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复习:控制微生物生长的方法是什么?实验目的了解实验原理实验器材实验方法的注意事项、技能训练8高压蒸汽灭菌、高压蒸汽灭菌的基本原理和应用范围。 熟练掌握高压蒸汽灭菌的操作方法。 另一方面,作为实验的目的,高压蒸汽灭菌是将灭菌后的物质放入密闭的加热灭菌锅,通过加热使灭菌锅的套管间的水沸腾而产生蒸汽。 水蒸气急剧地将锅内的冷气从排气阀排出,关闭排气阀继续加热,由于蒸气不会溢出,灭菌器内的压力增加,沸点升高,得到100以上的温度,菌体蛋白质凝固变性,达到灭菌的目的。 使用高压蒸汽灭菌锅灭菌时,灭菌锅内的冷气的排除是否极为重要是因为空气的膨胀压力大于水蒸汽的膨胀压力,所以水蒸汽中含有空气时,在相同压力下含有空气的蒸汽温度低于饱和蒸汽的温度。 二、实验原理、灭菌锅内残留不同剂量的空气时,压力与温度的关系如、牛肉糊浆培养基培养皿、试管、三角瓶、移液管便携式高压蒸汽灭菌锅等三、实验器材、1 .加水:取出内层锅,在外层锅内加入适量的水使水面和三角架平整四、实验方法,二.装锅:放回内层锅,放入灭菌物品。 3 .盖上盖子,将盖上盖子的排气软管插入内层锅的排气槽。 此外,以两种对称的方式同时拧紧相对的两个螺栓,以确保螺栓没有漏气。 4 .加热、排气打开空气阀门,同时接通电源加热,锅内的水沸腾,大量水蒸气从空气阀门排出,维持3-5min,排除锅内的冷气。 冷空气完全排出后,关闭排气阀,随着蒸汽压力的增加,锅内的温度逐渐上升。 5 .保温保压锅内的压力上升到必要的压力时,控制热源,将压力维持到必要的时间。 6 .出锅灭菌所需时间到来后,切断电源,自然降低灭菌锅内的温度,压力计下降到“0”时,打开气阀,松开螺栓,打开盖子,取出灭菌品。 7 .保养灭菌结束后,倒入锅内多馀的水,使内壁和内胆干燥,盖上盖子。 8 .无菌检查取出的灭菌培养基在37的烤箱中培养24小时,经过检查,没有杂菌的生长就可以待机。 1 .请不要忘了水。 同时,不要加水过多。 请不要让灭菌锅干燥而引起爆炸事故。 2 .压力必须下降到“0”,然后打开排气阀,打开取出物。 否则,锅内的压力急剧下降,容器内的培养基因内外压力的不平衡而从瓶口和试验管口飞出,棉塞被培养基污染,会烫伤作业人员。 注意事项1 .高压蒸汽灭菌开始前,为什么要排出锅内的冷气? 灭菌结束后,为什么不能打开排气阀直到压力下降到“0”,打开取出物
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