猪肠道健康的维护与调节

猪肠道健康的维护与调节,谯仕彦,2010.05,主要内容,猪肠道的结构、功能与健康氨基酸与肠道健康日粮蛋白质水平与肠道健康微生物制剂对肠道健康的调节作用饲料加工工艺与猪肠道健康,一、猪肠道的结构及功能,猪消化系统的构造,消肠道的结构,猪的肠道壁从内向外可分为四层，即粘膜层、粘膜下层、肌层及浆膜层粘膜层：由上皮细胞构成，分布有血管、神经丛和淋巴管。粘膜层主要起吸收和保护作用粘膜下层：疏松结缔组织，富含血管、淋巴管、弹性纤维、脂肪细胞和神经丛肌层：除口腔、食管上段以及肛门周围属于横纹肌外，其余消化道的肌层均为平滑肌浆膜层：消化道的最外层，分泌少量浆液，减少肠管运动时的摩擦，起保护和润滑作用,小肠壁的结构,基膜,猪十二指肠绒毛(duodenum villi of pig),猪空肠微绒毛（microvilli）,被破坏的猪空肠微绒毛,二、氨基酸与猪的肠道健康,1、赖氨酸,饲粮赖氨酸水平对21日龄断奶仔猪生产性能的影响,顾宪红，李德发 2000,饲粮赖氨酸水平对21日龄断奶仔猪肠道绒毛发育的影响 单位： m,顾宪红，李德发 2000,2、精氨酸与N-氨甲酰谷氨酸,MeansSEM, n=10a-c: p0.01.,a,b,c,c,c,母猪奶中氨基酸的浓度,猪胎儿中氨基酸的组成,MeansSEM, n=10,母猪奶和仔猪体内精氨酸与赖氨酸的比例,精氨酸,丙胺酸,日粮中添加精氨酸可提高母猪的受胎率,Mateo 等，2006,*,*,*,* P=0.10* P0.03,在妊娠30天到114天，53头母猪饲喂以玉米-豆粕为基础的日粮，同时添加1% L-精氨酸盐酸盐或等氮L-丙氨酸,精氨酸添加量对仔猪日增重的影响,a-c: p0.05,c,b,a,c,b,a,c,b,a,精氨酸作用的信号通路,精氨酸 FAK,细胞信号 PI-3K AP-1 和 cJun (丝氨酸激酶) (转录因子),血管再生血管舒张血流神经传递免疫反应线粒体功能,蛋白激酶 A,mTOR,蛋白质合成,细胞增殖和迁移,70 kDa S6 kinase (p70s6k),NO & 多胺,Rhoads et al. (2004) Gut 53: 514-522. FAK, focal adhesion kinase.Rhoads et al. (2008) J Nutr (In press),日粮添加精氨酸对14日龄断奶仔猪小肠绒毛高度的影响,日粮添加精氨酸对14日龄断奶仔猪小肠隐窝深度的影响,A,B,断奶仔猪日粮中添加精氨酸对小肠绒毛形态的影响,Zhenfeng Zhan, Defa Li，et al., 2008, J. Nutr.,日粮添加精氨酸对14日龄断奶仔猪小肠中NO浓度的影响,日粮添加精氨酸对14日龄断奶仔猪小肠中ET-1浓度的影响,断奶仔猪日粮中添加精氨酸对小肠NO和血管内皮素的影响,Zhenfeng Zhan, Defa Li，et al., 2008, J. Nutr.,L-脯氨酸,H2O,1/2O2,PO,L-1吡咯啉5-羧酸酯,L-鸟氨酸,L-瓜氨酸,L-精氨琥珀酸,ASS,ATP + Asp,AMP-PPi,CP,L-谷氨酸,NH3 +HCO3-,N-乙酰谷氨酸,2 ADP + Pi,2 ATP,CPS-1,CoA,Acetyl-CoA,L-精氨酸,ASL,延胡索酸,Glu,-KG,NAGS,L-精氨酸,+,NADP+,NADPH + H+,P5CS,H2O,NH4+,PDG,L-谷氨酰胺,OCT,OAT,猪肠内从谷氨酰胺和脯氨酸合成胱氨酸和精氨酸的途径,N-氨甲酰谷氨酸(NCG),N-乙酰谷氨酸,N-氨甲酰谷氨酸,N-氨甲酰谷氨酸（NCG）的制备,以谷氨酸等安全物质为原料，成功制备了N-氨甲酰谷氨酸创造了新的后处理工艺完成了时产100kg的中试试验现已能够商业化生产,妊娠全期日粮添加NCG对初产母猪繁殖性能的影响,妊娠全期母猪日粮添加NCG对窝产总数和窝产活仔数的影响,妊娠全期母猪日粮添加NCG对仔猪初生重的影响,妊娠前期日粮添加NCG对初产母猪繁殖性能的影响,妊娠前期母猪日粮添加NCG对窝产总数和窝产活仔数的影响,妊娠后期母猪日粮添加NCG对仔猪初生重的影响,妊娠后期日粮添加NCG对经产母猪繁殖性能的影响,妊娠后期母猪日粮添加NCG对窝产总数和窝产活仔数的影响,妊娠后期母猪日粮添加NCG对仔猪初生重的影响,精氨酸,一氧化氮,扩张胎盘表面积提高胚胎着床率,扩张血管增大胎盘血流量,营养物质从母体向胎儿转运提高产仔数/促进胎儿生长,NCG改善母猪繁殖性能的机理,3、谷氨酰胺,谷氨酰胺在肠道的生理功能,为氨基酸、蛋白质和核酸的合成提供氮源为肠道供能约占总量的70以上是肠道粘膜代谢的必需营养物质Gln缺乏，可使肠粘膜萎缩、绒毛变稀变短，屏障功能下降,谷氨酰胺减轻肠粘膜损伤的可能机制,参与三羧酸循环，生成ATP供能参与粘膜细胞核酸及蛋白质的合成代谢促进肠粘膜细胞的更新和再生保持肠粘膜细胞超微结构的完整性刺激机体产生高血糖素增加萎缩肠粘膜中谷氨酰胺酶活性,Wu et al.1996. J Nutr. 126: 2578-2584.,断奶仔猪日粮中添加谷氨酰胺对肠道绒毛高度和粘膜固有层深度的影响,谷氨酰胺防止断奶仔猪空肠粘膜萎缩,Domeneghini.2006. Vet Res Comm. 30:331342.,断奶仔猪日粮中添加0.5%的谷氨酰胺对小肠绒毛高度和隐窝深度的影响,Domeneghini. 2006. Vet Res Comm. 30:331342.,断奶仔猪日粮中添加0.5%的谷氨酰胺对小肠上皮细胞凋亡和有丝分裂的影响,断奶仔猪日粮中添加1%的谷氨酰胺对空肠谷胱甘肽和绒毛高度的影响,Wang JJ et al. (2008) J Nutr 138: 1025-1032,谷氨酰胺下调与凋亡有关的基因（Wang JJ et al. 2008, J Nutr 138: 1025-1032）,KLF-10 - 64%La protein homolog - 41%Peptidyl-prolyl isomerase - 37%MAPK-6 - 75% ICAM-1 - 38%,炎性介质TNF-、 IL-6、 DAO、 D乳酸增加，使肠粘膜通透性增强，导致肠道屏障功能降低,4、苏氨酸,苏氨酸在肠道代谢的特殊性,健康的猪肠道可滞留很大比例的采食日粮苏氨酸，肠道对日粮苏氨酸的高滞留量可能反映了在合成肠道蛋白质过程中对苏氨酸的高需要量 （ Fuller，1994；Stoll等，1998）健康猪的肠道利用了100的谷氨酸、谷氨酰胺氧化供能，大约1/3的采食日粮赖氨酸、亮氨酸和苯丙氨酸为等为肠道代谢采食日粮苏氨酸的60-85%被健康猪的肠道利用 （van Goudoever等，2000）,苏氨酸是肠黏液蛋白的主要组分，占黏液总氨基酸含量的30%（Neutra和Forstner，1987)苏氨酸缺乏降低断奶仔猪肠道重量和杯状细胞数量 (Bertolo等，1998)猪的初乳和常乳的免疫球蛋白氨基酸组成中，苏氨酸含量最高苏氨酸是维持妊娠母猪免疫球蛋白IgG的第一限制性氨基酸,苏氨酸在肠道健康中的作用,苏氨酸在肠道的去向?,日粮采食苏氨酸,肠道 (6085%),蛋白质合成,氧化供能,97%,3%,黏膜蛋白,黏液蛋白,内源分泌,CO2,IgA,肠黏液蛋白的功能肠道生理肠道健康IgA的功能肠道内分泌最丰富的免疫球蛋白 (Alverdy，1990)IgA缺乏导致肠道屏障功能削弱 (Alverdy等，1988),肠黏液和IgA在保护肠道健康中的重要作用,日粮TID苏氨酸水平对断奶仔猪十二指肠黏膜、黏液蛋白质合成速率的影响,蛋白质合成速率(%/d),40%,38%,日粮TID苏氨酸水平 (g/kg),P 0.05,日粮TID苏氨酸水平对断奶仔猪空肠黏膜、黏液蛋白合成速率的影响,蛋白质合成速率(%/d),35%,23%,45%,46%,日粮TID苏氨酸水平 (g/kg),P 0.05,日粮TID苏氨酸水平对断奶仔猪回肠黏膜、黏液蛋白合成速率的影响,蛋白质合成速率(%/d),28%,日粮TID苏氨酸水平 (g/kg),P 0.05,日粮TID苏氨酸水平对断奶仔猪肝脏蛋白质合成速率的影响,蛋白质合成速率(%/d),蛋白质合成速率(%/d),27%,49%,47%,日粮TID苏氨酸水平 (g/kg),日粮TID苏氨酸水平 (g/kg),P 0.05,背最长肌 P 0.05,肝脏,日粮TID苏氨酸水平对大肠杆菌激发后断奶仔猪日增重的影响,苏氨酸水平 P 0.01 E. coli P 0.05 E. coli P 0.05 互作 P 0.05 E. coli P = 0.06 互作 P = 0.07,IgG浓度,日粮TID苏氨酸水平 (g/kg),(g/g),日粮TID苏氨酸水平对大肠杆菌激发前后断奶仔猪小肠绒毛高度的影响,十二指肠: 苏氨酸水平 P 0.05 E. coli P = 0.05 互作 NS,空肠: 苏氨酸水平 P 0.05 E. coli P 0.05 E. coli P 0.05 互作 NS,小肠绒毛高度,日粮TID苏氨酸水平 (g/kg),(m),日粮TID苏氨酸水平对大肠杆菌激发前后断奶仔猪小肠绒毛高度与隐窝深度比例的影响,十二指肠: 苏氨酸水平 P 0.05 互作 NS,空肠: 苏氨酸水平 P 0.01 E. coli P 0.05 互作P 0.05 E. coli P 0.05 E. coli P = 0.06 互作 P = 0.07,IgG浓度,日粮TID苏氨酸水平 (g/kg),(g/g),王旭, 谯仕彦. 2006,日粮真可消化苏氨酸对21日龄断奶仔猪小肠黏液蛋白含量的影响,Wang W. W. ， Zeng X. F., Qiao S., 2010, J. Nutr., 140:981-986,日粮真可消化苏氨酸对仔猪小肠黏液蛋白基因表达的影响,Wang W. W. ， Zeng X. F., Qiao S., 2010, J. Nutr., 140:981-986,日粮真可消化苏氨酸对仔猪小肠黏液蛋白亚型的影响,Wang W. W. ， Zeng X. F., Qiao S., 2010, J. Nutr., 140:981-986,95-120kg 育肥猪的苏氨酸需要量,Treatment P = 0.15; Linear P = 0.009; SEM = 20.8,Thr/Lys,G. Allee，2006, Control:0.61 (NRC, 1998),Treatment P = 0.28; Linear P = 0.08; SEM = 0.05,95-120kg 育肥猪的苏氨酸需要量,Thr/Lys,G. Allee, 2006; 0.61 (NRC, 1998),Thr/Lys,95-120kg 育肥猪的苏氨酸需要量,G. Allee, 2006; 0.61 (NRC, 1998),1998以后/猪和猪氨基酸研究最佳苏氨酸与赖氨酸比例（%）的研究结果,0,10,20,30,40,50,60,70,80,5-10kg,10-20kg,20-50kg,50-120kg,泌乳母猪,苏氨酸与赖氨酸的比例（%）,65%,目前至少已经发现，谷氨酸、谷氨酰胺是肠道的主要功能物质 精氨酸可增加肠道黏膜的血液供应量，增加小肠营养物质的供给量 N-氨甲酰谷氨酸（NCG）可促进精氨酸的内源合成，至少可替代精氨酸的作用 苏氨酸在促进小肠粘液蛋白的合成、增加上皮细胞的紧密连接、减小上皮细胞的凋亡速度，从而增加肠道的屏障功能上有重要作用,小 结,三、日粮蛋白质水平与仔猪肠道健康,试验设计与试验日粮,Bellego 和 Noblet, 2002; 猪起始体重:11kg,试验日粮养分含量,Bellego 和 Noblet, 2002,日粮蛋白质水平对仔猪生产性能的影响,Bellego 和 Noblet, 2002,日粮粗蛋白水平对早期断奶仔猪生长性能和盲肠食糜中微生物代谢产物的影响,J. Anim. Sci. 2007. 85:33033312，19天断奶，始重7.5 0.78 kg,日粮粗蛋白水平对断奶仔猪生长性能的影响（试验一）,Htoo等， 2007. J. Anim. Sci. 85:33033312,日粮粗蛋白水平对断奶仔猪盲肠食糜中微生物代谢产物的影响（试验二）,仔猪日粮蛋白质水平研究（岳隆耀、易学武、谯仕彦，2007-2009）,用杜长大仔猪进行了4个试验试验一：32头21日龄断奶仔猪，4个不同蛋白质水平，按DE配日粮，每处理8个重复，试验期14天试验二：196头21日龄断奶仔猪，4个处理，按DE配日粮，每处理6个重复，每重复8头，试验期7天试验三：216头23日龄断奶仔猪，4个处理，按DE配日粮，每处理6个重复，每重复9头，试验期7天试验四：116头初始重12kg仔猪，6个处理，按净能配日粮，每处理5个重复，每重复4头，试验期28天,试验一：降低日粮蛋白质水平对断奶仔猪生长性能和肠道健康的影响（日粮营养水平）,结果：对生长性能和粪指数的影响,Yue Longyao，Qiao Shiyan, Livestock Science, 2008, 115:144-152,结果：肠道形态发育（单位um）,Yue Longyao，Qiao Shiyan, Livestock Science, 2008, 115:144-152,结果：粘膜蛋白和二糖酶活性,Yue Longyao，Qiao Shiyan, Livestock Science, 2008, 115:144-152,试验二：降低日粮蛋白质顺序补充氨基酸对断奶仔猪生长性能的影响（日粮营养水平）,结果：对仔猪生长性能的影响（试验期7天）,岳隆耀，谯仕彦，2009,结果：对仔猪生长性能的影响（试验期7天）,岳隆耀，谯仕彦，2009,试验四：降低日粮蛋白质水平对仔猪生长性能的影响（日粮营养水平，kcal/kg, %, 元/t）,岳隆耀，谯仕彦，2009,结果：对仔猪生长性能的影响,岳隆耀，谯仕彦，2009,不同日粮粗蛋白水平对大肠杆菌攻毒后断奶仔猪腹泻和蛋白发酵指标的影响,日粮粗蛋白水平对断奶仔猪生长性能和血浆尿素氮的影响,Opapeju等, 2009， J. Anim. Sci. 87:28332843；21天断奶，起始体重5.9kg,Opapeju等, 2009 ，J. Anim. Sci. 87:28332843,日粮粗蛋白水平对断奶仔猪腹泻发生率和蛋白质发酵指标的影响,40头杜 大 长仔猪, 17 1 d断奶, 体重5.32 0.24 kg ，2个组，每组5圈，每圈5头处理1日粮CP水平，22.5%；处理2日粮CP水平17.6% CP试验期14天，第8天用 5 1010 cfu/mL的大肠杆菌口服感染， 感染后1、3、7天屠宰,日粮蛋白质水平对断奶仔猪生产性能和肠道健康的影响(Opapeju等, 2009),日粮配方,饲料营养成分含量,结果：生产性能,日粮蛋白质水平对回肠食糜中大肠杆菌K88数量的影响,日粮蛋白质水平对结肠菌群的影响,日粮蛋白质水平对结肠氨浓度和总挥发性脂肪酸的影响,日粮蛋白质水平对回肠绒毛发育的影响,结论,用大肠杆菌感染17日龄断奶仔猪17.6% CP添加合成氨基酸的日粮 可取得和22.5% CP日粮相似的生产性能降低日粮蛋白质水平可减少结肠氨气的产生和蛋白质的发酵降低日粮蛋白质水平减少大肠和小肠中大肠杆菌的数量降低日粮蛋白质水平增加绒毛高度和隐窝深度的比，增加结肠中丁酸的产生,四、微生物制剂对猪肠道健康的调节作用,概 念,概念：活的有益于宿主健康的微生物细胞或微生物细胞成分，包括益生菌和合生素益生菌（Probiotics）：可直接饲喂的微生物（direct fed micro- organism ）合生素（Synbiotics）：益生菌益生协同剂益生协同剂：可促进有益微生物生长繁殖的物质,益生菌的作用特点,不产生任何内外毒素 耐受消化道环境和加工过程的破坏 产生特异性细菌素和降低肠道的pH值 能够粘附胃肠上皮细胞 在胃肠特定部位有足够的活菌数且能增殖 具有营养功能 安全性,益生菌的作用机理,抑制病原菌 生物屏障作用 提高机体的免疫机能 与病原菌竞争营养物质 提供营养物质,我国允许使用的安全微生物菌种,美国允许使用的安全微生物菌种,AAFCO（1991）,仔猪日粮中使用益生素时ADG和饲料转化效率的变化（与不加益生素日粮相比变化的，53个试验）,p0,05,p0,05,ADG（正效应37个；负效应9个；无变化7个）,饲料转化效率（正效应15个；负效应18个；无变化20个）,日粮添加益生素对仔猪腹泻的作用（20个试验）,正效应13个；负效应3个，无作用4个,芽孢杆菌的特点,降解动植物来源的大分子物质：产生淀粉酶、蛋白酶、非带你分多糖（NSP）酶产生抗菌素芽孢在动物消化道出芽率90%以上，营养体在动物肠道中形成芽孢 （Jadamus等，2001）营养体和芽孢均可耐受消化道内环境 （Cavazzoni等，1993）抗逆性强,芽孢杆菌,芽孢杆菌的特点,产生抗菌素抗菌肽：杆菌肽挥发性脂肪酸：乙酸、丙酸,芽孢杆菌,芽孢杆菌的特点,营养体和芽孢均可耐受消化道内环境 （Cavazzoni等，1993）胆盐pH,芽孢杆菌,芽孢杆菌的特点,耐高温高压,芽孢杆菌,芽孢杆菌的种类,枯草芽孢杆菌(B. subtilis)地衣芽孢杆菌(B. licheniformis)纳豆芽孢杆菌(B. natto)Toyoi芽孢杆菌(B. cereus var. toyoi)蜡质样芽孢杆菌(B. cereus)凝结芽孢杆菌(B. coagulans)迟缓芽孢杆菌(B. lentus)短小芽孢杆菌(B. pumilus),芽孢杆菌,日粮添加或口服益生菌对断奶仔猪生产性能的影响,*断奶时口服5ml，含109CFU/L的嗜酸乳酸杆菌和109CFU/L的粪肠球菌*日粮添加0.05的地衣芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌的混合物,日粮添加或口服益生菌对断奶仔猪肠道发育的影响,Walsh等，2007，Livestock Sci.,*断奶时口服5ml，含109CFU/L的嗜酸乳酸杆菌和109CFU/L的粪肠球菌*日粮添加0.05的地衣芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌的混合物,益生菌在母仔猪肠道分布及其对仔猪健康的影响,Taras等，2007，Livestock Sci.,日粮添加芽孢杆菌对育肥猪生产性能的影响,益生菌组成：枯草芽孢杆菌1X107/kg，凝固芽孢杆菌2X106/kg，嗜酸乳杆菌， 5X106/kg 。48头猪，起始体重90kg。Chen等，2006，AJAS, 19:587-592,日粮添加芽孢杆菌对育肥猪日粮养分消化率的影响,益生菌组成：枯草芽孢杆菌1X107/kg，凝固芽孢杆菌2X106/kg，嗜酸乳杆菌， 5X106/kg 。48头猪，起始体重90kg。Chen等，2006，AJAS, 19:587-592,日粮添加芽孢菌对7kg断奶仔猪生产性能的影响,马永喜, 李德发等，2000,芽孢杆菌的应用效果小结,提高仔猪日增重改善仔猪饲料转化效率提高繁殖母猪的生产性能 对仔猪的效果好于生长肥育猪,潘宝海等(2004),芽孢杆菌,活菌数（108 cfu/g）,芽孢杆菌,85水浴不同时间后三种芽孢杆菌的存活率（%）,芽孢杆菌,不同pH模拟胃液中三种芽孢杆菌的耐酸性（%）,芽孢杆菌,0.3%禽胆盐中三种芽孢杆菌的存活率（%）,芽孢杆菌对3种指示菌的抑菌圈直径（mm）,芽孢杆菌,芽孢杆菌与鸡肠上皮细胞的黏附性（个/100个细胞）,芽孢杆菌,细菌与鸡肠黏液蛋白的黏附性（%）,芽孢杆菌,芽孢杆菌对病原菌黏附竞争作用（%）,芽孢杆菌,芽孢杆菌对肉鸡生产性能的影响,益生协同剂,寡糖酶制剂植物提取物酸化剂,益生协同剂的筛选,从52种植物提取物中筛选出可促进芽孢杆菌生长的植物提取物，生长速度的提高范围为14个数量级,益生协同剂的作用,益生协同剂对断奶仔猪生产性能的影响,日粮添加木寡糖(XOS)或酵母菌(SC)对仔猪肠内容物酶活影响,Marinbo等，2007，Livestock Sci.,XOS的添加量为20g/kg，SC的含量为6X108CFU/kg,表20 日粮添加木寡糖(XOS)或酵母菌(SC)对仔猪小肠形态的影响,Marinbo等，2007，Livestock Sci.,XOS的添加量为20g/kg，SC的含量为6X108CFU/kg,饲喂乳酸菌培养物对生长肥育猪生长性能的影响,Lyons，1996,乳酸菌,复合益生素对生长猪生产性能的影响（Chen等，2005）,复合益生素的组成：嗜酸乳酸杆菌，1.0X107 CFU/g; 酿酒酵母，4.3X106 CFU/g; 枯草芽孢杆菌，2.0 3X106 CFU/g；试验猪头数：90头；猪起始体重40kg,日粮添加粪肠球菌(EF)对育肥猪生产性能的影响,CTC为金霉素，添加0.1%；EF含量1.75X1011/kg；EF1含EF0.1%，EF2含EF0.2%；80头猪，起始体重50kg。Chen等，2006，AJAS, 19:406-411,日粮添加粪肠球菌(EF)对育肥猪日粮养分消化率的影响,CTC为金霉素，添加0.1%；EF含量1.75X1011/kg；EF1含EF0.1%，EF2含EF0.2%；80头猪，起始体重50kg。Chen等，2006，AJAS, 19:406-411,乳酸菌的作用效果,26个使用乳酸菌产品的试验结果:16个试验猪的生长性能得到改善9个试验猪的生长性能反而下降8个试验猪的饲料转化率得到提高9个试验猪饲料转化率却降低了乳酸菌制剂在猪上的作用及其机制尚需更多研究Nousiainen和Setl（1993）,乳酸菌,乳酸菌存在的问题与对策,存在的问题,作用效果不连续,制剂的稳定性差,安全性问题,菌种的筛选,控制产品质量,加入协同剂,菌种的筛选,包被或包囊,发酵过程监测,安全性评价,Lactobacillus gasseri 4.0104 Lactobacillus reuteri 6.0104 Lactobacillus acidophilus 1.0105 Lactobacillus fermentum 4.0104,乳酸杆菌选育和复合乳酸杆菌制剂（Unit:104cfu/g）,黄沧海，2003,复合乳酸杆菌制剂对28日龄断奶仔猪生产性能的影响（Huang 和 Qiao，2004）,复合乳酸杆菌含量：2.4X105 CFU/g饲料；试验猪头数：36复合乳酸杆菌组成：胃乳酸杆菌、嗜酸乳酸杆菌、罗伊氏乳酸杆菌、发酵 乳酸杆菌,复合乳酸杆菌制剂对大肠杆菌攻毒仔猪腹泻影响（Huang 和 Qiao，2004）,复合乳酸杆菌组成：胃乳酸杆菌、嗜酸乳酸杆菌、罗伊氏乳酸杆菌、发酵 乳酸杆菌乳酸杆菌供给方式与剂量：饮水，1.0X105 CFU/ml腹泻指数：腹泻头数X腹泻系数,复合乳酸杆菌制剂对断奶仔猪胃肠道粘膜种微生物数量的影响（Huang 和 Qiao，2005）,复合乳酸杆菌组成：同上表乳酸杆菌供给方式与剂量：饮水，1.0X105 CFU/ml,4株乳酸杆菌在Caco-2 细胞上的黏附力,Li and Qiao, 2007， J. Applied Microbiol., 104:1082-1091,在 E. coli K88ac 和 S. typhimurium 存在的情况下乳酸杆菌在肠粘膜上的黏附力,Li and Qiao, 2007， J. Applied Microbiol., 104:1082-1091,乳酸杆菌菌珠对E. Coli K88ac 和S. typhimurium 在肠上皮黏附力的影响,Li and Qiao, 2007， J. Applied Microbiol., 104:1082-1091,不同乳酸杆菌在仔猪肠黏液的黏附力,Li and Qiao, 2007， J. Applied Microbiol., 104:1082-1091,日粮添加不同黏附力的乳酸杆菌断奶仔猪生产性能的影响,Yu and Qiao, 2008, J. Anim. Feed Sci., 17:61-69,不同黏附力的乳酸杆菌对断奶仔猪日粮养分消化率的影响,Yu and Qiao, 2008, J. Anim. Feed Sci., 17:61-69,不同黏附力的乳酸杆菌对断奶仔猪抗OVA抗体滴度,Yu and Qiao, 2008, J. Anim. Feed Sci., 17:61-69,发酵乳酸杆菌对生长育肥猪生产性能的影响（260头）,120-50kg，吉他霉素；50-90kg，维吉尼亚霉素；2发酵乳酸杆菌含量5.8 107/g,Wang and Qiao, 2009, Antonie van Leewenhoek, 96:89-98.,发酵乳酸杆菌对大肠杆菌攻毒仔猪细胞免疫功能的影响,Wang and Qiao, 2009, Antonie van Leewenhoek, 96:89-98.,发酵乳酸杆菌对仔猪肠道粘液蛋白基因表达的影响,发酵乳酸杆菌I5007对羟基自由基的清除能力,发酵乳酸杆菌I5007对过氧化氢的耐受能力,Wang and Qiao, 2009, J. Applied Microbiol. 107：1140-1148,发酵乳酸杆菌对猪肝脏的保护和肌肉抗氧化能力的作用,Wang and Qiao, 2009, J. Applied Microbiol. 107：1140-1148,发酵乳酸杆菌提高肌肉中多不饱和脂肪酸的含量,孙建广，谯仕彦等，动物营养学报2009:132-138,发酵乳酸杆菌的添加对猪胴体品质的影响,孙建广，谯仕彦等，动物营养学报2009:132-138,发酵乳酸杆菌的添加对猪血清中T-AOC、SOD、Cu-Zn-SOD、GSH-Px和 CAT活性及MDA水平的影响,发酵乳酸杆菌的添加对猪肝脏中T-AOC、SOD、Cu-Zn-SOD、GSH-Px和 CAT活性及MDA水平的影响,发酵乳酸杆菌的添加对猪背最长肌中T-AOC、SOD、Cu-Zn-SOD、GSH-Px和 CAT活性及MDA水平的影响,发酵乳酸杆菌50L罐发酵和喷雾干燥工艺研究,采用最新的Plackett-Burman设计、陡爬坡分析、中心复合设计和响应面分析，得到了发酵乳酸杆菌三种主要成分的最适用量和最低成本培养基配方：蛋白胨14.4 g；尿素0.5g；酵母浸粉7.3g。此条件下活菌浓度达1.81011CFU/ml。,Gao X., Lu. W. Q., Qiao S. Y., Letters in Applied Microbiology, 2009, 96：86-98,发酵液直接喷雾干燥：在75 出风口温度下，发酵乳酸杆菌数量3.7109 CFU/g ，存活率为5.97%,微生物制剂的前景,益生素已逐渐被认为是最有潜力取代抗生素的产品之一遗传稳定性和抗逆性对益生素的作用效果有重要影响选育稳定性好、安全性强、抗逆性强的益生菌菌种是今后产品开发的关键应用基因工程的手段改造益生菌的生物学特性将是今后的研究热点改进研究手段，弄清益生素的作用机制应是推进益生素科学应用的重要前提,五、饲料加工与猪肠道健康,1、大豆加工工艺与猪肠道健康,断奶仔猪肠道的适应过程,大豆抗原的种类与性质,种类：Glycinin，-ConglycininGlycinin11S球蛋白，占大豆籽实蛋白质总量的25-30%，球蛋白总量的40%，相对分子量360kDa，由5个亚基构成尿素、强碱、强酸、十二烷基磺酸钠等物理化学方法都可亚基中的二硫键和氢键，改变Glycinin的四级结构，对热有较强的抵抗力-Conglycinin 比Glycinin过敏原性强7S球蛋白，相对分子量180kDa，由3个亚基组成对热、酸、碱的抵抗能力强,大豆抗原引起的免疫反应,大豆抗原的免疫反应：体液免疫和细胞免疫过敏反应IgE介导的急性过敏反应特异性T林报细胞介导的迟发型过敏反应保护性反应：免疫耐性,图2 饲喂大豆蛋白和乳蛋白日粮仔猪血清中抗大豆蛋白抗体效价（p0.01，Li等，1990）,图3 饲喂大豆蛋白和乳蛋白日粮仔猪的绒毛高度（p0.01，Li等，1990）,图5 饲喂不含大豆抗原（NASP）和含大豆抗原（ASP）日粮的仔猪肠绒毛淋巴细胞密度比较（P0.001，Dreau等，1993）,图4 饲喂不含大豆抗原（NASP）和含大豆抗原（ASP）日粮的仔猪十二指肠表面积比较（P0.01，Dreau等，1993）,图6 饲喂不含大豆抗原（NASP）和含大豆抗原（ASP）日粮的仔猪肠绒毛噬酸性细胞密度比较（P0.001，Dreau等，1993）,图7 日粮大豆glycinin和conglycinin对犊牛血清抗glycinin和conglycinin效价对日粮蛋白质消化率的影响（Lalles等，1993）,图8 饲喂含和不含大豆抗原日粮仔猪断奶后腹泻情况（Miller，1994）,过敏反应是仔猪断奶后腹泻的原发性原因,饲料蛋白质和大分子碳水化合物（大豆）小肠粘膜和组织产生IgE肥大细胞释放组胺绒毛萎缩、上皮细胞通透性增加 （肠道损伤） 营养性腹泻 大肠杆菌细菌性腹泻,谯仕彦和李德发， 1996,过敏反应的免疫耐受性,植物蛋白过敏反应：不可避免过敏反应发生的时间：断奶后7-10以前免疫耐受性是仔猪对过敏反应的保护性反应免疫耐受性发生的时间：断奶后7-10天,过敏反应、免疫耐受性与饲喂制度,减少豆粕用量是减轻断奶仔猪过敏反应的重要措施，欧洲人认为断奶仔猪日粮豆粕用量不应超过20%免疫耐受性与饲喂制度免疫耐受性的产生需要一定时间从免疫耐受性角度看，教槽料的饲喂应持续到断奶后7-10天,技术措施,热处理与其它措施的结合膨化外源酶水解微生物发酵,不同加工大豆产品中免疫原性Glycinin和-Conglycinin的含量（mg/g CP）,Herzog Moller等，1998,不同加工大豆产品中免疫原性Glycinin和-Conglycinin的含量（mg/g CP）,Toullec等，1998,大豆浓缩蛋白对14日龄断奶仔猪生产性能的影响,Herzog Moller等