实验一一叶荻碱的提取与鉴定

实验一：一叶萩碱的提取与鉴定一、实验目的、要求、原理：（l）目的：通过一叶萩碱的提取分离，掌握用离子交换树脂法提取分离生物碱的原理和方法。（2）要求：分离得到纯一叶萩碱，加以鉴定。（3）原理：ALK+H+/H2O ALKH+ RSO3-H+ALKH+ RSO3-ALKH+H+洗脱：吸碱树脂用NH4+OH-碱化后，反应如下：RSO3-ALKH+NH4+OH- RSO3-NH4+ALK（游离生物碱）+ H2O二、一叶获简介大戟科植物一叶萩（Securinega suffruticosa ( Pall ) Rehd）也称叶底珠，别名狗杏条等，我国资源十分丰富。其根、叶和嫩枝中均含有多种生物碱，结构已经清楚的有十几种。其中一叶萩碱含量高，已用于临床。该生物碱于1956年首先由苏联学者分离得到。1962 年完全确定了它的化学结构。我国在一叶萩碱的研究方面作出较大贡献，于1962年自国产的一叶萩中用活性炭吸附法提取分离一叶萩碱，并测定了它的化学结构。一叶萩碱的化学结构一叶碱获和它的衍生物能兴奋中枢 X 神经，增强心肌收缩、升高血压，临床用硝酸一叶获碱治疗面神经麻痹，小儿麻痹骸神经炎和股外侧神经炎感染引起的多发性神经炎，成为神经科疾患的常用药物。一叶获碱为淡黄色棱状晶体，难溶于水，易溶于醇、氯仿、较难溶于石油醚，一叶萩碱是一由不饱和内酯环和一个环已烯及一个吡咯啶并合而成的叔胺碱；分子中具有共扼双键，氮原子的孤对电子恰好处于键之上，因而可与兀电子发生干扰，从而“延伸”了共辘体系，产生了“跨环共辘”。一叶获碱与酸生成盐后则为无色，旋光度降低、表明 N 原子上电子与质子不能再参予“跨环共扼”。一叶萩 N 中原子三价都结在环中，有一定程度的碱性（Pka=7.2），因而具有生物碱的一般通性；能与生物碱沉淀试剂产生沉淀反应，亦可与显色剂反应。从一叶萩叶中提取生物碱可采用溶剂法、活性炭吸附法和离子交换法。三、实验操作及注意事项（一）操作注意事项：1 装渗滚筒：渗流筒底部，放一块脱脂棉（先用水湿润）然后将润湿过的药料分次加入，分层填压，顶部盖一张滤纸压上洁净的鹅卵石。2 树脂处理：取新树脂（已用水膨胀过的）置烧杯中，用五倍量的 67 % HCI 浸泡过夜，先用离子水洗至 pH34 ，改用蒸馏水洗至中性，再用 5 % NaOH （约 2 倍）搅拌洗涤后，水洗至中性，最后用 67 % HCl转型，蒸馏水洗至近中性。 3 装树脂柱用蒸馏水将已处理好的树脂悬浮起来加到底部垫有脱脂棉的交换柱中，等树脂颗粒下沉后，其上复盖一层棉花或一张滤纸，以免加入液体时，冲破树脂表面，注意在整个操作过程中树脂的上部是要覆盖少量液体，以免进入空气，影响交换效果，将树脂柱表层多余液体由底部活塞放出，待液层降至树脂层表面时，关闭活塞，由柱的上部加入含一叶萩碱的酸水，打开底部活夹。控制流速（二）生物碱的定性试验1 取渗漉液 lml ，加硅钨酸试剂数滴，产生淡黄色沉淀。2 取渗漉液 lml ，加碘碘化钾 T . S 数滴，产生棕褐色沉淀。3 取渗漉液 lml ，加碘化钾秘 T . S 数滴，产生棕红色沉淀。（三）鉴定1原理：吸附层析2TLC：吸附剂：Al2O3（中性）展开剂： aCHC13 b石油醚：CHC13=1cCHC13：EtOH=9：1样品：一叶萩碱/CHC13液标准品：一叶萩碱/CHC13液显色剂：碘化秘钾：EtOH= 9：13 显微溶点