：芽体分化培养基，增殖培养基，生根培养基,培养基的筛选及培养条件,MS培养基特点:1,无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，它的硝酸盐含量高，2,其养分的数量和比例合适，能满足植物细胞的营养和生理需要因而适用范围比较广，多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。,IAA:吲哚-3-乙酸生长素6-BA/BA:6-苄氨基嘌呤细胞分裂素NAA：a-萘乙酸，植物生长的调节激素IBA:吲哚丁酸，生长素类似物,芽体分化培养基(共设4个处理):,(1)MS+6-BA0mg/L+NAA0mg/L+3%白糖+0.4%琼脂;(2)MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+3%白糖+0.4%琼脂;(3)MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L+3%白糖+0.4%琼脂;(4)MS+6-BA1mg/L+2.4-D0.1mg/L+3%白糖+0.4%琼脂.,增殖培养基(共设4个处理):,(5)MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.01mg/L+3%白糖+0.4%琼脂;(6)MS+6-BA1mg/L+NAA0.01mg/L+3%白糖+0.4%琼脂;(7)MS+6-BA2mg/L+NAA0.01mg/L+3%白糖+0.4%琼脂;(8)MS+6-BA3mg/L+NAA0.01mg/L+3%白糖+0.4%琼脂.,诱根培养基:,(9)MS+IBA0.5mg/L+0.3%活性炭+3%白糖+0.4%琼脂.,材料的选取：剪取生长健壮的玫瑰茎尖或带芽的幼嫩茎段。材料处理：将外植体切成单节茎段，带有饱满，未萌发的侧芽，每段长1cm1.5cm。将其至于烧杯中，用饱和洗衣粉溶液漂洗10min，然后置于流水下冲洗30min，以除去污物。,玫瑰组织培养的方法,材料的消毒：用自来水冲洗干净,在超净工作台上快速用75%酒精浸过,然后用无菌水冲洗干净,再用0.11%的升汞加吐温灭菌,最后用无菌水冲洗干净.芽体分化：将处理好的玫瑰茎尖分别接种于芽体分化培养基(1)(2)(3)(4)观察记录结果.继代增殖：将诱导出的芽体分别转接到继代增殖培养基(5)(6)(7)(8)中观察记录结果.根的诱导及试管苗移栽：将生长健壮的无根苗接种于诱根培养基中,经生根培养后炼苗移栽.,一，升汞处理时间的长短对玫瑰茎尖的成活及灭菌效果的影响处理时间过长(8min)易使外植褐化甚至死亡。过短(3min)影响灭菌效果且污染率高,实际实验中以升汞处理5min效果最好,灭菌成活率达80%。,玫瑰组织培养的影响因素,二，激素浓度的不同及种类对诱芽的影响：,表16-BA浓度的不同及激素种类对诱芽的影响,从表1看出(3)号培养基芽体分化率最高,BA与NAA组合有利于体分化。,三，激素浓度的不同对增殖效果的影响,表2：不同激素浓度对增殖效果的影响5,从表2看,细胞分裂素能促进细胞的分裂和分化,诱导胚状体和不定芽的形成,适宜浓度的细胞分裂素有利于芽的快速增殖8-10,(7)号培养基为最佳继代增殖培养基。,四，试管苗整个过程培养条件,温度(282),空气相对湿度70%85%左右,每天光照1012h,光照强度1500lx,pH5.86.0,诱根：无根苗接种于生根培养基,7d左右开始发生不定根,20d左右即可发生5mm左右长的健壮根系移栽：一般玫瑰微繁殖炼苗需经过室内三天的取盖炼苗，然后将苗从瓶中取出，清洗去根部培养基，定植在珍珠岩、泥炭、蛭石或沙土中，用35%的多菌灵喷洗。,诱根与试管苗的移栽,玫瑰的扦插玫瑰的嫁接,玫瑰再生方法研究进展,嫁接,插床的选择：插床应选土层深厚、结构疏松、通透性能佳、富含腐殖质、排水良好的地块。插穗的选择和处理：插穗选健壮、充实、芽眼饱满、无病虫害的12年生春梢或当年生秋梢。插枝削好后，要蘸生根素、萘乙酸、吲哚丁酸、ABT。,玫瑰的扦插,扦插:尽可能做到随剪枝、随处理、随扦插。扦插时千万不要伤及皮部，在整好的插床上，将插穗插入基质内，然后压实，浇1次透水，使插穗与土壤紧密结合。搭小拱棚保温保湿。扦插时插穗插入砂土1/32/5，插稳就行。扦插深度不能插过深，插深了浇水不适当，湿度没有掌握好，很容易造成插枝基部腐烂坏死。扦插密度应以插枝之间相互不挤压、叶片能自然伸展，俯视能看到插枝的基部为好。,插后管理:玫瑰生根的最佳温度为1828，首先要根据扦插的时期，选择覆盖不同透光率的遮阳网。1015天后可让扦插苗逐渐接受阳光。其次是浇水。扦插后最佳的水分条件是苗床的田间持水量保持在60%80%，空气相对湿度为65%85%。可通过喷水来调节湿度，但要注意少喷、勤喷，要保持叶面湿度，而不增加基质湿度。,选择砧木及接芽：玫瑰的砧木以近代月季和红十姊妹两个品种为好，嫁接后易成活，生长快，产花量高。砧木的标准，两年生，发育健壮，无病虫害，直径在0.5厘米以上。接芽应选用当年萌发的玫瑰枝条上部的饱满腋芽。嫁接时间：嫁接玫瑰可在3月中旬、7月上中旬或9月中下旬进行，以夏季嫁接最好，此时气温高，分生细胞活动强烈，愈合快，成活率高。,玫瑰的嫁接,嫁接方法：玫瑰嫁接以芽接方式为好。接后管理：一般在夏季嫁接后10或15天可拆除绑扎物。气温较低时，愈合速度慢，时间应适当延长。拆绑后要及时抹除砧木上的萌生芽，当接芽长高到15厘米以上时即行剪砧。嫁接幼苗的圃地，要及时进行松土除草和防治病虫为害。,参考文献：1程广有。名优花卉组织培养技术M。科学技术文献出版社。2001，1，4982郭志刚、张伟。玫瑰M。清华大学出版社。1998，4，13李美茹、李洪清、孙梓健、陈贻竹。月季的组织培养和基因转化研究进展J。广西植物。2003，2（3），25284王清连。植物组织培养M。北京：中国农业出版社，20025邓燕红、余春香。玫瑰组织培养研究。凯里学院学报。200，26（6），1056赵一鹏、赵兰枝、周岩、刘弘。玫瑰的组织培养技术J。园林花卉。2002，（1），35367裘文达、潘晓东、杨鸿勋。月季生产技术M。中国农业出版社。2001，1501518王清