果蝇唾腺染色体的观察

.,实验五果蝇唾腺染色体的观察,.,1、学习果蝇幼虫唾腺的剖取方法和唾腺染色体的制片方法；2、观察果蝇唾腺染色体的形态特征。,一、实验目的,.,双翅目昆虫（果蝇等）幼虫期唾腺细胞中具有相当于普通染色体100150倍的巨大染色体，由于存在于唾液腺细胞中，所以称为唾腺染色体(salivaryglandchromosome)。它是由于唾腺细胞发育到一定阶段后就不再进行有丝分裂，永久停留在间期，唾腺染色体经过多次复制而不分开，约有10004000根染色体丝的拷贝，所以又叫多线染色体（polytenechromosomes）。,二、实验原理,.,黑腹果蝇巨大的唾腺染色体是从染色中心向四周放射状地伸出5长1短共6条臂。果蝇染色体数为2n8。其中1号染色体（X染色体）为端着丝粒染色体，其着丝粒附着地一端在染色中心上，另一端游离；2号、3号染色体为中部着丝粒染色体，每条呈“V“伸展两臂，4号染色体很短小，呈点状附在染色中心边缘。,.,特征巨大；体细胞配对，染色体只有半数（n）；各染色体的异染色质多的着丝粒部分互相靠拢形成染色中心；深浅不同、疏密个别的横纹。,.,染色质丝的不同部位螺旋化程度不同，其中螺旋化程度较高的部位形成染色粒，这些染色粒经多线染色体的“放大”，形成染色较深的横纹。横纹的相对大小和空间排列是恒定的，可以作为天然的精确基因定位的“坐标”。这些横纹的数目和位置一般是恒定的，具有果蝇种的特征，染色体的缺失、重复、倒位、易位等，都能在唾腺染色体上辨别出来。,bandedchromosomes1000 x,.,材料：果蝇的三龄幼虫试剂：1%醋酸洋红器具：显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸、绘图纸,三、仪器与材料,.,（1）取果蝇三龄幼虫置于载玻片上，由于果蝇的唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处，所以左手持镊子按压住虫体后端三分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位，适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。,四、实验程序,.,.,果蝇三龄幼虫解剖图,Salivarygland：唾腺Gonad:性腺Ganglion:神经节Trachea:气管Ovary：卵巢Intestine：肠,.,挑取果蝇唾腺的过程,.,唾腺的位置及形态特征,.,.,（2）滴加一滴醋酸洋红，在显微镜下（4倍镜）去除唾腺周围的脂肪等其他组织部分。唾腺是一对透明的棒状腺体，外有白色的脂肪组织（不透明）。去除幼虫其它组织部分，并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。,.,分离出来的果蝇唾腺,位置：在幼虫体前约1/3处；形状：形如一对香蕉，上小上大。一边常附着带状的不透明的脂肪。颜色：半透明如玻璃，略带白色，比周围组织透明；细胞特征：唾腺上的细胞较大，轮廓清晰，用低倍镜即可清楚看到。,.,唾腺组织,.,不同人操作得到的唾腺组织可能不一样,.,放大的唾腺组织,.,放大的唾腺组织,.,放大的唾腺组织,.,（3）盖上盖玻片，用刀片支起盖玻片一角，按住盖玻片另一边，用解剖针轻轻敲打盖玻片，去掉刀片，稍加热后覆上滤纸垂直压片。（4）观察，先在10倍镜下观察找到染色体后，再换高倍镜下观察，比较各染色体的横向纹带、带宽大小、带纹排列顺序，以及由着丝点纠集组成的染色体中心。,.,10倍镜,.,40倍镜,.,100倍镜,.,重要实验步骤：取果蝇三龄幼虫，一手持镊子夹住虫体中部稍后，固定幼虫，另一手持解剖针按住幼虫头部，轻缓拉开头部，去除幼虫的其他组织部分和唾腺周围的脂肪等其他组织，再用常规染色体制片方法制片。,.,实验注意事项：1、取果蝇三龄幼虫最佳，其行动迟缓，肥大，爬上管壁（将要化蛹）。2、要辨