第十九章中药及其制剂分析概论

.,第十九章中药及其制剂分析概论,返回主目录,第一节概述第二节中药的鉴别第三节中药的检查项目于内容第四节中药及制剂中成分的含量测定和质量整体控制第五节中药的体内分析及代谢组学研究,.,第一节概述,一、中药的特色与分析特点和对策（一）中药及其制剂定义1中药：以中医药学理论体系的术语表述其性能、功效和使用规律，并且只有当按中医药学理论指导其临床应用的传统药物，才可称之谓中药。2中药制剂（中成药）：用中药为原料，按中医药学理论谴药、配伍和组方，以一定制备工艺和方法制成一定剂型的药物制剂。,.,（二）中药及其制剂的质量标准1现状：ChP2010已收载中药品种2165种，比ChP2005多了1019种。中药及其制剂的质量控制主要包括鉴别、检查和含量测定。2进展：如何确定中药制剂质量评价的指标是关键问题。只有在天然药物化学、药理学、药剂学、药物分析以及临床和基础医学等方面进行深入的研究，探明中药制剂的作用机理、主要成分及相互的作用关系后，才能评价其质量的客观指标，制定出比较完善的质量标准。,.,(三）中药制剂分析的特点由于中药制剂的组成十分复杂，因此给分析测试带来一定困难，中药制剂分析的样品一般需要经过提取、纯化等预处理过程，以排除干扰组分的干扰。但过于繁琐预处理不宜作为药品常规检验的方法。中药制剂中有效成分的含量一般较低，因此要求方法有较高的灵敏度。,.,二、中药及其制剂的分类与质量分析要点1分类中药材及其炮制品液体制剂：合剂与口服液、酒剂和酊剂、注射剂半固体制剂：煎膏剂、浸膏剂和流浸膏剂固体制剂：丸剂、散剂、颗粒剂、片剂胶囊剂,.,2质量分析要点注射剂：为了确保中药注射剂的质量稳定、可控，中药注射剂在固体中药材品种、产地和采收期的前提下，需制订中药材、有效部位或中间体、注射剂的指纹图谱。HPLC色谱指纹图谱GC中药指纹图谱光谱指纹图谱TLC脱氧核糖核酸指纹图谱。,.,三、中药分析用样品制备方法提取分离与纯化方法1萃取法2冷浸法3回流提取法4连续回流提取法：使用索氏提取器连续进行提取，提取效率高。5水蒸气蒸馏法：适用于挥发性组分的提取。组分对热应稳定。,.,6超声提取法：超声波具有助溶作用，提取较冷浸法速度快，一般仅需数十分钟浸出即可达到平衡。由于超声提取过程中溶剂可能会有一定的损失，所以用作含量测定时，应于超声振荡前先称定重量，提取完毕后，放冷至室温，再称重，并补足减失的重量，滤过后，取续滤液备用。用于药材粉末的提取时，由于组分是由细胞内逐步扩散出来，速度较慢，加溶剂后宜先放置一段时间，再超声振荡提取。,.,7超临界流体萃取法1）超临界流体：是指当压力和温度物质的临界点时，所形成的单一相态。常用的超临界流体物质临界温度临界压力优点（）（KPa）CO2317390较低的临界温度、惰性、无毒、纯净、价廉N2O367290NH313211300,.,2）超临界流体特点：具有与液体相似的密度：具有与液体相似的较强的溶解能力；溶质在其中扩散系数与气体相似：具有传质快，提取时间短的优点，提取完全一般仅需数十分钟；表面张力为零：很容易渗透到样品的里面，带走测定组分；选择性强：通过改变萃取的条件，如温度、压力等，可以选择性的萃取某些组分；在通常状态下即成为气体：萃取后溶剂立即变为气体而逸出，容易达到浓集的目的。,.,装置,.,影响因素：压力、温度、改性剂、提取时间温度：恒压下温度升高，可提高萃取效率压力：恒温下提高压力，有利于极性组分和高分子量组分的提取；压力降低，有利于非极性组分的提取。改性剂：甲醇、氯仿,.,第二节中药的鉴别鉴别试验的重要性：中药及其制剂的鉴别可以通过确认其中所含药味的存在或某些特征成分的检出而达到鉴别的目的。目前部分中药尚无含量测定项目，因此，鉴别就成为中药制剂质量控制的一个非常重要的环节。,.,性状鉴别：形状、大小、色泽、表面特征、质地、折断面特征以及气味显微鉴别：指用显微镜对药材切片、粉末、解离组织或表面制片及含饮片粉末的制剂中饮片的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别的一种方法。,鉴别方法,.,光学显微镜或电子显微镜鉴别：该法通常在下列情况中应用：药材及炮制品的外形鉴别特征不明显或外形相似难于鉴别而组织构造不同时；药材破碎或呈粉末不易用肉眼辨认或区分时；含原药材粉末的中药制剂；处方中主要药味及化学成分不清楚或尚无化学鉴别法。注：处方中多味药物共同具有的显微特征不能作为鉴别特征。多来源药材应选择其共有的显微特征。,.,显微化学反应鉴别法：一般可取药材切片或粉末，中成药取粉末，置载玻片上，滴加各种试剂，加盖玻片，在显微镜下观察产生的结晶、沉淀物，以及特殊的颜色变化，作为鉴别特征。该法可以确定基础品种中特殊化学成分的存在及在组织中的分布。,.,例：黄连：纤维素鲜黄色左金丸均含石细胞：不能采用吴茱萸：腺毛例：黄连粉末+水+稀盐酸黄色结晶槟榔粉末+水+稀盐酸,滤液+碘化铋钾,浑浊,显微观察：红石榴球形或方形结晶,振摇,微热,过滤,载玻片上,18,.,理化法鉴别：微量升华法荧光与光谱鉴别法颜色反应及沉淀反应鉴色谱鉴别：纸色谱法毛细管分析法TLC、GC、HPLC,.,TLC法薄层板：最多的是硅胶G板，也可另加0.2%0.5%的CMC作为黏合剂，可用软铝笔在板上做标记；能经受一般的化学试剂处理，如用含浓硫酸的显色剂处理后，可将酸在水中洗去，然后烘干保存。一般通用的展开剂：无水乙醇-苯（1：4）苯-氯仿（1：3）丙酮-甲醇（1：1）显色方法：紫外灯下观察荧光斑点选用显色剂,.,供试品溶液的制备：一份：+盐酸至pH3样品粉末滤液+乙醚一份：+碳酸钠至pH11,提取液,残渣+乙醇,供试品溶液,粉碎,水,煮沸,过滤,回收乙醚,溶解,.,一、杂质检查杂质检查项目：水分、灰分、酸不溶性灰分、砷盐、重金属、农药残留量、浸出物、挥发油、总氮测定等。二水分检查法中国药典（2010年版一部）附录收载以下四种方法：烘干法甲苯法（69.3共沸）减压干燥法GC法。,第三节中药的检查项目与内容,.,三总灰分和酸不溶性灰分测定法总灰分：是指药材或制剂经加热炽灼灰化遗留的无机物，包括药物本身所含无机盐（称为生理灰分）、泥土、砂石等药材外表黏附的无机杂质。酸不溶性灰分：主要是外来杂质，如泥土、砂石总灰分+稀盐酸,残渣滤纸,残渣：外来杂质,水浴,过滤,水洗滤纸,炽灼,恒重,碳酸盐生理灰分溶解，而泥砂（硅酸盐）不溶,.,四重金属及有害元素测定方法与化学合成药物不同的是，检查前必须对样品进行有机破坏，破坏方法有干法和湿法两种。重金属检查方法：二硫腙比色法原子吸收分光光度法砷盐检查方法：古蔡法Ag-DDC法原子吸收分光光度法,.,五农药残留量测定方法农药的来源常用的农药：有机氯类：艾氏剂、氯丹、六六六等有机磷类：三硫磷、氯硫磷、蝇毒磷等检查原则：农药不明的样品测定总氯量、总磷量，已知农药的样品可采用GC法测定某个农药的量。总氯量的测定样品细粉+乙腈-水滤液+石油醚萃取液（65:35）,搅拌,过滤,萃取,浓缩,氧瓶燃烧,吸收液：硫氰酸铵比色法,.,GC测定取样萃取农药柱纯化GC测定测定有机氯时，使用电子捕获检测器（ECD）；测定有机磷时，使用火焰光度检测器（FPD）。,上法得的石油醚萃取液,总磷量的测定,洗脱液,吸收液：磷钼酸比色法,柱层析,浓缩,氧瓶燃烧,26,.,第四节中药制剂中成分的含量测定和质量整体控制,一、中药及制剂中化学成分的含量测定（一）指标成分选择的原则1.复方制剂应首选君药及贵重药，所含化学药品必须测定2.有毒药物必须测定3.应选择专属性强的有效成分测定,27,.,4、测定成分尽量与中医理论、用药功能接近5、测定成分需要考虑与生产工艺的关系6、测定成分应归属于某单一药味7、若确实无法进行含量测定的。可测定药物的总固体量,28,.,（二）中药及其制剂化学成分含量测定的主要方法1.高效液相色谱法2.气相色谱法3.薄层色谱扫描法：指用一定波长的光照射在薄层板上，对薄层色谱中吸收紫外光和可见光的斑点，或经激发后能发射出荧光的斑点进行扫描，将扫描得到的图谱及积分数据用于鉴别、检查或含量测定的一种方法。,29,.,1）对色谱条件的要求：选择性好，组分能完全分离，斑点对称、均匀、不拖尾。2)测量方法：多使用反射法。,.,3）扫描方式：单波长双波长测定波长选在被测组分的最大吸收波长，参比波长选在组分无吸收的位置上，若背景有均匀污染时，可选择背景光谱中与测定波长的等吸收处。,.,4）散射参数SX：由于薄层板对光的散射，其吸收度和浓度之间的关系不服从比尔定律，二者不呈直线，但符合K-M方程，可以进行校正，使其成为直线。薄层扫描仪均装有线性化器，测定时需输入SX值，因为吸收度-浓度曲线的形状与SX值有关。,.,5）定量方法：外标法若曲线经过原点，可用一点法校正；若曲线不经过原点，用二点法校正；必要时，可采用多点法校正。内标法将内标加入供试液中，以组分与内标峰面积比值作为定量依据。,33,.,（三）中药及其制剂的多指标成分含量测定中药及其制剂中含有众多成分，仅以单一成分作为质量控制的指标不能全面地反映药材质量，更不能保证药效，为了力求客观全面反映中药及其制剂的质量需要选择多指标成份进行含量测定。,34,.,（四）中药一测多评的含量测定一测多评法：仅测定1个对照品目标成分，通过计算的出其他待测有效成分的含量的方法,35,.,二、中药及其制剂质