中药、天然药物药理毒理技术要求

,中药、天然药物药理毒理技术要求程鲁榕仅供参考,8/07,一、概述二、药理毒理技术要求三、药理毒理评价,主要内容,一、概述,一、概述,新药评价的核心,一、概述新药评价的核心,新药评价的核心,有效,质量可控,毒理学,药理学,药学,临床安全,临床药理,一、概述新药评价的核心,安全,药理毒理在新药研究中的地位,一、概述在新药研究中的地位,为药学研究提供生物学支持为临床研究提供参考依据决定进入临床研究的重要条件之一,一、概述在新药研究中的地位,30年代磺胺酏事件-107人中毒死亡50年代有机锡事件-207人中毒，103人死亡60年代反应停事件-万余名先天畸形儿,一、概述在新药研究中的地位,历史的教训和经验,近20年日本：小柴胡汤-药物间质性肺炎新加坡：黄连（含小檗碱）-毒物马来西亚：厚朴酚-肾脏美国：麻黄（生物碱）-心血管、CNS、肝炎、皮炎欧洲：马兜铃酸(关木通、广防己）-肾损害、潜在致癌吡咯里西啶碱：千里光-肝损害、潜在致癌,一、概述在新药研究中的地位,各研究之间的关系,一、概述各研究之间的关系,药理、毒理、药学、临床之间的关系密切,一、概述各研究之间的关系,药学,毒理,药理,临床,有效或高于有效是否有效吸收剂量对主要生理为何有效分布系统的影响（协同、相加）转化、排泄其它药理作用量效关系体内变化规律发现新用途时效关系优选给药方案毒理研究参考作用机理临床合理用药毒理研究参考药理毒理研究（组方的必要性）（指导与参考）,药理学,一般/安全药理学,主要药效学,药代动力学,-致癌性遗传毒性生殖毒性局部耐受性、过敏、依赖性、免疫毒性光敏和其它试验等了解毒性（无）反应的剂量、时间、强度、症状、靶器官及可逆性等，为临床方案提供参考、预测出现的毒性反应，制订临床防护措施、保证受试者用药安全,毒理学,局部用药毒性,全身用药毒性,急性毒性,长期毒性,特殊毒性,目的,一、概述中药研究的特点,中药研究的特点,一、概述中药毒理研究的特点,中医药理论指导的辨证施治多数药材有悠久的临床使用经验多数中药毒性较小中药复方使用的特殊性与优势,组分较复杂,有效或毒性成分不清药物的“有毒”“无毒”多基于经验积累中药长期潜在的毒性仍需研究全面药理毒理研究的可借鉴文献少近代药理毒理学基础研究的新发现,优势,问题,一、概述中药毒理研究的特点,穿琥宁葛根素细辛,一、概述中药毒理研究的特点,认识多样性、复杂性申报需结合品种特点借鉴历史，重视基础,一、概述新药研究的特点,长周期,高投入,高回报,高风险,极少,二、药理毒理技术要求,二、药理毒理技术要求与问题,围绕新药评价的核心内容尽量提供能基本保证受试者安全有效或将风险降到最低的试验资料,基本原则,二、药理毒理技术要求与问题基本原则,中药注册分类与技术要求,二、药理毒理技术要求与问题-分类,20071.未在国内上市销售的从植物、动物、矿物等物质中提取的有效成份及其制剂。2.新发现的药材及其制剂。3.新的中药材代用品。4.药材新的药用部位及其制剂。5.未在国内上市销售的从植物、动物、矿物等物质中提取的有效部位及其制剂。6.未在国内上市销售的中药、天然药物复方制剂。7.改变国内已上市销售中药、天然药物给药途径的制剂。8.改变国内已上市销售中药、天然药物剂型的制剂。9.仿制药。,二、药理毒理技术要求与问题-分类,注册分类1未在国内上市销售的从植物、动物、矿物等物质中提取的有效成份及其制剂。指国家药品标准中未收载的从植物、动物、矿物等物质中提取得到的天然的单一成份及其制剂，其单一成份的含量应当占总提取物的90%以上。药理:药效、药代毒理:急毒、一般药理、长毒、三致试验,二、药理毒理技术要求与问题-分类,注册分类1当有效成份或其代谢产物与已知致癌物质有关或相似，或预期连续用药6个月以上，或治疗慢性反复发作性疾病而需经常间歇使用时，必须提供致癌性试验资料。如有由同类成份组成的已在国内上市销售的从单一植物、动物、矿物等物质中提取的有效部位及其制剂，则应当与该有效部位进行药效学及其他方面的比较，以证明其优势和特点。,二、药理毒理技术要求与问题-分类,注册分类2新发现的药材及其制剂。指未被国家药品标准或省、自治区、直辖市地方药材规范（统称“法定标准”）收载的药材及其制剂。药理毒理同分类1（除不要求药代）,二、药理毒理技术要求与问题-分类,注册分类3新的中药材代用品指替代国家药品标准中药成方制剂处方中的毒性药材或处于濒危状态药材的未被法定标准收载的药用物质。药理毒理要求同注册分类2与被替代药材对比研究：药效遗传毒性：具有法定标准的中药材、天然药物可以不提供，否则必须提供资料；单一组分：要求药代,二、药理毒理技术要求与问题-分类,新的中药材代用品获得批准后，申请使用该代用品的制剂应当按补充申请办理，但应严格限定在被批准的可替代的功能范围内。,二、药理毒理技术要求与问题-分类,注册分类4药材新的药用部位及其制剂。指具有法定标准药材的原动、植物新的药用部位及其制剂。药理:药效毒理:急毒、一般药理、长毒遗传毒性,二、药理毒理技术要求与问题-分类,注册分类5未在国内上市销售的从植物、动物、矿物等物质中提取的有效部位及其制剂。指国家药品标准中未收载的从单一植物、动物、矿物等物质中提取的一类或数类成份组成的有效部位及其制剂，其有效部位含量应占提取物的50以上。药理:药效毒理:急毒、一般药理、长毒,二、药理毒理技术要求与问题-分类,注册分类5除按要求提供申报资料外，尚需提供以下资料：申请由同类成份组成的未在国内上市销售的从单一植物、动物、矿物等物质中提取的有效部位及其制剂，如其中含有已上市销售的从植物、动物、矿物等中提取的有效成份，则应当与该有效成份进行药效学及其他方面的比较，以证明其优势和特点。,二、药理毒理技术要求与问题-分类,注册分类6未在国内上市销售的中药、天然药物复方制剂中药复方制剂应在传统医药理论指导下组方。主要包括：来源于古代经典名方的中药复方制剂、主治为证候的中药复方制剂、主治为病证结合的中药复方制剂等。6.1中药复方制剂；药理:药效毒理:一般药理、急毒、长毒中药复方制剂，根据处方来源和组成、功能主治、制备工艺等可减免部分试验资料，具体要求另行规定；处方中如果含有无法定标准的药用物质，还应当参照相应注册分类中的要求提供相关的申报资料；,二、药理毒理技术要求与问题-分类,注册分类6未在国内上市销售的中药、天然药物复方制剂天然药物复方制剂应在现代医药理论指导下组方，其适应症用现代医学术语表述。6.2天然药物复方制剂；药理:药效毒理:急毒、一般药理、长毒天然药物复方制剂应当提供多组份药效、毒理相互影响的试验资料及文献资料；处方中如果含有无法定标准的药用物质，还应当参照相应注册分类中的要求提供相关的申报资料；,二、药理毒理技术要求与问题-分类,注册分类6未在国内上市销售的中药、天然药物复方制剂包括中药和化学药品，天然药物和化学药品，以及中药、天然药物和化学药品三者组成的复方制剂。6.3中药、天然药物和化学药品组成的复方制剂。药理:药效毒理:急毒、一般药理、长毒,二、药理毒理技术要求与问题-分类,注册分类6中药、天然药物和化学药品组成的复方制剂中的药用物质必需具有法定标准，申报临床时应当提供中药、天然药物和化学药品间药效、毒理相互影响（增效、减毒或互补作用）的比较性研究试验资料及文献资料，以及中药、天然药物对化学药品生物利用度影响的试验资料；申报生产时应当通过临床试验证明其组方的必要性，并提供中药、天然药物对化学药品人体生物利用度影响的试验资料。处方中含有的化学药品（单方或复方）必须被国家药品标准收载。,二、药理毒理技术要求与问题-分类,注册分类7改变国内已上市销售中药、天然药物给药途径的制剂指不同给药途径或吸收部位之间相互改变的制剂。药理:药效毒理:急毒、长毒局部毒性如毒性明显改变-考虑其它试验？,二、药理毒理技术要求与问题-分类,注册分类8改变国内已上市销售中药、天然药物剂型的制剂指在给药途径不变的情况下改变剂型的制剂。药理:药效毒理:急毒、长毒改剂型说明特点适应证与功能主治范围原则同原制剂工艺无质的改变药理毒理？工艺有质的改变-药理毒理？缓、控释等剂型研究?,二、药理毒理技术要求与问题-分类,8、改变国内已上市销售中药、天然药物剂型的制剂。说明2（11）：删除了原来的以下内容。改变剂型时，如果生产工艺有质的改变，申报资料应当提供新制剂与原制剂在制备工艺、剂型、质量标准、稳定性、药效学、临床等方面的对比试验及毒理学的研究资料。改变剂型时，如果生产工艺无质的改变，可减免药理、毒理和临床的申报资料（缓释、控释制剂及注射剂除外）。缓释、控释制剂临床前研究应当包括缓释、控释制剂与其普通制剂在药学、生物学、人体药代动力学及临床的对比研究试验资料，以说明此类制剂特殊释放的特点。,8、改变国内已上市销售中药、天然药物剂型的制剂。说明2（11）：修改理由：一方面是为了与药品注册管理办法一致，另一方面，该内容改动较大，情况相当复杂，故准备将具体要求在随后的“补充规定”中予以说明。,关注改动、注意沟通,二、药理毒理技术要求与问题-分类,注册分类8对于“注册分类8”改变国内已上市销售中药、天然药物剂型的制剂，应当说明新制剂的优势和特点。新制剂的功能主治或适应症原则上应与原制剂相同，其中无法通过药效或临床试验证实的，应当提供相应的资料。,二、药理毒理技术要求与问题-分类,注册分类9仿制药指注册申请我国已批准上市销售的中药或天然药物。仿制药应与被仿制品种一致，必要时还应当提高质量标准。,二、药理毒理技术要求与问题-分类,由于中药、天然药物的多样性和复杂性，在申报时，应当结合具体品种的特点进行必要的相应研究。如果减免试验，应当充分说明理由。,二、药理毒理技术要求与问题-分类,中药、天然药物注射剂基本技术要求（征求意见稿）07.7已有国家标准中药、天然药物注射可不提供药效学试验资料有效成分达到90%以上的注射剂，可仅提供过敏性、溶血性、刺激性其他注射剂:一般药理学、急性毒性、长期毒性、过敏性、溶血性、刺激性等,中药、天然药物注射剂基本技术要求（征求意见稿）07.7改变给药途径的中药、天然药物注射剂要求与新的中药、天然药物注射剂相同。,中药、天然药物注射剂基本技术要求（征求意见稿）07.7改剂型的中药、天然药物注射剂若工艺无质的改变，要求同已有国家标准的中药、天然药物注射剂；若工艺有质的改变，要求同新的中药、天然药物注射剂。,中药、天然药物注射剂基本技术要求（征求意见稿）07.7已有国家标准中药、天然药物注射剂的补充申请若工艺无质的改变，要求同已有国家标准的中药、天然药物注射剂；若工艺有质的改变，要求同新的中药、天然药物注射剂。,中药、天然药物注射剂基本技术要求（征求意见稿）07.7工艺有质的改变：1、全面考察受试物的药理作用主要药效应两种动物模型/试验方法经典模型/试验方法保证试验结果客观/可重复阳性对照：采用功能主治相似的已上市药口服途径（制剂工艺合理）剂量设计：三个剂量组（同水平）与口服途径对照比较,工艺有质的改变：2、非临床安全性研究须在通过认证的GLP实验室进行如处方组成中含有首次用于注射给药途径的原料药，应提供其全部的安全性试验资料（包括一般药理、急毒、长毒、溶血、刺激、过敏、遗传、生殖毒性等试验，必要时提供致癌试验）。,附件4：药品补充申请注册事项及申报资料要求3：增加中药的功能主治或者化学药品、生物制品国内已有批准的适应症药理毒理研究：（1）需延长用药周期或者增加剂量者，应当提供药理毒理试验资料或者文献资料。（2）用药周期和服用剂量均不变者，应当提供主要药效学试验资料及文献资料,二、药理毒理技术要求与问题-分类,附件4：4.变更用法用量或者变更适用人群范围但不改变给药途径。变更用法用量或者变更适用人群范围但不改变给药途径，应当提供支持该项改变的安全性研究资料或文献资料降低用量/次数：药效？成人-儿童/孕妇：动物？,二、药理毒理技术要求与问题-分类,附件4：6.变更药品处方中已有药用要求的辅料。未注明具体要求考虑辅料对药物的影响？,二、药理毒理技术要求与问题-分类,附件4：7.改变影响药品质量的生产工艺。改变影响药品质量的生产工艺的，其生产工艺的改变不应导致药用物质基础的改变。中药如有改变药用物质基础的，应当提供药学、药理毒理等方面的对比试验研究资料,二、药理毒理技术要求与问题-分类,附件4：9，替代或减去国家药品标准处方中的毒性药材或处于濒危状态的药材（指申请人自行要求进行替代或减去药材的申请，不包括国家规定进行统一替代或减去药材的情形）。（1）申请使用已获批准的中药材代用品替代中药成方制剂中相应药材。应当提供新的制备工艺、药品标准和稳定性等药学研究资料，可以减免药理、毒理和临床试验资料。（2）申请使用已被法定标准收载的中药材进行替代，如果被替代的药材在处方中处于辅助地位的，应当提供新的制备工艺、药品标准和稳定性等药学研究资料，必要时提供药理、毒理和临床试验资料。其替代药材若为毒性药材，则还应当提供考察药品安全性的资料，包括毒理对比试验资料，必要时提供药效学试验资料，并进行临床试验。如果被替代的药材在处方中处于主要地位的，除提供上述药学研究资料外，还应当进行药效、毒理的对比试验及相关制剂的临床等效性研究。,二、药理毒理技术要求与问题-分类,附件4：9，替代或减去国家药品标准处方中的毒性药材或处于濒危状态的药材（指申请人自行要求进行替代或减去药材的申请，不包括国家规定进行统一替代或减去药材的情形）。（3）申请减去毒性药材的，应当提供新的制备工艺、药品标准和稳定性等药学研究资料、药理实验资料，并进行临床试验。（4）药理、毒理试验的要求如下：药理、毒理学方面：药材替代后，应当与原药品针对主要病症进行主要药效学和急性毒性的比较研究。减去毒性药材后，应当与原药品针对主要病症进行主要药效学的比较研究。,二、药理毒理技术要求与问题-分类,试验设计思路系统工程整体思路针对特点多学科合作,二、药理毒理技术要求与问题-设计思路,根据临床研究进程研究、申报I-II期临床：满足I期临床周期的急毒、亚急性、安全药理遗传毒性（部分生殖毒性）作用机制III期临床：支持III期临床研究周期的长期毒性继续II期开始的生殖毒性研究致癌研究（大、小鼠约3年的研究）作用机制,二、药理毒理技术要求与问题-设计思路,重视整体要求与相互衔接专业人员勤沟通信息共享不可少定期交流很必要资料汇总需贯通,委托试验,二、药理毒理技术要求与问题-设计思路,例：XX凝胶三个委托单位的剂量设计-给药剂量(?/?)-急毒-皮肤过敏1g/部位局部刺激1g/部位药效3.5714ug/cm2一般药理3570-ug/kg长毒70140-ug/kg药代714-ug/kg-,GLP的要求重视预试验-毒性大/范围窄借鉴已有的临床使用经验或文献资料长期毒性可分阶段申报,新药毒理研究的共性问题,二、药理毒理技术要求与问题-设计思路,工艺基本稳定(中试)、批号、来源原料、制剂、浸膏多数用药剂量/体积较大一种动物同药效试验啮齿/非啮齿类：大鼠、犬或猴等。理由充分，一种相关动物单一性别用药的考虑,受试药物,试验动物,二、药理毒理技术要求与问题-共性问题,药理毒理申报资料项目药理毒理申报技术要求药理毒理试验设计要点,二、药理毒理技术要求与问题,19、药理毒理研究资料综述。20、主要药效学试验资料及文献资料。21、一般药理研究的试验资料及文献资料。22、急性毒性试验资料及文献资料。23、长期毒性/依赖性试验资料及文献资料。24、过敏性（局部、全身和光敏毒性）、溶血性和局部（血管、皮肤、粘膜、肌肉等）刺激性等主要与局部、全身给药相关的特殊安全性试验研究和文献资料。25、遗传毒性试验资料及文献资料。26、生殖毒性试验资料及文献资料。27、致癌试验资料及文献资料。28、动物药代动力学试验资料及文献资料。,药理毒理研究申报资料项目,二、药理毒理技术要求与问题-申报项目,药理毒理试验设计要点与存在的问题,二、药理毒理技术要求与问题,前期的调研试验的先/后安排试验方案设计/论证,二、药理毒理研究的技术要求与问题-总体思路,总体思路,非临床概述,主要药效学,二、药理毒理技术要求与问题-主要药效,适应证功能主治治疗/辅助/预防,二、药理毒理研究的技术要求与问题-主要药效,首先明确,体内/外试验无动物模型抗肿瘤制剂,二、药理毒理研究的技术要求与问题-主要药效,特殊考虑,药物：配置、溶剂、浓度给药次数：结合疗效试验条件：剂量分组、途径、次数、特殊条件等动物模型：选择依据-自发/遗传模型、模型制作阳性对照：依据、来源结果：观察量效关系或ED50值小结：统计方法，结果分析、比较、得出初步结论（无效/有效剂量、量效关系、作用强度）,主要药效资料-体内药效,二、药理毒理技术要求与问题-主要药效,药物：有效成/组分配置（溶剂、PH、渗透压）、浓度培养或试验条件：温度、仪器、时间阳性对照药：来源、依据细胞（菌）株/系：来源、配置、浓度、复苏结果：分别求出IC50值、增殖生长曲线等无效/有效剂量/浓度、量效关系小结：方法学的确认。有效剂量，作用曲线和强度，与同类药的比较、结论,主要药效资料-体外药效,二、药理毒理技术要求与问题-主要药效,研究范围:体外/体内体外：细胞、分子、受体、基因等水平体内/在体：电生理、生化、器官、功能指标结论：结合试验或文献、结构、有效成分，分析活性作用部位和作用机制（肯定的或可能的）确切的作用机制对指导临床用药有重要意义,药物作用机制,二、药理毒理技术要求与问题-主要药效,评价体外/内试验主要结果预测可能提示的临床意义药物作用的起效和持续时间活性强度，量效关系有效剂量（IC50或ED50）等结果是否支持拟定的适应证或功能主治？作用机理研究能否确认？不能确认或有矛盾的试验结果处理？,主要药效资料最终评价,二、药理毒理技术要求与问题-主要药效,受试药物未确认工艺选择阳性对照药未说明依据方法学不清楚，文献依据不足动物模型选择针对性不强特殊溶媒未设对照,二、药理毒理技术要求与问题-主要药效,试验方案,非临床概述,药代动力学,二、药理毒理技术要求与问题-药代动力学,了解药物在体内的代谢和转运过程了解不同种属动物之间的差异解释药效和毒性作用为毒性试验的设计与结果的分析提供依据为临床研究设计提供参数评价药物有效、安全的重要组成部分之一,动物药代动力学研究的目的,二、药理毒理技术要求与问题-药代动力学,药代动力学的数学模型主要动力学参数：药-时曲线、药-时曲线下面积（AUC）、吸收速度（Ka）、最高血药浓度（Cmax）、达峰时间（Tmax）、半衰期（t1/2）、表观分布容积（V）、总清除率（CLs）、消除速度（Ke）等药物体内吸收、分布、代谢和排泄(ADME)特征蛋白结合或药物的相互影响口服制剂-生物利用度研究,药代动力学研究内容,二、药理毒理技术要求与问题-药代动力学,动物：要求啮齿类和非啮齿类两种动物，至少一种动物与药效、毒性试验一致尽量在清醒状态下试验口服给药不宜用兔等食草动物有些情况可考虑使用一种动物,考虑要点,二、药理毒理技术要求与问题-药代动力学,生物样品研究与分析的基本要求灵敏度：至少能检测出35个半衰期的血药浓度或能检测出Cmax的1/101/20浓度专一性：内源性物质和代谢物不应干扰样品测定能证明所测药物为原形药或其代谢产物精密度：日内和日间的变异系数（RSD10%）回收率：药物的生物样品回收率70%标准曲线：分别制备药物在血、尿、粪、胆汁及组织匀浆中的标准曲线，求出相关系数。生物样品的稳定性：样品的予处理、贮存、冻融影响等内源性的药物：注意内源性物质的干扰,二、药理毒理技术要求与问题-药代动力学,血浆蛋白结合率-药物血浆蛋白结合程度和量-效关系体外或体内给药后取样的体外方法动物和人的血浆蛋白结合试验至少设置3个浓度，每一浓度至少3次试验药物代谢的相互影响探讨药物对药物代谢酶的影响，如对细胞色素P450同工酶的诱导或抑制多种药物同时使用的药物间相互作用,二、药理毒理技术要求与问题-药代动力学,结果与分析方法学的确认提供数学模型和主要药代动力学参数、药代动力学试验中有关吸收,分布,代谢和排泄试验的研究结果对出现的矛盾结果，如出现高、中剂量的AUC重叠；不同动物或不同给药途径的参数相差较大的结果进行分析。对临床给药剂量、给药次数和间隔、给药途径等方案设计提出建议。,二、药理毒理技术要求与问题-药代动力学,非临床概述,一般药理学,二、药理毒理技术要求与问题-一般药理,属于安全性评价的一部分进入临床不可缺少的内容侧重观察重要的三大系统技术要求基本同药效研究,二、药理毒理技术要求与问题-一般药理,剂量设置：参考主要药效（体外/内）给药途径：拟临床途径或替代给药次数：一般一次动物：尽量用清醒动物,二、药理毒理技术要求与问题-一般药理,可考虑免做安全性药理药理作用较明确的局部用药，如皮肤、眼科（全身分布很少）细胞毒类的药物用于晚期癌症病人,ICH指南,二、药理毒理技术要求与问题-一般药理,剂量组设置少或设置过低观察时间短用替代途径未说明理由未提供具体测试数据麻醉动物出现指标的改变未解释分析讨论未注意某些指标的提示,一般药理存在问题,二、药理毒理技术要求与问题-一般药理,原则：结合药物特点选择合适的方法侧重毒性症状和发展过程的观察,二、药理毒理技术要求与问题-急毒,急性（单次给药）毒性,最大给药量-限量试验(5g/kg)上下法-LD50计算软件：/oppfead1/harmonization/LD50试验累积剂量法-非啮齿类固定剂量法-首选大鼠近似致死剂量法-非啮齿类最大耐受剂量试验,二、药理毒理技术要求与问题-急毒,用于毒性大的药物以动物死亡为终点ICH已经不提倡使用,LD50试验,二、药理毒理技术要求与问题-急毒,未设对照组给药容积过大未交代使用的统计方法未详细描述动物毒性反应表现毒性发生过程和转归,存在的问题,二、药理毒理技术要求与问题-急毒,二、药理毒理技术要求与问题-长毒,长期（重复给药）毒性,超过有效（临床）剂量数倍或数十倍以及临床周期3-4倍以上的毒性反应设法发现毒性反应剂量、剂量与毒性关系、中毒表现和程度、主要毒性靶器官或组织及可逆程度等预测临床研究可能的安全范围和毒性，预先制定防治措施或避免某些有特殊疾病患者的使用，减少临床可能的风险为临床试验初始剂量和指标的选择等提供重要参数,试验目的,二、药理毒理技术要求与问题-长毒,长毒通常始于药效、一般药理、急毒后了解功能主治、用药特点，合理设置方案明确治疗还是辅助治疗药物根据药物特点，考虑动物的选择比较毒理学-新剂型、改途径等,试验方案设计-基本原则,二、药理毒理技术要求与问题-长毒,结合药效和毒性研究数据兼顾临床使用情况参考药效有效剂量考虑药物毒性强弱做好前期的预试验尽量发现毒性剂量努力保证安全剂量,设计思路,二、药理毒理技术要求与问题-长毒,动物种类大鼠、犬或敏感动物。创新药2种，雌雄各半动物数量根据试验周期长短确定每组动物数。大鼠雌雄各10-30只；犬、猴雌、雄各3只毒性大、周期长应增加，并考虑恢复期数量原则：结束时：小动物每组数满足统计学要求大动物满足毒理学评价要求,试验方案设计,二、药理毒理技术要求与问题-长毒,给药时间与频率-临床给药周期的3-4倍。反复、长期或植入，按最长时间，即啮齿6月；非啮齿9月-连续给药、周期短-每天给药；1个月-6天/周-每天给药时间一致-不提倡采用掺食给药，除非证明稳定、均一,试验方案设计,二、药理毒理技术要求与问题-长毒,给药途经拟临床给药途径(创新药2种)替代途径给药容积不宜过大如给药体积大-2次/日,试验方案设计,二、药理毒理技术要求与问题-长毒,给药剂量一般设3个给药剂量组给药剂量间距根据毒性动态剂量调整-动物体重毒性大，安全范围窄-3组原则：高剂量-出现毒性和个别死亡（3月的，1/3动物检查中期主要指标发现异常增加检查次数,试验方案设计,二、药理毒理技术要求与问题-长毒,问题剂量设置不合理-仅考虑人用剂量，未考虑动物有效剂量-各组剂量偏低-毒性靶器官？-各组剂量偏高均出现毒性，安全范围？-剂距设计较宽/窄-安全范围？,二、药理毒理技术要求与问题-长毒,例XXX胶囊的长期毒性试验剂量设计-动物剂量（mg/kg）-主要药效学大鼠406080一般药理学大鼠4060-急性毒性小鼠412（LD50）长期毒性大鼠-6080-,二、药理毒理技术要求与问题-长毒,处方中含制川乌和制草乌等有毒药材、口服用药、酒剂主治:四肢麻木和风湿性关节炎药效：小/大鼠20、10、5ml/kg(g生药/kg?)急毒：小鼠LD5016.6g生药/kg-无任何毒性?长毒：大鼠20、10ml/kg1次/日X9周？无任何毒性?预试验：40ml/kg（83mg/kg）-全部死亡-酒精中毒-将乙醇挥发后使用,二、药理毒理技术要求与问题-长毒,特殊溶媒未设对照组给药途径与临床不一致给药方法未详细说明给药周期短观察指标未结合已有提示或缺乏针对性对关键的病理检查不重视，报告不详细对发现的改变无专业和科学分析与结论,二、药理毒理技术要求与问题-长毒,毒物代谢动力学（TK）试验考虑要点药物代谢动力学研究在毒理学研究中的延伸。评价药物的全身暴露（Exposure）状态结合于长期毒性试验，测定AUC、Cmax和Ct通过了解药物暴露时与毒性剂量和时间的关系：评价毒理学的发现和这些发现与临床安全的相关性；结合毒性发现，为进一步的临床前毒性试验设计提供信息；评价动物的耐受量，有助于解释不同动物种类、剂量和性别之间毒性的差异。,试验方案设计,二、药理毒理技术要求与问题-毒代,二、药理毒理技术要求与问题-遗传毒性,遗传毒性,应报送遗传毒性试验：处方中含有无法定标准的药材，或来源于无法定标准药材的有效部位用于育龄人群并可能对生殖系统产生影响的新药，如避孕药、性激素、治疗性功能障碍药、促精子生成药、保胎药或有细胞毒作用等,二、药理毒理技术要求与问题-遗传毒性,遗传毒性研究机体遗传物质受外源性化学物质或其它环境因素作用时对有机体产生的遗传毒性作用试验包括体外和体内检测系统。两者应结合进行研究体外：细菌回复突变、微核试验、哺乳动物细胞染色体畸变等体内：骨髓微核、显性致死试验等,二、药理毒理技术要求与问题-遗传毒性,需注意的问题：1、可疑遗传毒性的药物应进行研究2、体外试验不适用于中药粗制剂-隐性致死试验和显性致死试验3、给药高剂量-最大耐受量,二、药理毒理技术要求与问题-遗传毒性,二、药理毒理技术要求与问题-生殖毒性,生殖毒性,生殖毒性试验评价对哺乳动物生殖的影响，推测对人可能的生殖毒性研究分为三段I段（一般生殖毒性）：对成年动物生育力和早期胚胎发育、对配子成熟，交配行为、受孕、胚胎着床前和着床的影响II段（致畸敏感期毒性）：妊娠动物在胚胎器官形成期给药，评价对亲体、胚胎、胎仔发育影响III段（围产期毒性）：胎仔出生前后发育和孕鼠从妊娠后期至断奶期间给药对妊娠、分娩、哺乳、胚胎、胎仔发育的影响。,二、药理毒理技术要求与问题-生殖毒性,应根据具体情况提供生殖毒性研究：用于育龄人群并可能对生殖系统产生影响的新药，如避孕药、性激素、治疗性功能障碍药、促精子生成药、保胎药或有细胞毒作用等,二、药理毒理技术要求与问题-生殖毒性,基本思路：根据用药次数、功能主治和拟用人群，决定是否进行试验创新药一般可在申报临床研究前先提供I和II段试验对于可能只给药一次的，重复给药可不要求。可在较高剂量下缩短给药期。,二、药理毒理技术要求与问题-生殖毒性,二、药理毒理技术要求与问题-致癌性,致癌试验,必须提供致癌试验新药在长期毒性试验中发现有细胞毒作用或者对某些脏器组织生长有异常促进作用致突变试验结果为阳性的，致癌试验资料及文献资料。,二、药理毒理技术要求与问题-致癌性,抗肿瘤药物是否进行该试验：-用药人群生存期较短（23年）不要求-如用于晚期全身治疗一般不要求当疗效较好，能明显延长生命，应考虑有关继发性肿瘤-要求,二、药理毒理技术要求与问题-致癌性,二、药理毒理技术要求与问题-其他毒性,其他毒性试验,其它毒性试验-静脉给药、肌肉刺激性、过敏性、溶血试验-皮下、粘膜注射刺激性、过敏性试验-皮肤外用刺激性、过敏性试验必要时：光敏毒性、局部吸收试验-具有依赖性倾向的新药药物依赖性试验,二、药理毒理技术要求与问题-其它毒性,经皮给药豚鼠最大化试验（GPMT）Buehler试验（BT）注射给药全身主动过敏试验（ASA）皮肤被动过敏试验（PCA）吸入给药豚鼠吸入诱导和刺激试验,过敏性试验,二、药理毒理技术要求与问题-过敏性试验,体外溶血试验体内溶血试验,溶血试验,二、药理毒理技术要求与问题-溶血试验,应注意的问题单独进行刺激试验考虑用药次数，结果的分析注意浓度/速度与刺激反应的关系出现阳性结果应分析或增加试验外用药物应叙述配置和试验条件,二、药理毒理技术要求与问题-问题,应注意的问题过敏试验应结合其他毒性的发现分析：流涎、抽搐、软瘫等重视临床可能的药物相互作用（溶血、过敏）溶血试验：3批制剂,二、药理毒理技术要求与问题-问题,非临床概述,依赖性试验,二、药理毒理技术要求与问题-依赖性,药物依赖性试验资料具有精神神经作用的药物需要提供身体依赖性试验镇痛药镇静催眠药催促试验诱导试验自然戒断试验或替代试验精神依赖性试验,二、药理毒理技术要求与问题-依赖性,三、药理毒理评价,三、药理毒理评价,多大剂量/暴露量在动物上产生/未产生毒性作用？所用的相关动物或模型能否预示人体毒性？毒性反应的时间、表现和持续时间？单次和多次给药的作用是否不同？毒性反