医院消毒灭菌

医院消毒灭菌效果及环境卫生学检测,安徽医科大学第四附属医院医务科院感办,张世梅,医院消毒、灭菌、无菌技术是预防医院内感染的重要措施之一，消毒灭菌效果的监测是评价其消毒灭菌设备运转是否正常，消毒药剂是否有效、消毒灭菌方法是否合理、消毒灭菌效果是否达标的唯一手段。,规范性文件、卫生标准,卫生部消毒技术规范卫生部医院感染管理办法卫生部内镜清洁消毒技术操作规范GB15982-1995医院消毒卫生标准卫生部医院消毒供应室验收标准,规范性文件、卫生标准,GB15981-1995消毒与灭菌效果的评价方法与标准卫生部医务人员手卫生规范2009-04-01发布2009-12-01实施卫生部医院感染监测规范2009-04-01发布2009-12-01实施,规范性文件、卫生标准,卫生部医院感染监测规范2009-04-01发布2009-12-01实施卫生部医院隔离技术规范2009-04-01发布2009-12-01实施卫生部医院隔离技术规范2009-04-01发布2009-12-01实施,规范性文件、卫生标准,卫生部医疗机构消毒技术规范2012-04-05发布2012-08-01实施卫生部医院空气净化管理规范2012-04-05发布2012-08-01实施.,检 测 项 目,（一）环境卫生学监测 1、空气消毒效果监测 2、医护人员手卫生效果监测 3、物体表面消毒效果监测,检 测 项 目,（二）消毒灭菌效果监测 1、使用中无菌物品监测 2、使用中消毒剂及灭菌剂染菌量监测 3、压力蒸汽灭菌监测 4、干热灭菌监测,检 测 项 目,5、低温灭菌监测 6、紫外线消毒灯管辐照强度测定 7、内镜消毒灭菌效果监测 8、血液透析系统监测 9、口腔诊疗器械消毒与灭菌效果监测,检 测 单 的 填 写,采样地点（医院、科室）样品名称检验目的送检时间送检者,检 测 单 的 填 写,空 气 消 毒 效 果 监 测,监测科室：手术室、血液病房、ICU、感染疾病科、导管室、消毒供应室、输血科、微生物实验室、产房、母婴同室、新生儿病房、内镜中心、血液透析中心、口腔科、治疗室、换药室等部门的空气净化与消毒质量进行监测。,空 气 消 毒 效 果 监 测,1、监测频次：每季度进行；洁净手术室、洁净病房每月进行。新建与改建验收时以及更换高效过滤器后应进行监测；与医院感染暴发空气污染有关时随时进行检测，并进行相应致病性微生物的检测。2、采样：（1）采样时间：在清洁消毒处理后，操作前。,空 气 消 毒 效 果 监 测,（2）采样方法：（平板暴露法）：暴露前先检查平板是否污染，是否有气泡及霉点。将普通营养琼脂平板（直径为9cm）放在室内各采样点处（由内向外），采样高度为距离地面1.5m，距墙1.0m，采样时将平板盖打开（由内向外），斜扣放于平板旁，暴露5分钟，（手术室、产房、血液病房、ICU、导管室、新生儿病房暴露15分钟）盖好立即送检。在放置、收取（由外向内）平皿时，手不可在暴露平皿的正上方移动。,空 气 消 毒 效 果 监 测,（3）布点方法：室内面积30m2，设内、中、外对角线上3点，内、外点布点部位距墙1m；室内面积30 m2，设4角及中央共5点，4角的布点部位距墙壁1m处。,空 气 消 毒 效 果 监 测,图1 图2室内面积30m2 布点图 室内面积30m2 布点图,空 气 消 毒 效 果 监 测,3、注意事项（1）采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止10分钟进行采样。（2）平板摆样如取一条对角线，避免离门近的一条。（3）工作人员不要靠近自动门，以免影响监测效果。,空 气 消 毒 效 果 监 测,4、 结果计算及判定（1）结果计算 平板暴露法结果计算公式： 空气菌落总数（cfum3）=50000N（AT） 式中A为平均面积（cm2）；T为平板暴露时间（min）；N为平均菌落总数（cfu）。,空 气 消 毒 效 果 监 测, 浮游菌法计算公式： 空气菌落总数（cfum3）采样器各平皿菌落数之和（CFU）采样速率L min采样时间（min）1000,空 气 消 毒 效 果 监 测,（2） 结果判断： 洁净手术室、洁净病房空气中的细菌菌落总数10 cfum3（按老的办法采样计算的），未检出金黄色葡萄球菌，溶血性链球菌。,空 气 消 毒 效 果 监 测, 手术室、产房、血液病房、ICU、导管室、新生儿病房等空气中的细菌菌落总数4cfumin(15min.直径9cm平皿)，未检出金黄色葡萄球菌，溶血性链球菌。,空 气 消 毒 效 果 监 测, 感染疾病科、消毒供应室、输血科、化验室、妇产科检查室、人流室、母婴同室、内镜中心、血液透析中心、口腔科、治疗室、换药室、急诊室、注射室、各类普通病房空气中的细菌菌落总数4cfumin(5min.直径9cm平皿)，未检出金黄色葡萄球菌，溶血性链球菌。,医护人员手卫生效果监测,监测高危重点科室：洁净手术室、洁净病房、非洁净手术室、血液病房、ICU、感染疾病科、导管室、消毒供应室、输血科、微生物实验室、产房、母婴同室、新生儿病房、内镜中心、血液透析中心、口腔科、治疗室、换药室等工作的医务人员手进行消毒效果监测；当怀疑医院感染暴发与医务人员手卫生有关时，应及时进行检测，并进行相应致病性微生物的检测。,医护人员手卫生效果监测,1、检测频率：（1）每季度进行；洁净手术室、洁净病房每月进行。有行业标准规定按标准执行：如血液透析中心。（2）有医院感染流行，怀疑与手卫生或医院环境卫生学因素有关时应及时进行监测。,医护人员手卫生效果监测,2、采样时间 在手卫生后，接触患者、进行诊活动前采样。,医护人员手卫生效果监测,3、采样方法：被检人五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子在双手指曲面从指根到指端往返涂擦2次（一只手涂擦面积约30 cm2），并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，及时送检。,医护人员卫生效果监测,4、检测方法：将采样管在混匀器上振荡20秒或用力振打80次，用无菌吸管吸取1.0ml待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿，平皿内加入已溶化的45C-48C的营养琼脂15ml-18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置36C1C恒温箱培养48h，计数菌落数。,医护人员手卫生效果监测,5、结果计算及判断（1）细菌菌落数计算方法：细菌菌落总数（cfucm2）平皿上菌落数采样稀释倍数采样面积（cm2） 采样液的稀释倍数为10，采样面积为302 cm2。,医护人员手卫生效监测,（2）判断标准：一般医护人员手不得检出大肠杆菌、金黄色葡萄球菌；类、类坏境工作人员手不得检出铜绿假单胞菌；母婴同室、新生儿室及儿科病房工作人员手不得检出沙门氏菌、溶血性链球菌。,医护人员手卫生效监测,卫生手消毒细菌菌落总数10 cfucm2 ，不得检出致病菌 。 外科手消毒细菌菌落总数5 cfucm2，不得检出致病菌。,医护员手卫生效果监测,类环境：层流洁净手术室和层流洁净病房。类坏境：普通手术室、产房、特护婴儿室、普通保护性隔离病房、ICU、供应室无菌区。,医护员手卫生效果监测,类坏境：儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、抢救室、化验室、各类普通病房。,医护人员手卫生效果监测,6、 注意事项（1）若消毒因子为化学消毒剂，采 样液中应加入相应中和剂。（2）洗手后不要接触未消毒的物品。（3）用无菌巾擦干或控干手上的水 分。,物体表面消毒效果监测,1、 监测频次（1）每季度进行；洁净手术室、洁净病房每月进行。（2） 怀疑与医院感染暴发流行有关时应及时进行监测。2、采样时间：在消毒处理后或怀疑与医院感染暴发有关时进行采样。,物体表面消毒效果监测,3、采样方法：用5cm5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，连续采样4个，采样面积100 cm2，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1支在规格板内横竖往返均匀涂擦5次，并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。,物体表面消毒效果监测,4、注意事项：（1）被采样本面积100 cm2取全部表面；被采样本面积100 cm2，取100cm2。（2）不规则物体表面的采样，尽量准确估算实际面积。（3）小型物体表面的结果计算，用cfu件表示。,物体表面消毒效果监测,5、 检测方法：充分振荡采样试管后，取不同稀释倍数的洗脱液1.0ml接种平皿，将冷至40 C -45 C的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15ml-20ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置36C1C恒温箱培养48h，计数菌落数。怀疑与医院感染暴发流行有关时应及时，进行目标微生物的检测。,物体表面消毒效果监测,6、结果计算及判断（1）物体表面细菌菌落数计算方法：物体表面细菌菌落总数（cfucm2）平均每皿菌落数洗脱液稀释倍数采样面积（cm2）,物体表面消毒效果监测,(2) 结果判断：类环境、类环境物体表面细菌菌落总数5 cfucm2；类环境物体表面细菌菌落总数10 cfucm2，类环境不得检出致病菌 。,使用中的无菌物品监测,1、采样时间：在灭菌处理后，存放有效期内采样。 2、监测频次：每月进行。,使用中的无菌物品监测,3、采样方法：用沾有无菌洗脱液的棉拭子反复涂擦钳、镊子等无菌器械，将棉拭子投入无菌洗脱液中，将采样液混匀。（环境要求在洁净度为100级单向流空气区域进行采样，并严格无菌操作，避免微生物污染）。,使用中的无菌物品监测,4、检测方法：相对较复杂，正规要做细菌和真菌两种培养。常规只做细菌培养。5、 注意事项（1）送检时间不得超过6h，若样本保存于0 C-4 C，则不得超过24h。,使用中的无菌物品监测,（2）无菌物品采样，应严格遵守无菌操作，避免微生物污染。 6、结果判断：未检出任何微生物为合格。,使用中的消毒剂、灭菌剂监测,1、监测时间（1）化学检测：根据消毒剂、灭菌剂的性能设定监测时间，如含氯消毒剂每日监测；使用中的戊二醛常规监测每周不少于一次（使用前），内镜室消毒或灭菌的戊二醛必须每日或使用前监测。（2）生物监测：消毒剂每季度一次，灭菌剂每月一次。,使用中的消毒剂、灭菌剂监测,2、使用中消毒液染菌量测定 （1）检测物品：酒精、碘酒、碘伏、戊二醛、次氯酸、外科手消毒剂等。,使用中的消毒剂、灭菌剂监测,（2）采样方法 (1) 用无菌吸管按无菌操作方法吸取消毒液1.0ml被检消毒液，加入9.0ml含有相应中和剂中混匀。醇类与酚类消毒剂用普通营养肉汤中和，含氯消毒剂、含碘消毒剂和过氧化物消毒剂用含0.1%硫代硫酸钠中和剂，,使用中的消毒剂、灭菌剂监测,洗必泰、季铵盐类消毒剂用含0.3%吐温80和0.3%卵凝脂中和剂，醛类消毒剂用含0.3%甘氨酸中和剂，含有表面活性剂的各种复方消毒剂可在中和剂中加入吐温80至3%；也可使用该消毒剂消毒效果检测的中和剂鉴定试验确定的中和剂。,使用中的消毒剂、灭菌剂监测,(2)用无菌吸管吸取一定稀释比例的中和混合液1.0ml接种平皿，将冷至40 C-50 C的溶化营养琼脂培养基，每皿倾注15ml-20ml，36C1C恒温箱培养72h，计数菌落数；怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测。,使用中的消毒剂、灭菌剂监测,（3）结果计算及判断 结果计算： 消毒液染菌量（cfuml）=平均每皿菌落数10稀释倍数 结果判断：使用中灭菌用消毒液无菌生长。使用中皮肤黏膜消毒液染菌量10cfuml；其他使用中消毒液染菌量100cfuml。,压力蒸汽灭菌效果监测,1、物理监测法：每次灭菌连续监测每锅并详细记录灭菌的压力、强度（波动范围在+3 C内）、时间等灭菌参数。 2 、化学监测法：每包进行外用化学指示物监测（包外、包内），观察颜色变化，判断结果。高度危险性物品包内应放置包内化学指示物，置于最难灭菌部位。,压力蒸汽灭菌效果监测,3、生物监测法：每周进行，对新灭菌器使用前或拟采用新包装容器、摆放方式、排气方式及特殊灭菌工艺，都必须进行生物监测。采用嗜热脂肪芽胞菌片制成的标准生物测试包（23cm23cm15cm）。 4、B-D测试：预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌器，每日进行一次B-D试验。,5、灭菌器新安装、移动和大修后监测：应进行物理、化学、生物监测。物理、化学监测通过后，生物监测应空载连续监测三次，合格后灭菌器方可使用。预真空（包括脉动真空）压力蒸汽灭菌器应进行B-D试验并重复三次，连续监测合格后，灭菌器方可使用。,压力蒸汽灭菌效果监测,干 热 灭 菌 监 测,1、物理监测法：每灭菌批次进行监测。将多点温度检测仪的多个探头分别放于灭菌器各层内、中、外各点，关好柜门，引出导线，由记录仪中观察温度上升与持续时间。温度在设定时间内均达到预置温度，则物理检测合格。,干 热 灭 菌 监 测,2、 化学监测法：每一灭菌包外使用化学指示物监测（包外、包内），并置于最难灭菌部位，观察颜色变化，判断结果。 3、生物监测法：每周监测一次。采用枯草菌黑色变种芽孢菌片制成的标准生物测试包。 4、新安装、移位和大修后：应进行物理、化学、生物监测法监测（重复三次），监测合格后无菌器方可使用。,低 温 灭 菌 监 测,1、 环氧乙烷气体灭菌效果监测（1）物理监测法：每次灭菌应连续监测并记录灭菌时的温度、压力、时间等灭菌参数，符合要求。,（2）化学监测法：每包进行外用化学指示物监测（包外、包内），并置于最难灭菌部位，观察颜色变化，判断结果。（3）生物监测法：每灭菌批次应生物监测。采用枯草菌黑色变种芽孢菌片制成的标准生物测试包。,1、 环氧乙烷气体灭菌效果监测,低 温 灭 菌 监 测,2、过氧化氢等离子灭菌效果监测（1）物理监测法：每次灭菌应连续监测并记录每个灭菌周期的临界参数如舱内压、温度、过氧化氢的浓度，电源输入和灭菌时间等灭菌参数，符合要求。,2、过氧化氢等离子灭菌效果监测,（2）化学监测法：每包进行外用化学指示物监测（包外、包内），并置于最难灭菌部位，观察颜色变化，判断结果。（3）生物监测法：应每天至少进行一次灭菌循环的生物监测。,3、 新安装、移位和大修后，灭菌失败，包装材料或灭菌物品改变：应进行物理、化学、生物监测法监测（重复三次），监测合格后无菌器方可使用。,低 温 灭 菌 监 测,紫外线消毒灯管监测,1、 检测项目（1）日常监测：包括灯管应用时间，累计照射时间、灯管清洁和使用人签名。（2）强度检测：每半年一次。,紫外线消毒灯管监测,2、紫外线灯辐照度值检测方法（1）紫外线强度照射指示卡检测法： 开启紫外线灯5min后，将指示卡置紫外灯下垂直距离1m处，有图案一面朝上，照射1min（紫外线照射后，图案正中光敏色块由乳白色变成不同程度的淡紫色），观察指示卡色块的颜色，将其与标准色块比较，读出照射强度。,紫外线消毒灯管监测,（2）紫外线辐照计测定法：将紫外线辐照计探头置于被检紫外线灯垂直距离1m的中央处，开启紫外线灯5min后，待仪表稳定后，所示数据即为该紫外线灯的辐照度值。,紫外线消毒灯管监测,3、注意事项（1）紫外线灯管开启后稳定5min后，读测试数值。（2）紫外线辐照计必须在计量部门检定的有效期内使用（要求一年校准一次）。,紫外线消毒灯管监测,（3）辐照计探头放于灯管中央部位，仪器探头与拉杆保持垂直。（4）测定电压220V5V，温度20-25 C，相对湿度60%，紫外线灯管每周无水酒精保洁一次。,紫外线消毒灯管监测,（5）紫外线指示卡照射强度以当时判断为准，随保存时间延长色块颜色会变淡。指示卡应获得卫生许可批件，并在有效期内使用。（6）测试人员勿直视紫外线灯管，应穿防护衣，带白纱手套，防护眼镜。,紫外线消毒灯管监测,4、结果判断：30W普通石英新灯管辐照度强不低于90uWcm2为合格；使用中旧灯管辐照强度不低于70uWcm2为合格；30W高强度紫外线新灯管辐照强度180uWcm2为合格。,内镜消毒灭菌效果监测,1、监测时间：消毒后内镜每季度进行；灭菌后内镜每月进行。2、采样（1）采样时间：在消毒灭菌后，使用前进行采样。,内镜消毒灭菌效果监测,（2）采样方法：监测采样部位为内镜的内腔面。用20ml无菌注射器抽取10ml含相应中和剂的缓冲剂，从待检内镜活检口注入，用15ml无菌试管从活检出口收集，及时送检，2h内检测。,内镜消毒灭菌效果监测,3、结果判定及报告（1）消毒后内镜：细菌总数20cfu件，并未检出致病菌为合格（致病菌：金黄色葡萄球菌、沙门氏菌，并不得检出大肠杆菌）。（2）灭菌