第二章-卫生检验PPT课件

第二章卫生检验,第一节概述第二节采样技术与规范第三节主要卫生检验方法第四节实验室认证与认可,1,.,第一节概述,一、卫生检验概念与意义概念卫生检验（hygienetest)是应用现代医学理论和科学技术手段，根据国家有关卫生标准和检验方法，监测环境、食品、作业现场的卫生状况和污染危害，为卫生监督执法和疾病防治提供可靠科学依据的学科。,2,.,意义是预防医学的重要组成部分，可为制定卫生标准、评价卫生措施效果提供科学依据，在疾病控制、外界环境因素与人体健康关系的研究、制定和执行卫生政策法规等工作中起着极为重要的作用。是卫生监督的重要组成部分，可为监督执法提供法律依据，在维护国家尊严、威望，保护国家卫生安全，维护国家经济利益方面起着极其重要的作用。,3,.,二、卫生检验的种类及内容,按照卫生专业分类水质卫生检验包括水的感官性状检验，水的一般化学性状检验，水质污染指标检验，水质毒理学指标检验，饮水消毒检验，涉及生活饮用水安全的产品检验等。食品卫生检验包括食品的一般成分分析，食品中微量元素测定，食品中有害物质测定，餐具消毒效果测定，食品容器包装材料的检验，保健食品功能性实验，新资源食品的毒理学实验等。劳动卫生检验包括车间空气中有害物质测定，生产环境空气中粉尘的测定，生物样品中有毒物质的检验。,4,.,按照卫生专业分类化妆品卫生检验包括化妆品理化指标检验，化妆品微生物学指标检验，特殊用途化妆品毒理学及功能性实验等。公共场所卫生检验包括公共场所小气候检测，茶具、被服、卫生洁具消毒检测，一次性用品等健康相关产品检验。消毒杀虫卫生检验包括消毒杀虫药品、器械效果检验，一次性医疗卫生用品和其他健康相关产品的检验，医院消毒效果检验，医学昆虫检验等。生物学材料检验包括病原微生物的分离与鉴定，抗原、抗体的检测等。,5,.,按照卫生检验工作性质分类经常性卫生检验主要指卫生检验的日常工作。一般包括对环境水质、饮水、食品、作业场所、公共卫生场所、化妆品以及国境口岸环境、交通工具、物品等实施的经常性的规范检验。特殊卫生检验主要指对某些特殊环境或特殊卫生事件发生后所实施的卫生检验。如食物中毒、疾病爆发、职业中毒等事件发生后的紧急性卫生检验。,6,.,第二节采样技术与规范,一、卫生检验中的采样原则代表性（representation）样品的代表性是关系到检验结果真实性的重要保证。目的性（objective）在样品采集之前要明确采样的目的。时效性（chronergy）注意及时采样，以免延误时间得不到正确结果。安全性（safety）做好个人防护，同时也要防止标本对环境和社区的污染。,7,.,二、标本的采集方法采样的程序一般采样程序采样至少要2人。样品进行标号签封，并填写样品采集记录表。必要时，做现场情况调查。无菌采样程序采样工具和容器灭菌。采样人员穿洁净工作服，消毒双手。采样容器开口处灭菌。采样后，在酒精灯火焰上对容器加盖、封口。采样时最好两人协作配合。,8,.,不同样品的采样方法,空气样品的采集水样的采集食品的采集生物标本的采集,9,.,大气采样,直接采样法,自然沉降法和惯性撞击法,浓集采样法,直接采样法,真空瓶取样,注射器采样,溶液吸收法,滤纸和滤膜吸收法,固体吸附剂阻留法,空气样品采集,10,.,（一）直接采样法,当空气中被测组分浓度较高，或者所选用分析方法的灵敏度较高时，采用直接采样法采取少量空气样品就可满足分析需要。,11,.,注射器采样,塑料袋采样,12,.,真空瓶采样,13,.,溶液吸收法滤纸和滤膜阻留法固体吸附剂阻留法,（二）浓集采样法,当空气中被测组分浓度较低，需浓缩后方能满足分析方法的要求时应用此法。,14,.,采用动力装置使空气通过适宜的吸收液，形成气泡，在气泡和溶液的界面上，有害物质分子由于溶解作用或化学反应，很快进入吸收液中。同时气泡中间的气体分子因本身运动速度极大，也能迅速地扩散到气液界面上而被吸收。常用于采集气态或蒸汽态的污染物；常用的吸收液有水、水溶液和有机溶剂。,1、溶液吸收法,15,.,选择吸收液时应考虑到以下几点：,被测物质在吸收液中溶解度大，反应速度快；,被测组分在吸收液中要有足够的稳定时间；,选择吸收液还要考虑到下一步化学反应，应与以后的分析步骤紧密衔接起来；,吸收液要价廉易得。,16,.,2、滤纸和滤膜阻留法,将过滤料放在采样夹上，用抽气装置抽气，则空气中的颗粒物被阻留在过滤材料上，称量过滤材料上富集的颗粒物质量，根据采样体积，即可计算出空气中颗粒物的浓度。,常用的滤料有：玻璃纤维滤料、有机合成纤维滤料、微孔滤膜和浸渍试剂滤料。,主要用以采集尘粒状气溶胶；,17,.,18,.,选用滤料应注意：,所选用的滤料和采样条件要能保证有足够高的采样效率。,欲测的有害物质在膜上的本底量尽量低而且比较稳定、均匀。,滤料的阻力要尽量小，这样可提高采样速度，易解决动力问题。,滤料的机械强度、本身的重量以及价格等也要考虑。,19,.,3、固体吸附剂阻留法,空气通过装有固体吸附剂的采样管时，被测组分被固体吸附剂吸附而浓缩，解吸后进行分析测定。常用的采样器有填充柱采样管、滤料采样夹。,20,.,(1)吸附型填充柱：填充剂是固体颗粒状吸附剂如活性炭、硅胶、分子筛、高分子多孔微球等多孔性物质，具有较大的比表面积，吸附性强，对气体、蒸气分子有较强的吸附性。,(2)分配型填充柱：填充柱内装填充剂是表面涂有高沸点有机溶剂的惰性多孔颗粒物。采样时，气样通过填充柱，在有机溶剂中分配系数大的组分保留在填充剂上而被富集。,(3)反应型填充柱：反应型填充柱表面涂一层能与被测物起反应的化学试剂制成。当气体通过反应型填充柱时，被测物质在填充剂表面上发生化学反应而被阻留下来。,21,.,自然沉降法和惯性撞击法,主要用于空气中细菌总数的测定。（1）自然沉降法：利用空气中微生物气溶胶粒子的重力作用自然沉降到琼脂平板上，经24小时37培养计算菌落数。（2）惯性撞击法：；利用抽气装置，在单位时间内将一定容量的空气通过某些装置形成直线或曲线运动的气流，使其中的微生物粒子因惯性撞击并黏附在培养及表面，再将培养基进行培养后计数。,22,.,三、采样仪器,样本收集器,23,.,（一）收集器,1、液体吸收管,（1）气泡吸收管,普通型：10mL0.5-1.5L/min直筒型：50mL0.2L/min,24,.,（2）多孔玻板吸收管：优点是增加了气液接触界面，提高了吸收效率。,25,.,（3）冲击式吸收管：主要适用于采集气溶胶状物质。采样效率主要取决于中心管嘴尖大小及其与瓶底的距离。,26,.,2、填充柱采样管,采样时间根据被测对象及吸附剂性质而定，对于不同被测组分的采集，吸附剂的选择是关键。,27,.,水样的采集,江河、湖泊、水库等地表水：采集表层的水（水面下20-30cm）可用清洁的塑料桶或采样器采集；采集5m以内的深水用水杨采集器采集；较深水应用特制的水样采集器。井水水样采集器采集。自来水或具有抽水设备的井水先用75%的酒精棉消毒水龙头，再用火焰将龙头灼烧消毒，打开龙头后防水5-10分钟后再进行采集。泉水直接用采样器灌注或多次采样。泳池水采样点选取对角线3个点，采样点离池壁1m，在水下30cm处采集。,28,.,液体食品经充分混匀后取样。大包装及散装样品等距离上中下三层，在每层的四点和中间分区设点，应距边缘50cm，各取同样量的样品混合后再取所需样品。散堆食品分上中下三层，中心和四角个点分别取样，再从每包的各个部位取样，最后经混匀后取样。小包装食品采取整包采样，按每一生产班次、批号，随机抽取原包装样品4包。,食品的采集,29,.,食品的采集,不均匀样品肉尸从不同部位取样，小鱼取2-3尾，大鱼可切开，头、体、尾适量；蛋类按个数以一定比例取样，也可根据检验目的将蛋清、蛋黄分开取样。被污染或食物中毒可疑食品根据检验目的，结合食品的感官性状、污染程度及特征分别采样食品中农药残留量的采样根据食品性质和农药在食品中的分布特征决定采样的时间、部位、数量食（饮）具消毒采样随机抽取消毒后准备使用的各类食具。,30,.,生物标本的采集,血液标本的采集：毛细血管采血、静脉采血。尿液的采集：根据检验目的收集。粪便标本的采集：粪便采集和肠拭子采集。痰标本的采集：咳出痰液、吸痰管收集痰液或纤维支气管镜采集痰液。咽拭子标本的采集：点燃酒精灯后，用拭子蘸无菌生理盐水收集。呕吐物的采集：将呕吐物收集于干净带塞的容器中。,31,.,三、样品保存与处理样品的运送样品应在34小时内送至检验室，部分特殊标本应立即送检。样品标签必须标记清楚名称、来源、数量、采样地点、采样人及采样时间。样品的保存空气、水、食物样本：通常在4小时内要求测定，需保存的水样在采样时要加入保存剂，如H2SO4、NaOH、醋酸锌等。生物标本：血液标本一般在24小时内完成测定，如需保存，可离心后将血清或血浆置-25保存；组织标本-80以下或液氮保存。,32,.,样品的处理液体样品要充分振荡均匀，固体标本要捣碎、研磨均匀。固体、非水溶性软膏等，应先均质化，再稀释，如为非水溶性软膏应加入乳化剂使样品分散。含有防腐剂、抗生素、消毒剂或其他抑菌物质的检品，应先对其抑菌作用予以去除。放射性标本遵照国家有关放射性工作安全规定进行。所有生物标本的处理应该在II级生物安全柜中进行。现场采样操作的质量控制每次现场采样前，对采样人员进行培训。现场采样前，必须详细阅读操作作业指导书和卫生采样规范。每件仪器应按计量规定，定期检定。,33,.,第三节主要卫生检验方法,一、理化检验滴定分析法：酸碱滴定法、络合滴定法、沉淀滴定法、氧化还原滴定法。吸光光度法光谱法：原子吸收光谱法、原子发射光谱法色谱法：气相色谱法、高效液相色谱法磁共振波谱分析法质谱分析法,34,.,二、微生物检验细菌培养血清学实验：沉淀反应、凝集、凝集抑制和协同凝集反应、补体结合试验免疫学实验：免疫荧光技术、酶联免疫分析法、放射免疫分析法分型鉴定方法：血清学分型、噬菌体分型、细菌素分型、质粒图谱分型、基因分型、表型检测分子生物学实验：聚合酶链反应、核酸杂交,35,.,三、毒理学实验一般毒性试验：急性毒性试验、亚慢性毒性试验、慢性毒性试验致突变试验：Ames试验、微核试验、染色体畸变分析致畸试验致癌试验：细胞转化试验、长期诱癌试验,36,.,四、媒介生物鉴定（鼠、蚊、蝇、蚤、蠓、蜚蠊、蜱、螨）媒介生物的采集与处理媒介生物的采集采集媒介生物要根据采集目的及生物的生活习性进行。,37,.,媒介生物的采集与处理媒介生物的处理病毒分离：将装虫的小口袋尽快放在-15冰箱中，经3-5小时后，媒介生物被冻死后，可取出拣取分类。细菌分离：将装虫的小口袋放在1-4冷藏、过夜，使生物处于冬眠昏迷状态，即可取出拣取分类。活体研究：保持合适的温度湿度。,38,.,媒介生物及相关疾病,39,.,媒介生物的判定生物学证据与人关系密切；数量较多；寿命较长。流行病学证据媒介生物的地理分布及季节消长与某种虫媒病流行地区以及流行季节相一致，则提示为传播媒介的可能性。自然感染证据在流行地区流行季节采集可疑的媒介生物，并分离到自然感染的病原体。实验室证据用人工感染方法证明病原体能在某种节肢动物体内增殖或能发育至感染期，并能传染给易感的试验动物。,40,.,第四节实验室认证与认可,一、实验室认证认可的概念和意义实验室认证认可的概念实验室认证（laboratorycertification）：由第三方组织出示书面保证，表明产品、过程或服务符合特定要求的程序。在计量法实施细则中有将这项工作称为计量认证。产品质量检验机构其计量检定测试能力和可靠性必须由省级以上人民政府计量行政部门考核合格。,41,.,实验室认证认可的概念实验室认可（laboratoryaccreditation）：是权威机构对实验室有能力进行规定类型的检测和校准给予的一种正式承认。“计量认证”使实验室取得在国内出具公正数据的合法地位；“实验室认可”使实验室取得国际通行的合格证。,42,.,实验室认可与计量认证的联系与区别联系都属于对质检机构、实验室的质量管理体系和技术能力的评审，且都是以GB/T15481作为基本条件。组织结构：组织结构作为质量体系的第一要素。程序：具体的操作规定了程序，它是质量体系的核心部分。（文件控制和维护程序、质量溯源程序、检验样品的管理程序、设备维护维修检定程序、检验报告反馈程序、保密程序、质量手册的完善程序、实验室质控程序）过程：每个过程要按照有关程序操作，过程之间履行签字手续。资源：技术资源、物质资源、人员资源、信息资源。计量认证是卫生检验开展工作的根本，实验室认可是卫生检验占领检验市场的有力手段。卫生检验只有通过国家实验室认可，才能在检验市场中处于主动地位。,43,.,实验室认可与计量认证的联系与区别区别,44,.,实验室认可的意义贸易发展的需要检测/校准服务质量的重要性在世界贸易和各国经济中的作用日益突出。产品类型和品种迅速增长，产品规范和法规日趋繁杂，技术含量越来越高，因而对实验室的专业技术能力、对检测/校准结果正确性和有效性的要求也日益迫切。因此，如何向社会提供这种要求的保证就成为重要课题。国际贸易的迅速发展形成了日趋激烈的竞争形势。在经济全球化的趋势下，竞争者均力图开发支持其竞争的新策略，其中重要的一环就是通过检测/校准显示其产品的高技术含量，以加大进入其他国家市场的力度，并借用检测/校准形成某种技术贸易壁垒，阻挡外来商品进入本国/本地区市场。这就对实验室检测/校准服务的客观保证提出了更高的要求。,45,.,政府管理部门和客户的需要政府管理部门在履行宏观调控、规范市场行为和保护消费者的健康和安全的职责中，也需要客观、准确的检测/校准数据来支持其管理行为，因此也要求各类实验室能够按照一个统一的标准进行能力认可。社会公正活动的需要随着我国市场经济的发展，产品责任的诉讼在不断地增加，产品检测结果往往成为责任划分的重要依据。因此，对检测数据的技术有效性和实验室的公证和独立性保障，越来越成为关注的焦点，实验室认可的作用也逐渐得到社会各界的承认。,46,.,产品认证发展的需要产品认证往往需要实验室检测结果的支持。因此，客观、准确的检测也需要通过认可的实验室提供保证。实验室自我改进和参与检测/校准市场竞争的需要实验室按照专用准则的要求建立管理体系，不仅可以向社会、向客户证明自身的技术能力，而且还可以实现实验室自我改进和自我完善，持续维持和不断提高检测/校准能力，适应检测/校准市场不断提出的新要求。,47,.,二、实验室认证认可的基本程序与要求初次认可意向申请申请方向CNAL秘书处表示认证认可意向。正式申请提供资料，缴费评审准备评审组成立，资料审查预评审秘书方审查资料，申请方有效纠正发现的问题后，评审组长可进行现场评审现场评审评审组现场查与考，给出结论评定认可评定委员会对申请方与认证认可要求的符合性进行评价并做出决定。若合格，由CNAL秘书长寿泉签发认可证书。计量认证证书由省级以上人民政府计量行政部门发放。,48,.,实验室认可过程（初次认可）：分为三个阶段（准备及申请阶段、现场评审阶段、批准认可阶段）（1）准备及申请阶段准备：学习认可准则，根据认可准则建立实验室的质量管理体系，并按体系要求运行半年以上时间，进行至少一次内部审核和管理评审。,49,.,申请前准备：实验室可采用电话、信函、电子邮件方式向CNAS表明申请意向。在收到实验室的认可意向后，CNAS为实验室提供申请书及相关资料。根据实验室要求，CNAS可派员去实验室初访。正式申请：实验室向认可机构提出正式申请，包括承诺自愿履行相关义务、提交申请书及必要的相关资料、费用。,50,.,资料审查：CNAS对实验室提交的申请资料进行规范、完善的审查，其目的是了解和评价实验室提供材料所描述的技术能力范围、配置、质量管理体系是否能满足要求。,51,.,（2）现场评审阶段评审前准备：CNAS选配一位评审组长负责审查实验室的申请书及相关资料，制定评审计划，并将现场评审日程表提交给被评审实验室。CNAS指定评审组成员，如申请方基于公正性理由对评审组的任何成员表示拒绝时，CNAS认可评审处经核实后可以给予调整。,52,.,评审组长在现场评审前，召开全体评审组成员参加的预备会，以检查评审的准备情况，重申评审纪律，签署现场评审人员公正性声明。,53,.,现场评审首次会议：由组长召开由评审员和实验室有关人员参加的首次会议，主要内容是由实验室负责人介绍实验室概况、主要工作人员及实验室评审准备工作情况，评审方强调公正客观原则和向实验室做出保密的承诺。,54,.,现场检查：包括“软件”和“硬件”两方面。“软件”主要对质量管理体系的建立、质量手册和有关的质量文件与现实情况的符合性进行评审。“硬件”是对认可项目所涉及的所有参数进行逐项确认，可通过现场试验、利用能力验证结果、盲样测试、实验室间比对结果、现场演示、现场提问、查阅记录或报告、核查仪器设备配置等方式进行。,55,.,座谈会：评审组在评审过程中召开一次医护人员的座谈会，特别注重了解检验前和检验后程序的控制，实验室检测结果的使用情况，生物参考区间与危急值的评审，实验室与临床的沟通、改进机会。,56,.,末次会议：向实验室报告评审情况，对评审中发现的主要问题加以说明，确认不符合项/观察项，宣布现场评审结论，提出整改要求及具体的整改验收日期。,57,.,（3）批准认可阶段CNAS组织专家评审组，依据现场评审组提交的实验室现场评审的所有资料，对现场评审活动进行程序性和规范性审查。CNAS秘书处对专家评审组的报告及相关资料，进行最终审查。CNAS向实验室提出整改要求，整改满意后，CNAS正式批准认可。,58,.,59,.,60,.,CNAS：中国合格评定国家认可委员会ILAC：国际互认联合协定,61,.,监督评审认可机构在认可有效期内，对已认可实验室进行定期或不定期的抽查评审。复评审是指认可机构在认可有效期结束前，对已获认可实验室实施的全面评审，是针对全部认可范围和全部要素的评审。,62,.,三、实验室认证认可管理体系权威的认可机构2006年，中国实验室国家认可委员会（CNAL）与中国认证机构国家认可委员会(CNAB)、中国认证人员与培训机构、国家认可委员会(CNAT)等三个认可委员会合并，成立了中国合格评定国家认可委员会(Chinanationalaccreditationserviceforconformityassessment，CNAS)，统一负责对认证机构、实验室和检查机构等认可工作。,63,.,认可