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文档简介
.,1,完成实验,酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的?,提出问题,作出假设,设计实验,分析结果,得出结论,变量如何控制?,探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化,该探究活动中涉及4个科学方法:(1)数学模型法;(2)抽样检测法;(3)显微观察法;(4)微生物培养法。,.,2,酵母菌的计数(1)计数工具血球计数板,实物图,正面图,侧面图,计数室,滴液处,.,3,酵母菌的计数(1)计数工具血球计数板,放大后的计数池,每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。每个计数池分为9个大方格,其中中央的即为计数室,每个计数室的体积为0.1mm3。,.,4,16个小格,25个小格,25X16=400小格,16X25=400小格,每个计数室(大方格)共有400小格,总容积为0.1mm3,抽样检测:516=80个小格,抽样检测:425=100个小格,.,5,酵母菌的计数(2)计算:每毫升培养液中的酵母菌细胞数是多少?,.,6,例1:酵母菌的计数通常用血球计数板进行,血球计数板每个大方格容积为0.1mm3,由400个小方格组成。现对某一样液进行检测,如果一个小方格内酵母菌过多,难以计数,应先后再计数。若多次重复计数后,算得每个小方格中平均有5个酵母菌,则10mL该培养液中酵母菌总数有个。,例2:在用血球计数板(2mm2mm方格)对某一稀释50倍样品进行计数时,发现在一个计数室内(盖玻片下的培养液厚度为0.1mm)酵母菌平均数为16,据此估算10mL培养液中有酵母菌个。,2x107,2108,稀释,.,7,例3检测员将1mL水样稀释10倍后,用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量;将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由2516400个小格组成,容纳液体的总体积为01mm3。现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e5个中格80个小格内共有蓝藻n个,则上述水样中约有蓝藻个mL。,5n105,.,8,酵母菌的计数(3)计数的操作稀释:将酵母菌培养液进行适当的稀释;若菌液不浓,可不必稀释。镜检计数室:在加样前,先对计数板的计数室进行镜检,若有污物,则需清洗后才能进行计数。加样品:在清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片,再用无菌细口滴管将稀释的酵母菌液由盖玻片边缘滴入一小滴(将计数室充满即可),让菌液沿缝隙自行渗入计数室。注意不可有气泡产生。,.,9,酵母菌的计数(3)计数的操作显微计数:静止5分钟后,先用低倍镜(1610)找到计数室所在的位置。然后根据血球计数板规格,每个计数室选取5个(或4个)中方格中的菌体进行计数。每个小方格内约有5-10个菌体为宜。对于压在小方格界线上的酵母菌应取相邻两边及顶角计数。如要从两个计数室中计得的值来计算样品的含菌量。,.,10,酵母菌的计数(4)血球计数板的清洗:使用完毕后,将血球计数板在水龙头上用水柱冲洗,切勿用硬刷洗刷,洗完后自行晾干或用吹风机吹干。镜检,观察每个小格内是否有残留菌体或其他沉淀物。若不干净,则必须重复洗涤至干净为止。,.,11,酵母菌的计数(5)注意事项:进行计数前,应先将试管摇匀,目的是使酵母菌在培养液中混合均匀,以减少计数误差。显微镜计数时,对于压在小方格界线上的酵母菌,应取相邻两边及顶角计数。若一个小方格内酵母菌数量过多,难以数清时,则可将培养液稀释一定倍数后再计数。本实验无对照实验,酵母菌每天的数量变化可形成前后对照。血球计数板使用后,切勿用硬物洗刷,可采用浸泡和冲洗的方法清洗。,探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化,.,12,酵母菌的计数(6)讨论:计数前还应有哪些步骤?需注意些什么?,探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化,酵母菌培养:培养液配制灭菌接种培养,配制质量分数为5的葡萄糖溶液(葡萄糖20g,1000mL水),分装到5个烧杯中(200mL/烧杯),用高压蒸汽灭菌锅将培养液和取样、计数时所用的滴管分别灭菌。贴标签。,接种时要在酒精灯附近,用灭菌干净的1mL刻度吸管每次吸取0.1mL酵母菌母液,往每个烧杯中加入。(注意:滴加量不要太多,避免初始菌数过多。),将烧杯置于28的恒温箱中培养,无菌操作,.,13,结果分析(1)数据记录以汤麦式血球计数板的数据记录为例。下表为某一次的数据记录表,其中,A表示五个中方格的总菌数;B表示菌液稀释倍数:,探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化,.,14,结果分析(1)数据记录下表为一周的数据记录表:,探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化,.,15,
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