血液RNA提取方法_第1页
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文档简介

血液RNA提取方法1. 取新鲜的血液（紫管），加入3倍体积红细胞裂解液，混匀后室温放置10分钟，10,000 rpm离心1分钟。2. 彻底吸弃上清，收集白细胞沉淀。3. 每100-200l血液收集的白细胞沉淀加入1ml TRIzol。室温放置5min，使样品充分裂解。4. 4 12,000 rpm 离心10分钟，取上清（）。5. 每1ml TRIzol加入200l氯仿，剧烈振荡混匀后室温放置3-5 min，自然分相。6. 4 12,000rpm离心10-15min。样品会分成三层：黄色的有机相，中间层和无色的水相，RNA主要在水相中，把水相转移到新管中（小心吸取水相）7. 在上清中加入等体积冰冷的异丙醇（），室温放置10-20min。8. 4 12,000 rpm离心10min，弃上清，RNA沉淀于管底。9. RNA沉淀中加入1ml 75%乙醇（用RNase-free水配制，），温和振荡离心管，悬浮沉淀。10. 4 5,000-8,000 rpm离心1-2min，弃上清。11. 室温放置1-2分钟晾干沉淀。12. 沉淀中加入50-100l RNase-free水，轻弹管壁，以充分溶解RNA，-70保存。13.
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