生物制药工艺学习题汇总

第三章填空题1. 反应溶剂直接影响化学反应的 反应速度 、反应方向 、反应深度 、产品构型 等。 2. 水、乙醇、乙酸、乙二胺等属于 质子溶剂，乙醚、二氯甲烷、丙酮、吡啶等属于非质子溶剂，甲苯、正己烷、环己烷等属于 惰性 溶剂。 选择题1. 可逆反应属于（ A ） A. 复杂反应 B. 平行反应 C. 基元反应 D. 简单反应 3. 在溶剂的作用描述中，不正确的是（ B ） A.使反应分子能够分布均匀、增加分子间碰撞和接触的机会、有利于传热和散热。 B.溶剂必须是易挥发的 C.溶剂必须是惰性的，不能与反应物或生成物反应 D.溶剂直接影响化学反应的反应速度、反应方向、反应深度、产品构型等 简答题单分子反应，双分子反应，一级反应，二级反应之间的关系？ 答：在某基元反应过程中若只有一分子参与反应则称为单分子反应。多数的一级反应为单分子反应。当相同或不同的两分子碰撞时相互作用而产生的反应称为双子反应，即为二级反应。化学合成药物工艺研究的主要内容是什么？ 答：化学合成药物工艺研究的主要内容有7个：配料比、溶剂、温度和压力、催化剂、反应时间及其监控、后处理、产品的纯化和检验。第四章1.简述天然提取法制备手性药物的一般步骤？ 答：酶法分析 酶催化的还原反应 酶催化的氧化反映 酶催化的不对称合成反应 酶催化的转氨基化作用2.什么是手性药物，其构型与活性的特点是什么？ 答：具有药理活性的手性化合物就是手性药物。 两个对映体具有相同的药理作用。 两个对映体中的一个有药理活性，另一个则无明显作用。 两个对映体的药理作用不同，上市后用于不同的适应症。 在消旋体中增加一种对映体的比例可调整临床疗效。 两个对映体中的一个有治疗价值，另一个则有不良作用。第五章 选择题1、氯霉素抗菌谱广，而最主要的不良反应是（D）A、二重感染B、胃肠道反应C、对肝脏严重损害D、对造血系统的毒性 E、影响骨、牙生长2、与氯霉素特点不符的是(A)A、口服难吸收B、易透过血脑屏障C、适用于伤寒的治疗 D、骨髓毒性明显E、对早产儿、新生儿可引起灰婴综合症3、氯霉素的下述不良反应中，哪项是与剂量和疗程无关的严重反应？（A）A、不可逆的再生障碍性贫血B、灰婴综合征C、可逆的各类血细胞减少D、溶血性贫血E、出血现象4、可能拮抗氯霉素抗菌作用的药物是（C）A、磺胺类B、庆大霉素C、红霉素D、四环素E、多黏菌素填空题1、氯霉素有 2 个手性中心， 4 个光学异构体.2、利用氯霉素生产工艺中 副产物 可以生产除草剂-杀草铵.邻硝基乙苯简答题1、对硝其溴代苯乙酮的制备中水含量有何影响？为什么？答：水分存在时与溴化氢反应，诱导其延长或基本不起反应，因此对硝基苯乙酮溴代反应时，水分存在不利于反应，必段严格控制溶剂的水份第六章 选择题：1. 具有明显抗癌作用的紫杉醇来源于。(B)A松属植物 B红豆杉属植物 C三尖杉属植物 D银杏属植物2、 水解得到的紫杉醇粗品可以用（A）方法进行纯化：A柱色谱、重结晶 B过滤 C蒸馏 D 渗析3、 紫杉醇难溶于（A）A水 B甲醇 C二氯甲烷D乙腈4、 紫杉醇有独特的抗癌机制，其作用的靶点是（D）和细胞周期中至关重要的微管蛋白。A减数分裂 B 无丝分裂 C 减数分裂与有丝分裂 D有丝分裂5、 下列与紫杉醇有相同作用机制的是AA多烯紫杉醇 B氯霉素 C青霉素D头孢菌素6、 不同的侧链原料出发，可以有多条半合成紫杉醇的路线，其中，以（）为最优。A-内酰胺型侧链前体为原料B双链不对称氧化法C醛醇反应法D顺式肉桂酸乙酯为原料7、 紫杉醇有复杂的化学结构，属于AA三环二萜类化合物B二环三萜类C三环三萜类D二环二萜类8、 在紫杉醇的制备过程中，由于溶剂四氢呋喃很容易吸收水分，故将四元环溶入时必须在（C）保护下操作。A乙醇B盐酸 C惰性气体D氮气9、 半合成的紫杉醇的侧链大致分为A非手性侧链B手性侧链C侧链前体物D。ABC10、 对于-内酰胺侧链合成的过程，环加成的产物为（C）A单一顺式结构体B单一反式结构体C单一顺式或反式结构体D不单一顺式结构体2、 填空题1、 紫杉醇难溶于 水、易溶于 甲醇、二氯甲烷 和 乙腈 等有机溶剂。 2、 紫杉醇的生产工艺路线主要有 天然提取工艺路线 和 生物合成工艺。3、 紫杉醇具有独特的抗癌作用，其作用靶点是 有丝分裂和细胞周期 中至关重要的微管蛋白。4、 紫杉醇是红豆杉的次生代谢产物，主要存在红豆杉属植物的 树皮 和 针叶 中。5、 紫杉醇分子由一个二萜母环和一个苯基异丝氨酸侧链组成，因此半合成紫杉醇原料分为 母环和 侧链 两部分。6、 半合成紫杉醇的侧链大致分为 非手性侧链 、 手性侧链 和 侧链前体物 三大类。7、 合成手性紫杉醇侧链的方法有很多，其中最具代表性的方法有 双键不对称氧化法 和 醛醇反应法 两种。8、 半合成紫杉醇时使用的手性侧链是 2R,3S-苯基异丝氨酸衍生物。简答题：1、紫杉醇半合成路线的策略是什么？ 答：研究发现，红豆杉植物中除紫杉醇外，还有大量母环结构与紫杉醇类似的化合物，其中，最重要的是巴卡亭III和10-去乙酰基巴卡亭III（10-DAB）.紫杉醇的半合成过程的基本策略，就是以天然存在的紫杉醇母环结构类似物巴卡亭III和10-DAB为基本原料，在其C-13位接上化学合成的侧链，以此制备紫杉醇的方法。2、 简述紫杉醇的作用机制： 答：紫杉醇属有丝分裂中的微管抑制剂，紫杉醇具有聚合和稳定细胞内微管的作用，致使快速分裂的肿瘤细胞在有丝分裂阶段被牢牢固定，使微管不再分开，可阻断细胞于细胞周期之G2与M期，使癌细胞复制受阻断而死亡3、 简述紫杉醇分离纯化工艺过程：由石油醚固-液萃取、碱洗、己烷沉淀、一次层析、一次结晶、溴加成、二次层析和二次结晶8道工序构成。第七章选择题1关于头孢菌素C的说法错误的是 DA头孢菌素C分子中存在两个羧基，一个氨基 B在中性或偏酸性环境中显酸性，带负电荷C头孢菌素C钠盐含2个结晶水 D难溶于水，易溶于有机溶剂2、 发酵培养基成分除了碳源和氮源，还需要硫源。头孢菌素C的产量与（A）的量成正比A蛋氨酸与硫酸盐B丝氨酸与硫酸盐C蛋氨酸与碳酸盐D谷氨酸与硫酸盐3、 顶头孢菌素在深层培养条件下有（B）种类型：A菌丝型、萌芽型、节孢子型B菌丝型、节孢子型、萌芽型和分生孢子型C节孢子型、萌芽型和分生孢子型D球形、萌芽型、分生孢子型和节孢子型4、 由7-ACA半合成头孢菌素发展迅速，主要有几个位点：DA1 B2 C3 D45、7-氨基头孢烷酸的生产过程：AA酯化-氯化-醚化-水解 B氯化-醚化-水解-酯化C醚化-水解-酯化-氯化 D水解-酯化-氯化-醚化6、 微生物的酶酰化路线的生产工艺，多采用（A）技术A固相酶B液相酶C气相酶D液相梅与固相酶7、 头孢氨为白色粉末，不溶于DA水B乙醇C氯仿D B和C8、7-氨基头孢烷酸的工艺流程广泛利用的是BA酶水解法B化学裂解法 CA和B D发酵9、 下面不属于半合成抗生素的是BA头孢菌素B青霉素C舒巴坦D阿奇霉素10、 头孢菌素与青霉素比较，过敏反应发生率AA较低 B较高 C一样高 D一样低填空题1、 头孢菌素分子中，可供改造的部位有四个。即7-酰胺基部分、7-氢原子、环中的硫原子和3-位取代基。2、 头孢菌素与青霉素是两类-内酰胺类抗生素，-内酰胺环是该类抗生素发挥生物活性的必须基团，可以开环、发生酰化作用，干扰细菌的转肽酶，阻断其交联反应，使细菌不能合成细胞壁而破裂死亡，最终抑制细菌生长。3、 头孢菌素具有高效、光谱、低毒、耐酶等优点。4、 半合成头孢菌素类与本合成青霉素的生产工艺路线类似，主要有 微生物酰化法、化学酰化法和 以工业生产的廉价青霉素为原料的青霉素扩环法三种。5、 头孢菌素的合成主要是化学酰化法，大多数都是7位和3位侧链同时改造的产物，。6、 顶孢头孢菌在深层培养条件下有四种类型： 菌丝型、 萌芽型、 节孢子型 和 分生孢子型。7、 头孢菌素的生产在国内主要有三条工艺路线， 苯甘氨酰氯与7-ADCA缩合法、 苯甘氨酸无水酰化法和 微生物酶酰化法。8、 苯甘氨酸无水酰化路线的生产工艺的原理是，以 甘氨酸 为原料，进行 二次酰基化；将7-ADCA与三甲基氯硅烷反应得到二硅烷基化的产物9、 头孢菌素类化学酰化路线中3位取代：3位侧链最有效的改造途径是 以亲核取代基取代7-ADCA上的乙酰氧基。10、 头孢菌素C分子中存在 两个羧基和一个氨基，在中性和偏酸性的环境里呈现 酸性， 带负电荷。简答题1、半合成头孢菌素主要结构改造的位置？化学酰化法和微生物酶酰化各有什么优缺点？ 答：可何改造的部位有四个，即7酰氨基部分，7氢原子，环中的硫原子和3位取代基；采用化学酰化法酰化具有专属性强，副反就少，反应条件温和，产品纯度高等优点。 2、7ADCA有几条生产路线？有哪些不同？ 答：有两条，用头孢菌素C为原料通过两种方法酶水解法和化学裂解法得到7ACA，然后再脱乙酰基，便可得到7ADCA。 酶水解法难度大，应用有一定局限性。而化学裂解法虽然操作较为复杂，对生产设备要求高，但工艺较为稳定和成熟。 3、在半合成制备头孢菌素过程中，哪些步骤采用化学合成？哪些步骤采用生物合成？ 答：在化学酰化路线中，7位的酰化和3位的取代采用化学合成。在酶化法生产路线中，酶进行水解，采用生物合成。 4、 苯甘氨酰氯与7ADCA综合法中加入对甲苯磺酸的作用？ 答：加入对甲苯硝酸的作用是7ADCA酯从反应系中分离出来。 5、 微生物酶酰化法生产头孢氨苄是否可以工业化？ 答： 可以工业化，酶酰化法专属性强，副反应少，反应条件温和，产品纯度高，随着酶活力与工艺的改进，酶酰化法将进一步发展并逐步工业化第八章填空题1.氢化可的松又称 皮质醇。2.Oppenauer氧化反应常用的氧化剂为 环己酮 ，催化剂为 异丙醇铝。3.氢化可的松半合成工艺中最大的副产物是 表氢可的松，可转化为 可的松、氟氢可的松 等加以利用。4氢化可的松属于甾体化合物，具有环戊烷并多氢菲母核。5、孕甾二烯-3-醇-20-酮-3-醋酸酯的制备三个步骤：将薯芋皂素经 裂解， 氧化 和 水解 得 双烯醇酮醋酸酯6、 合成氢化可的松的原料有 薯蓣皂素、 剑麻皂素、 番麻皂素、 豆甾醇、 胆甾醇（写4个）等。我国主要以薯蓣皂素为半合成的起始原料。 选择题1.在我国合成氢化可的松的主要原料为（ A ）A.薯蓣皂素 B.胆甾醇 C.豆甾醇 D.剑麻皂素2.关于Oppenauer氧化叙述错误的是（ D ）A.其氧化剂可为环己酮 B.其催化剂为异丙醇铝C.其可逆反应为Meerwein-Ponndorf还原 D.不需要无水条件下操作3.氢化可的松半合成工艺中最大的副产物是（ B ）A.可的松 B.表氢可的松 C.氟氢可的松 D.醋酸可的松4.Oppenauer氧化中的催化剂是（ A ）A.异丙醇铝 B.氢氧化铝 C.环己酮 D.丙酮5.Oppenauer氧化中的氧化剂是（C ）A.异丙醇铝 B.叔丁醇铝 C.环己酮 D.丙醛简答题1. 氢化可的松制备过程中为什么先抽真空后加热？答：因为空气中含有水，醋酐遇水容易水解，如果不抽真空，则醋酐会与空气中的水发生反应，抽去空气后，再加热，则醋酐就在无水环境下进行得到好的产物。2、17-羟基黄体酮的制备过程中为什么要嫁醋酸铵-吡啶溶液？答：吡啶是为了保护C3，C20酮基，4位双键不被氧化。醋酸是为了除去反应中产生的溴化氢，保持催化剂镍的活性。3. 在制备氢化可的松过程中，哪些步骤采用化学合成，哪些为生物法？答：化学合成：（1）5，16 孕甾二烯3B20二酮3醋酸酯的制备（2）16a17a环氧黄体酮的制备(3) 17a羟基黄体酮的制备（4）孕甾烯17a，2121二醇3，,2二酮醋酸酯的制备生物法：最后一步（5）最终产物氢化可的松的制备4、制备氢化可的松哪步采用oppenaner氧化反应，机理是什么？答 第二步制备环氧黄体酮时采用oppenaner氧化反应；机理：环氧化物上的醇羟基易被氧化为酮，具有很强的专一性。5、制备氢化可的松中可能产生“三废”是什么？答：溴化氢，Ni ,H2O等易燃易爆化学试剂第十一章选择题1 目前分离的1000多种抗生素，约2/3产自（B）A、真菌B、放线菌C、细菌D、病毒2 能够用沙土管保存的菌种是（C）A、大肠杆菌B、酵母菌C、青霉菌D、乳酸杆菌3、3 青霉素很容易发生分解，这主要跟它的结构中的（B）部位有关A，苯乙酸；B，内酰胺环；C，五元环；D，羧基4 下列不属于氨基糖苷类抗生素的是（D）A，链霉素；B，卡那霉素；C，红霉素；D，青霉素5 微生物产生的乙醇、丁醇等小分子物质在一定条件下也能杀菌、抑菌，但并不被看作抗生素，因为其不符合抗生素一般具有的（C）特点。A，天然性；B，小分子；C，高活性（低微浓度）；D，次级代谢产物6 下列属于半合成抗生素的是（A）A，氨苄青霉素；B，四环素；C，卡那霉素；D，链霉素7 下列哪个抗生素应用化学合成法生产（ A ）。 A. 氯霉素 B.青霉素 C.链霉素 D.四环素 8 具有两性性质，可用等电点沉淀的抗生素是（ B ）。 A. 青霉素 B.四环素 C.红霉素 D.链霉素9 30.下列哪个抗生素能抑制细胞壁合成（ B ）。A.红霉素 B.青霉素 C.链霉素 D.鱼素 10.（A ）是青霉素发酵生产中使用的前体物质。A.苯乙酸 B.苯 C.乙酸 D.甲酸填空题1 微生物是抗生素的主要来源，其中以 放线菌 菌产生的最多， 真菌 菌次之， 细菌 菌又次之。2 抗生素的生产途径包括 微生物发酵生产、化学全合成和半合成生产。3 1959年，Batchelor获得了青霉素母核，开辟了半合成抗生素的时期，青霉素的母核为 6-氨基青霉烷酸(6-APA) ，青霉素G的侧链为 苯乙酸 4 青霉素G的汉语名称为 苄青霉素 ，其结构可以看作由3个“酸”构成，即 苯乙酸 、 半胱氨酸 和 缬氨酸 5 青霉素为代表的内酰胺类抗生素的作用机制主要是通过抑制 肽聚糖转肽酶及D-丙氨酸羧肽酶 的活性而阻碍了 肽聚糖 的交联与合成，从而抑制了干扰了细菌的 细胞壁 合成。6 最早发现产生青霉素的微生物是属于青霉菌类中的 音符型青霉菌 ，而目前生产上用于生产青霉素的菌种则属于 产黄青霉 ，且大多经过诱变育种，大大提高了青霉素产量。7 从抗菌效力的发挥特点来讲，内酰胺类抗生素属于在细菌的 繁殖 期发挥 杀 菌作用的抗生素，其对革兰氏阳性菌和阴性菌的作用效果有很大不同，即对革兰氏 阳性 菌效果更佳。8 影响青霉素发酵产率的因素 至少三点 基质浓度、前体浓度、pH的影响、温度的影响、溶氧、菌体浓度 9 红霉素的发酵生产需要添加的前体物质为 丙醇 。10 红霉素发酵采用的菌种为 红色糖多孢菌 ，发酵后主要采用 萃取和大孔树脂吸附 工艺来提取。11 大环内酯类抗生素的结构是以 大环内酯基团 为母体，以 苷 键和1-3分子的 糖衍生物 相连接的一类抗生素物质。12 四环素发酵生产使用的菌种是产生金霉素的 金色链霉菌 和 卡诺菌 。13 四环素类抗生素是以 氢化四并苯 为母核的一类有机化合物。14 在四环素生产过程中， 无机磷 对发酵至关重要，是从生长转型到生产的最关键影响因素，生长阶段需要 高磷 ，而生产阶段需要 低磷 。15 氨基糖苷类抗生素的代表性例子是 链霉素 ，其分子结构由 链霉胍 、 链霉糖 和 N-甲基葡萄糖胺 三部分以苷键连接而成。16 工业上用于生产链霉素的菌种是 灰色链霉菌 三、简答题1 抗生素发酵生产工艺的共性技术需求是什么？有什么特点？答：发酵过程普遍流加一种碳源,氮源，如葡萄糖和硫酸铵，ph值通过流加氨水进行调节，很多抗生素在发酵中后期流入前体，对提高产量非常有益。抗生素发酵绝大多数为好氧培养，必须连续通入大量无菌空气。全过程大功率搅拌。发酵液得预处手里，一般加絮凝剂沉淀蛋白，过滤去除菌丝体发酵滤液的提取常用溶剂萃取法，离子交换树脂法，沉淀法，吸附法等提纯浓缩，然后结晶干燥得纯品2 医用抗生素应具备哪些要求？答：（1）难使病原菌产生耐药性：病原菌为了求生存而发挥其适应功能，产生能破坏抗生素的酶，或改变胞浆膜的通透性等；（2）较大的差异毒力：所谓“毒力差异”是指药物对病原和宿主组织的毒力差异；（3）最小抑菌浓度要低；（4）抗菌谱要广。3 -内酰胺类抗生素的作用机制。临床应用的-内酰胺类抗生素主要有哪些？答：机制：通过抑制肽聚糖转肽酶及D-丙氨酸羧肽酶的活性抑制肽聚糖的合成，从而干扰细胞壁合成。这种干扰是不可逆的，且杀菌浓度和抑菌浓度很接近。由于动物细胞没有细胞壁，更不含肽聚糖结构，因而对动物细胞没有影响。临床主要有青霉素、头孢菌素。4 如何根据青霉素生产菌特性进行发酵的过程控制？答：青霉菌在深层培养条件下，经历7个不同的时期，每个时期的菌体形态特征与生产能力有对应关系。在规定时间取样，通过显微镜检查形态变化，用于过程控制。1-4期为菌丝生长期，3期的菌体适宜为种子。4-5期为生产期，生产能力最强，通过工程措施，延长次期，获得高产。在第6期到来前结束发酵。5 红霉素提取的工艺过程。答：发酵液过滤调pH丁(戊)酯萃取萃取液调pH缓冲液萃取丁(戊)酯二次萃取萃取液加丙酮结晶重结晶干燥得成品6 四环素提取的工艺过程。答：发酵液过滤调pH9.0左右加氯化钙加草酸溶液溶解沉淀过滤得滤液调pH4.6到4.8之间四环素析出草酸水溶液活性炭脱色调pH4.0成品7 请简述链霉素的发酵生产与提取工艺包括哪些步骤。答：发酵生产：斜面孢子培养、摇瓶种子培养、二级或三级种子罐扩大培养、发酵培养及提取精制等提取工艺：发酵液（过滤）原液（吸附）饱和树脂洗脱洗脱液脱色、中和、精制精制液脱色、浓缩成品浓缩液（1、无菌过滤水针剂）（2、无菌过滤，干燥粉针剂）四、问答题1 青霉素发酵生产工艺过程是什么？发酵控制原理及其关键控制点是什么？答：发酵工艺过程，1.生产孢子的制备。2.种子罐培养工艺。3.发酵罐培养工艺控制原理：发酵过程需连续流加葡萄糖，硫酸铵以及前提物质苯乙酸盐，补糖率是最关键的控制指标：不同时期分段控制。在青霉素的生产中，及时调节各个因素减少对产量的影响，如培养基，补充碳源，氮源，无机盐流加控制，添加前体等；控制适宜的温度和ph，溶解氧以及菌体浓度。最后要注意消沫，影响呼吸代谢2 青霉素提炼工艺中采用了哪些单元操作，为什么？答：青霉素不稳定，发酵液预处理、提取和精制过程要条件温和、快速，防止降解。提炼工艺包括如下单元操作：（1）预处理与过滤：在于浓缩青霉素，除去大部分杂质，改变发酵液的流变学特征，便于后续的分离纯化过程。（2）萃取：其原理是青霉素游离酸易溶于有机溶剂，而青霉素易溶于水。（3）脱色：萃取液中添加活性炭，除去色素，热源，过滤，除去活性炭。（4）结晶：青霉素钾盐在乙酸丁酯中溶解度很小，在乙酸丁酯萃取液中加入乙酸钾-乙醇溶液，青霉素钾盐口直接结晶析出。3 比较分析链霉素，红霉素，四环素发酵工艺控制的异同及其原理。答：链霉素的发酵工艺过程；1.生产菌种特性2.种子制备3.发酵培养链霉素高度好氧，对温度敏感，链霉菌菌丝过长的最适ph为6.5-7.0,链霉素的发酵周期约7-8d，必须补料葡萄糖，硫酸铵和氨水，提高发酵产量。红霉素；1.红霉素生产菌体2.种子制备3.发酵培养红霉素生产菌对温度敏感，最适ph为6.7-6.9，发酵周期约150-160h，必须中间补料。还原糖控制在1.2-1.6，每隔6h加入葡萄糖。及时补充氮源。四环素；1.生产菌体2.种子制备3.发酵培养工艺温度对四环素的生产产量影响和改变生物合成途径的影响较大，菌体生长最适ph为6.2-6.8，而四环素合成最适ph为5.8-6.0，发酵过程对溶解氧敏感，应该采取措施，增加溶解氧水平。第十二章选择题1.下列属于极性氨基酸的是（B）。A、苯丙氨酸 B、组氨酸 C、色氨酸 D、脯氨酸2、以下属于氨基酸生产工艺的是（ABCD）。A、微生物发酵工艺 B、酶法转化工艺 C、化学合成工艺 D、蛋白质水解工艺3、关于利用发酵工程生产谷氨酸的生产实例的叙述中，错误的是（B）。A、常用的谷氨酸产生菌有好氧性的谷氨酸棒状杆菌、黄色短杆菌等。B、生产用的培养基通常是由豆饼的水解液、玉米浆、尿素、磷酸二氢钾、氧化钾、硫酸镁、生物素等配制而成的液体培养基，从培养基的成分上分析，该培养基为合成培养基。C、发酵工程中应通过发酵罐上面连接的通气、搅拌、接种、加料、冷却、PH检测等装置严格控制发酵条件。D、提取出来的谷氨酸用适量的NaCO3溶液中和后，再经过过滤、浓缩、离心分离等步骤，便制成了味精。4、氨基酸发酵过程中若发生噬菌体感染时会出现一些明显的变化，主要表现（D）。A、发酵液光密度值急剧下降 B、发酵液泡沫增多、粘度增大，甚至呈胶状 C、C源、N源以及氧的消耗减慢甚至停滞，排气中CO2含量迅速下降 D、以上说法都对5、从代谢控制育种的角度出发，下列关于选育高产谷氨酸菌株途径中可行的是（C）。A、选育以琥珀酸或苹果酸为唯一碳源的菌株B、选育不分解利用谷氨酸的突变株C、A和BD、以上均不可行6、以下是对氨基酸工业的描述，其中说法正确的是（D）A、氨基酸的生产最早是采用水解蛋白质的方法B、中国谷氨酸的生产量居世界第一C、除缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸国内不能实现产业化生产外，其他氨基酸均已完全实现国产化D、以上说法都正确填空题1、氨基酸是在羧酸中a-碳上的一个原子被氨基 取代而成的一类化合物。2、氨基酸根据R基团的化学结构不同可分为脂肪族氨基酸、芳香族氨基酸、杂环氨基酸；根据R基团的极性可把氨基酸分为极性和非极性氨基酸。3、氨基酸一般溶于水、稀酸稀碱，不溶于乙醚、氯仿等有机溶剂，常用乙醇沉淀氨基酸。4、谷氨酸生产菌主要是棒状杆菌属、短杆菌属、小短杆菌属和节杆菌属中的细菌 5、目前国内谷氨酸提取工艺主要有：等电点法、离子交换法等。6、赖氨酸发酵培养基有碳源、氮源、生长因子、无机盐和微量元素组成。7、赖氨酸的分离纯化采用离子交换树脂吸附工艺。8、谷氨酸等电点为PH3.22，其溶解度受温度影响较大（较大或较小）。9、国内谷氨酸生产的碳源原料主要有淀粉糖和糖蜜两类，国内谷氨酸产生菌多数为生物素缺陷型。10、天冬氨酸族氨基酸生物合成共同途径上的第一个关键酶是天冬氨酸激酶，在E.coli中，此酶有3种同工酶组成。简答题1、目前常用的氨基酸生产工艺有哪些，并简要说明各工艺的特点。（1） ，微生物发酵工艺：借助微生物具有自身合成氨基酸的能力，通过发酵培养生产氨基酸。大多采用营养缺陷兼结构类似物抗性突变株，还有采用基因工程菌进行生产。（2） ，酶法转化工艺：利用酶的立体专一性反应，催化底物生产有活性的氨基酸。具有工艺简便，转化率高，副产物少，容易精制等特点。适用于发酵或化学合成难以生产的氨基酸。（3） ，化学合成工艺：通过有机化学合成途径生产氨基酸，其优点是不受氨基酸品种的限制，理论上可生产天然氨基酸和非天然氨基酸。（4） ，蛋白质水解工艺：以毛发、血粉等原料蛋白质，通过酸、碱或酶水解形成多种氨基酸的混合物，再经过分离纯化制备各种氨基酸。2、简要介绍赖氨酸的分离纯化工艺的特点。赖氨酸的分离纯化采用离子交换树脂吸附工艺。赖氨酸是碱性氨基酸，在酸性溶液中以阳离子形式存在，能强烈被阳离子树脂吸附。常用铵型强酸性阳离子交换树脂，可选择性吸附碱性氨基酸，同时氨水洗脱后，树脂不必再生.第十三章选择题1.下列哪项不属于维生素范畴？（B）A硫胺素 B、生长素 C、核黄素 D、抗坏血酸2.下列哪项不是主要维生素的生产方式？（A）A转基因技术 B、化学合成 C、天然提取 D、微生物发酵3.下列哪项不是属于莱氏法化学合成的工艺路线？（A）A利用D-葡萄糖为原料，经过催化氢化生成L-山梨醇BL-山梨醇在酸性溶液中丙酮化C用高锰酸钾在碱性溶液中将双丙酮-L-山梨糖氧化为双丙酮-L-古龙酸D2-酮基-L古龙酸内酯化和烯醇化直接生成抗坏血酸4.两步发酵生产维生素C可以分为三步，下列哪个步骤不属于两步发酵生产维生素C？（C）A发酵 B、转化 C、纯化 D、提取5.下列哪项不属于两步发酵生产工艺过程？（B）AD-山梨醇的化学合成B将D-山梨醇转化为2-酮基-L古龙酸C、2-酮基-L古龙酸的分离纯化D、碱转化法催化2-酮基-L古龙酸生成维生素C6.维生素A2的生物活性为维生素A1 的（B） A70% B40% C90% D10% E50%7.促进凝血酶原合成的是（ E ） A. 维生素A B.维生素C C. 维生素D D. 维生素E E. 维生素K8.维生素K3中常加的稳定剂是（E） A.氢氧化钠 B.硫酸钠 C.硫酸氢钠 D.亚硫酸氢钠 E.焦亚硫酸氢钠9.氯化4-甲基-3-（2-甲基-4-氨基-5-嘧啶基）甲基-5-（2-羟基乙基）噻唑盐酸盐是（D） A维生素A B维生素D C维生素E D维生素B1 E维生素K310.缺乏维生素C易患以下哪种疾病（C） A.恶性贫血 B.口角炎 C.抗坏血病 D.夜盲症填空题1根据溶解性，把维生素分为水溶性和脂溶性两类，水溶性维生素包括（）和（），维生素在体内的主要作用是（）和（）其衍生物以辅酶或辅基形式参与酶反应，脂溶性维生素包括（）等，在食物中与脂肪共存。2.人体内不能合成维生素，缺乏它会导致疾病发生，出现相应缺乏症，其它的种类有（）、()、()脂肪族，脂环族等，主要维生素生产方式有三种分别是（）（）和（）。3.（）又称L-抗坏血酸，它的生理功能是（）,它含有（）个手性碳原子，4种旋光异构体，是目前世界上产销量最大，应用最广的维生素产品，它的制备的两种方法是()和（）。4.两步发酵工艺逐渐在国内生产企业普遍采用，两步发酵生产维生素C可以分为（）、（）和（）三大步骤。5.维生素B2广泛存在于动植物中，但含量低，无法分离提取制备，从1935年出现许多合成方法，维生素B2的工业发酵一般为（）对发酵液的要求是()能产生维生素B2的微生物有（）()和（）。答案：1.（B族维生素），（ 维生素C），（ 调节酶活性）， （代谢活性）， （维生素A 、D、E、K）。2（.多羟基不饱和内酯衍生物）， （芳香族），( 杂环族)， (微生物发酵) ， (化学合成)， 9(天然提取)3.(维生素C)， （抗氧化，促进胶原蛋白合成和黏多糖合成），（2 ）， （酸转化），（碱转化）4.（发酵），（提取），（转化），5.（二级发酵），（先沉淀再氧化进行分离纯化），（细菌），（真菌），(霉菌)6.维生素的生产方式（微生物发酵）、（化学合成）、（天然提取）7.（抗坏血酸）可参与体内氧化还原反应，是体内一种重要的抗氧化剂，在保护（DNA）、（蛋白质）和（膜结构免道损伤）起着重要的作用，可使（三价铁）还原为（二价铁）促进铁的吸收。8.影响维生素c稳定性的因素有很多，举例说明（温度、Ph、酶、金属离子）9.两步发酵生产维生素C包括（发酵）、（提取）、（转化）10.维生素的种类包括脂溶性和水溶性，脂溶性包括（维生素A、D、E）水溶性包括（B族维生素）（尼克酸）（泛酸）（叶酸）等。简答题1.从分子水平和个体水平简要说明维生素的生理功能？答：（1）分子水平方面-维生素在体内的作用主要是调节酶活性和代谢活性，以辅酶或辅基的形式参与反应。 （2）个体水平方面-人体内不能合成维生素，缺乏它会导致疾病的发生，出现相应的缺乏症。2.现行的维生素c生产工艺过程有哪两种？请指出哪一种更具有优势并作简要分析？答：现行的维生素c生产工艺过程有：莱氏化学合成法和两步发酵法。其中两步发酵法更具有优势。原因如下：（1）以生物氧化代替化学氧化简化了生产工艺。（2）省略了丙酮化反应步骤，节省了丙酮、硫酸等大量化工原料和其防爆设备，节约了成本，有利于安全生产。（3）三废和污染较小。（4）提高了生产能力。3.简要说明，两步发酵生产工艺过程中的两步发酵？（从菌种及反应过程进行说明。）答：第一步发酵运用黑醋酸杆菌，从D山梨醇到L山梨糖只是把c2位的羟基氧化为羰基,其他集团保持不变。第二步发酵采用氧化葡萄糖酸杆菌和巨大芽孢杆菌混合培养，从L-山梨糖到2-酮基L-古龙酸将c1位羟基氧化为羧基。第十四章填空题1、表达载体基本特征（自主复制性）、（不相容性）、（转移性）、（选择标记）、（多克隆位点）。2、在大肠杆菌中，外源基因表达产物的主要形式为（可溶性蛋白）和（不溶性蛋白）。3、基因工程菌的构建包括（目标基因的获得）、（最佳表达载体的构建）、（工程菌构建）三个主要环节。4、基因工程技术中常用的载有（质粒）、（噬菌体）、（噬菌粒）、（黏粒）。5、克隆真核基因常用的方法是（逆转录法）和（化学合成法）。选择题 1、真核基因的获得可采取下列哪种方法（D）A、直接从生物体中提取后再化学合成B、直接从生物体提取C、直接从生物体中提取后在进行PCR扩增D、逆转录法2.大肠杆菌表达真核基因时对其蛋白质产物（D） A、能进行翻译后修饰，故对蛋白质产物能进行糖基化 B、能进行翻译后修饰，故对蛋白质产物不能进行糖基化 C、不能进行翻译后修饰，故对蛋白质产物能进行糖基化 D、不能进行翻译后修饰，故对蛋白质产物不能进行糖基化3、基因工程大肠杆菌与宿主菌的培养基的本质区别在于，前者必须加入（A） A、抗生素 B、氨基酸 C、前体 D、激素4、目前生产生用于表达外源基因的动物细胞，均为（A）A、传代细胞系 B、原代细胞 C、二倍体细胞系 D、杂交瘤细胞5、基因工程的单元操作顺序是（B）A、酶切、转化、连接、筛选B、酶切、连接、转化、筛选D、 连接、转化、酶切、筛选D、酶切、连接、筛选、转化简答题1、大肠杆菌表达系统与酵母表达系统的异同？ 相同点：易操作，繁殖快、成本低、易于工业化生产、 不同点：1、大肠杆菌表达系统转录信号与酵母系统不同，与核糖体的结合位点不同 2、大肠杆菌中表达不存在翻译后修饰作用，故对蛋白质产物不能糖基化；酵母 菌具有原核细菌无法比拟的真核蛋白翻译后加工系统。 3、大肠杆菌表达系统由于分泌能力不足，真核蛋白质常形成不溶性的包涵体，表达产物必须在下游处理过程中经过变性和复性处理才能恢复其生物活性；酵母菌具有真核生物表达系统基因表达调控和蛋白质修饰功能，避免了产物活性低、包涵体变性复性等问题。第十五章填空题1.干扰素是机体免疫细胞产生的一类（结构类似）、（功能接近）的生物调节蛋白。2.干扰素的生物活性包括（广谱抗病毒活性）、（直接抗肿瘤活性）和（免疫调节活性）。3.在正常情况下，免疫产生（保护性排斥性）反应，对机体有利；在异常情况下，免疫也会产生（）反应，对机体造成损伤。4.干扰素表达载体的构建过程中，将表达载体导入（假单胞杆菌干扰素）中，筛选得到（工程菌）。简答题1、 简述干扰素及其功能。抗体受到病毒感染时，免疫细胞产生的一组结构类似、功能接近的细胞因子称为干扰素；用于干扰病毒在细胞内增殖。2、 简述在原核工程菌中生产重组干扰素包括哪些环节。工程菌构建；发酵培养；包涵体；复性；重组人干扰素。3、 简述重组人干扰素-2b的分离工艺过程。（1）、菌体裂解。一定pH条件下，表面活性剂或强离子剂可使细胞裂解；（2）、预处理。加絮凝剂进行絮凝，加凝聚剂进行沉淀，离心；（3）、初级分离。盐析、离心、收集沉淀保存。第十六章选择题1、胰岛素是有那个细胞团合成分泌的(A)A、胰岛B细胞B、胰岛A细胞C、肾上腺细胞C、甲状腺分泌细胞2、胰岛素的作用(B)A、促进脂肪的消耗B、促进葡萄糖转化为其他物质C、促进其他物质向葡萄糖转化D、促进非糖物质的消耗3、下列哪一项不是国内的重组人胰岛素的提取工艺共同点(D)A、粗制提取B、色谱分离C、重结晶D、凝胶电泳4、下列哪一项不是的重组人胰岛素的质量控制工艺(B)A、特异性鉴别B、纸层析法鉴定C、效价测定D、人胰岛素原鉴定5、下列哪一项不是重组人生长激素的临床引用(B)A、治疗侏儒症儿童及生长激素缺乏症B、促使葡萄糖向糖元的转化C、调节心肾功能D、用于延缓衰老改善运动能力填空题1、胰岛素原是由N端 、C端A链和中间连接的C肽组成，C肽有助于形成构象和 。2、胰岛素原要经过型内蛋白酶切除 和B链的连接，型内蛋白酶切除C肽与 的连接，生成成熟的胰岛素分泌到细胞外，进入 3、A链具有 氨基酸残基，B链有30 个按激素那残基， 对二硫键，2对位链间二硫键。4、目前临床上应用的重组人胰岛素制剂主要有三种类型 、 和 5、前肽序列是 的前序列，其作用是引导新合成的微小胰岛素原通过正确的分途径，即从细胞 到 ，随后分泌到胞质外。6、胰岛素制剂中可加入 或 作为防腐剂，应对其进行限量检查，限度为80%110%。7、生长激素是由动物脑 前叶外侧的特异分泌细胞分泌的一种促进生长的蛋白质激素。8、通常所说的人生长激素一般都是指 生长激素，由 个氨基酸残基组成， 无（填“有”或“无”）糖基化。 菌种 种子培养9、下列流程是大肠杆菌发酵工艺流程图，填补空缺过程：生长激素S-100色谱DWAE色谱Phenyl色谱G-25色谱离心填空题答案1.B链二硫键 2.血液循环A链C肽3.2134.中效速效长效5.酵母交配因子内质网高尔基体6.苯酚或间甲酚7.垂体8.22ku1919.发酵培养粗提简答题1.简述重组人生长激素工艺流程：基因工程大肠杆菌的培养基因工程大肠杆菌的发酵工艺重组人生长激素的分离工艺重组人生长激素的纯化工艺重组人生长激素制剂的质量控制。2.简述重组DNA技术上产的重组人胰岛素在临床运用上的优点 供应充分 消除了动物胰岛组织中存在病原体而导致疾病意外传播的危险。 经济适用3.简述用酵母表达人胰岛素的工艺优缺点。优点:表达产物二硫键的结构与位置正确，不需要复性加工处理;缺点：表达量低，发酵时间长。4.简述重组人生长激素生产流程与传统的包含体技术相比的优点。1使生长激素以天然的结构直接分泌到菌体之外的培养液中，避免了重折叠；2收率高3受菌体蛋白污染少纯度高 4更安全问答题1、常用的重组人胰岛素制剂有哪些？分别举例。 经动物胰腺提取或纯:猪、牛胰岛素粗体后经凝胶过滤处理后的胰岛素，再用离子交换色谱进行纯化，以进一步降低胰岛素原的含量并去除部分杂质。 半合成人胰岛素:以猪胰岛素为原料进行修饰得到的人胰岛素。 生物合成人胰岛素：用重组DNA技术生产的人胰岛素，又称重组人胰岛素，为中性可溶性单组分人胰岛素。 胰岛素类似物：通过重组DNA技术，对人胰岛素氨基酸序列进行修饰生成的可模拟正常胰岛素分泌和作用的一类物质。2、简述胰岛素和胰高血糖素的作用机制。胰岛素是降血糖，胰高血糖素是升血糖。其中降血糖原理是当血糖高的的时候，通过胰岛B细胞分泌胰岛素，来促进细胞对葡萄糖的吸收和分解。和葡萄糖的向糖原和非糖物质转化。胰高血糖素则是当血糖低的时候，通过胰岛A细胞分泌增加体内蛋白质糖原等非糖物质转化分解为葡萄糖，进而增加血糖。他们是拮抗作用。其整个过程是神经体液调解。血糖高了或者低了，都能反馈给垂体和下丘脑。就是反馈调节了。填空题1、在动物细胞培养中，_和_是提供能量和合成代谢的前体，且在不同培养条件下，两者代谢的能量以_和_的形式提供。2、根据细胞的传代次数和寿命，细胞系可分为_、和_或_。3、动物细胞的表达载体：_、_。4、动物细胞培养基的种类有_、_、_。5、氨基酸可通过_或_途径转变为糖或脂肪酸，间接提供能量。6、根据细胞的生长特性和对基质的依赖性，可将细胞分为_细胞和_细胞。7、目前用于制药的动物细胞有4类，分别是_、_、_、_。8、为了防止微生物污染，可在培养基中添加_，以避免轻度污染。对于支原体污染，常用_、_处理培养物。选择题1、下列哪项描述不属于永久细胞系的特点（）A、细胞形状规则B、没有接触抑制现象C、有异常染色体D、可以连续培养2、下列哪种细胞的G0期相对较短（）A、淋巴细胞B、腺细胞C、肝细胞D、结缔组织细胞3、下列哪项不属于昆虫表达系统的优点（）A、安全易饲养B、高量表达C、高效表达D、外源基因的表达在转染的晚期4、下列哪项属于正常血浆的渗透压：_。A260B.270C.290D.3205、在杂交瘤培养中，血清的加入对培养非常有效，一般为_的胎牛血清。A. 5%10%B.8%15%C.10%20%D.12%20%6下列哪一个不属于兼性细胞（）细胞细胞淋巴细胞细胞7理想的微载体具备的性能（）质地较硬，耐高温，透明性，密度较低质地柔软，不耐高温，透明性，密度较高质地柔软，耐高温，透明性，密度较低质地柔软，耐高温，不透明性，密度较低8.下面哪种方法不能用于对凋亡细胞的检测（）A.透射电镜观察B.HE染色C.台盼蓝染色D.荧光显微镜观察9.以下哪种不能用于测定细胞活性()A.苯胺黑B.结晶紫C.醋酸洋红D.台盼蓝10.卡那霉素的作用对象是()A.真菌B.支原体C.G+、G-细菌D.G-细菌简答题1、简述动物细胞培养基的主要成分及其作用。2、动物细胞的大规模培养的技术包括哪些？并简要说明。3、细胞培养到一定时间为何要进行传代？能一直传代下去吗？阐述其机理。答案：一、 填空题：1、葡萄糖、谷氨酰胺、ATP、NADPH2、有限细胞系、无限细胞系、连续细胞系3、病毒载体、质粒载体4、天然培养基合成培养基无血清培养基5、生糖生酮6、贴壁依赖性、非贴壁依赖性7、原代细胞系、二倍体细胞系、异倍体细胞系、融合或重组的工程细胞系8、抗生素卡那霉素金霉素二、单选题：15 CCDCC 610 CCCCC三、简答题：1、动物细胞培养基的成分主要有糖类、氨基酸、维生素与无机盐、激素及附加成分。作用：糖类提供细胞生长的碳源和能源。分解后释放出能量ATP。氨基酸可通过生糖或生酮途径转变为糖或脂肪酸，间接提供能量。维生素既不是细胞的物质基础，也不是能量物质，对代谢和生长起调节和控制作用。无机盐是细胞代谢所需酶的辅基，同时保持细胞的渗透压和缓冲PH的变化。激素对细胞的生长有刺激作用。贴附因子的作用是让细胞的贴壁生长。2、答：（）单层贴壁培养。单层贴壁培养是指把细胞贴附于一定的固体支持表面上，生长形成单层细胞的培养方法，适合于贴壁依赖性细胞培养。（）悬浮培养。悬浮培养是指细胞在细胞反应器内游离悬浮生长的培养过程