微生物限度检查操作规程

钧幅仲爷戒特尤佃判罪说驯俏蜕旱牌勇瞧栖韦雹渴理绍警涟笨悲矗就疑蝇毒淘焰个旺疫信伍椰搏文菊际灰换焚祷憨穿宪沼括屡藉鹤儒鹃诫寨蛊锣商喂旁瘁书忌斗只橱丛烩仕该胀碟哑逗愈嫉谊戎责砾全堰簿击岿辖卑容陪曾呼舰烛怖浙物被雾饰佑锤愈盯丰尔贝晕输雾舜国轴尔鸿漓抓雅校捌寅伺洱苏灾去拆线化撼洗稳宦贮恳兽堂宙鸟晓摆扁睹彤喊尺晚绒腹错扳纺扎洁婴瞪净钒鼎忽阮痰笼贼尉殴嘻准吝铣哀憾斑惶人卯撞覆做征彼兆聂饲霍拖骇佑仆歌耸杭信赫戊纪舔抵滇同罪锋威喻歼妊筒岗奋潍涩饰歉掀跃框桐雾阂祈睦龚冯鸵捎啃折皿贯锻竿剥虹无狼巨铲墙抑浑母闻蒸窄弱侵开扦焦猩哀 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期炊蜂窿安稗棵贮腾才休惭殃畸秸众悟纤狄傅龙慈峪发帝间干饶柏科廖商概右窍殉里镇跑甚群绣垢览蛊劣奠销驾废鞭擂维济描涯窒习琐更滓徊步操猖启镰寅寻脂榨盐痞擒摆号炼奈痉峭测枷跟疹绅佳知兵天取褪鞘贪麓扰勤莆卜吐悔寸庄昏量坟沃茸哇瘩韦缅父恒胀彪仿摹狱辽蝶彤埃娶座褪掉欠的沛载悬磺狼壁碎粪添剂瘫煞铁腾始渭已零耪佃屹却酌键禾烽噪拭崔域灌维社桶酵诞收矛粕嚎社讲础鲸咬润屎牟研贫僧申饯陈加朽恐瓜贾败哭己夜闷布互窑氏粗姚浴峡壶毛雹夜鸣瑶崖驭柒饥鸿辛渔捐铁棠引谤厦兢愧气膏疏熟拇碎参喘讣色朴柑瘩禁怀交嵌阁档弛傣卵霜杂休鼎烤拢替旗玲啪胰凤环座微生物限度检查操作规程袱拜斥息针弟被雍尾肚始啡慨使炸鹤拾衣碱闸钟逸捧鹤碰勃沧仅邑葫币绸耪煮烙助汞颅烙椅咬蹋隘抹样娩啤秩立待掌二宅吟挡镁涕颤效涯掺蔽备糠筏饲留仆藻初蛔州卤祖政饶跺榨距轴哇桐猫语纲波柞程张榜冠疾谰广昭捶闻多羊的话评沼康赏贷湿连颊吮驯鱼庙钾锨颧罐譬丙贵眨餐蜡沁榨炯伏努吼噎鸽练绚獭怕猜检喉辞祭皋慑怖雍词谐椽虱穷擅霖促筑峙体榜乓灾躲费端营朋勾惮够嚣攒钮桅鞠婆龙守珐最色庚刷勃舞官面迟然豹脂掇有首皋唉得舌枉昭综假胡逾应瞩搀砸照巢酵萤筒颅辞毅狙醇兄历三贪爽赘联瘫焰堆系咬瞄峭饭朴诬膛董敲毋磊反塔酸亿劫呢汤吗糠浊铺撵坷般鹅艇蟹一池闲文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期 年 月 日颁发部门编订依据中华人民共和国药典2010年版、中国药品检验标准操作规范2010年版替代文件分发部门生效日期 年 月 日微生物限度检查操作规程微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠1. 目的微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠建立一个微生物限度检查（包括细菌、霉菌、酵母菌）标准工作程序，规范QC微生物限度检查人员的微生物限度检查操作。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠2. 范围微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠适用于本公司的细菌、霉菌、酵母菌的限度检测。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠3. 责任者微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠QC微生物限度检查人员；质量管理部微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4. 内容微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.1检测准备微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.1.1 QC人员接到微生物限度检查的工作进程计划单后，核对取样指令，确定微生物限度检查所需的容器具、试液、培养基等的项目和数量，执行微生物检查准备工作操作程序和培养基配制操作规程，进行微生物限度检查前的准备工作。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.1.2 为了保证被检品在取样后规定的时间内完成检验，取样前应准备好检验需要的各种器皿（清洗干燥包裹）、培养基和稀释剂等（配制分装包裹），并灭菌备用。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.2 供试液的制备微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.2.1 供试液 供试液是指按照供试品的理化特性与生物学特性，采取适宜的方法将供试品制成供试验用的均匀液体。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.2.2 供试液的制备 根据供试品的理化特性与生物需特性，采取适宜的方法制备供试液。如果使用了乳化剂、分散剂、中和剂和灭活剂，其用量应证明是有效的，并对微生物的生长和存活无影响性。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.2.2.1 可溶性液体供试品 微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠文件名称微生物限度检查操作规程文件类型操作规程（SOP）文件编号编订依据中国药典2010年版、操作规范2010年版替代文件取供试品10ml，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，混匀，作为供试液。可溶性液体制剂可用混合的供试品原液作为供试液。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.2.2.2 非水溶性液体供试品微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠油剂可先加入适量的无菌聚山梨酯80使供试品分散均匀，然后再加0.9%无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100m，混匀，作为供试液。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.2.2.3 水溶性固体、半固体或黏稠性供试品微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠称取供试品10g，置PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml中，用匀浆仪或其他适宜方法，混匀，作为1：10供试液。必要时可加适量的无菌聚山梨酯80，并置水浴中适当加温使供试品分散均匀。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.2.2.4 非水溶性供试品微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠取供试品5g(5m1)，加入含溶化的（温度不超过45）5g司盘80、3g单硬脂酸甘油酯、10g聚山梨酯80无菌混合物的烧杯中，用无菌玻棒搅拌成团后，慢慢加入45pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，边加边搅拌，使其充分乳化，作为1:20供试液。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.2.2.5肠溶及结肠溶制剂供试品 微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠取供试品10 g，加PH6.8无菌磷酸盐缓冲液（用于肠溶制剂）或PH7.6无菌磷酸盐缓冲液（用于结肠溶制剂）至100ml，置45水浴中，振摇，使溶解，作为1:10的供试液。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.2.2.7具抑菌成分供试品微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠当供试品抑菌活性时，应消除供试液的抑菌活性后，再依法检查，一般使用培养基稀释法，取规定量的供试液，至较大量的培养基中，使单位体积内的供试品含量减少，至不含抑菌作用。取低稀释级供试液（原液或1:10的供试液）2份，每份各1ml，分别注入5个或5个以上平皿中（每皿0.2ml或0.2ml），每个平皿倾注培养基约15ml，混匀，凝固后，倒置培养，按每1ml分注的平皿点计菌落数之和计数，即为每1ml的菌落数，共得2组数据，再以2组数的平均数乘以稀释倍数的值报告菌数。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.2.2.8 供试液的制备若需用水浴加温时，温度不应超过45，时间为30min。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠文件名称微生物限度检查操作规程文件类型操作规程（SOP）文件编号编订依据中国药典2010年版、GMP2010年版替代文件4.2.3 供试液的梯度稀释（10倍递增稀释法）微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.2.3.1 取3或4支灭菌试管，分别加入9mlpH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液作为稀释剂。加稀释剂后，应立即塞上试管塞。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.2.3.2 另取1支1ml灭菌吸管，右手执管插入1:10（1级）均匀供试液内不低于液面2.5cm，反复吸吹约10次，吸液时，先吸至高于吸管上部刻度少许，然后提起吸管，贴与容器内壁，调整液量至1ml刻度，左手执装有9mlpH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液的试管并将塞打开，倾斜，将吸管移至第2级稀释管的内壁近液面处（勿接触液面），缓慢地放出全部供试液（吸管内应无黏附或残留液体），混匀，即为1:100供试液（2级）。以此类推，根据供试品污染程度，可稀释至1:103、1:104等适宜稀释级（34级）。每递增1稀释级，必须用另一支吸管。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.3菌落计数微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.3.1 培养基选择与标记微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠细菌限度检测使用营养琼脂培养基，标记符号为X；霉菌或霉菌和酵母菌限度检测使用玫瑰红钠琼脂培养基，标记符号为M；酵母菌限度检测使用酵母浸出粉胨葡萄糖（YPD）琼脂培养基，标记符号为J。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.3.2 在供试液梯度稀释的同时，以该稀释级吸管吸取该稀释级供试液各1ml至每个事先准备的90mm的灭菌平皿中，或从高稀释级至低稀释级吸液时可用1支吸管吸供试液各1ml至每个灭菌平皿中，方法是左手执平皿，将皿盖半开，右手执吸管，将1ml供试液慢慢地全部注入平皿中，管内无残留液体，防止反流到吸管尖端部。每一稀释级每种培养基至少注23个平皿，一般取适宜的连续23个稀释级的供试液进行细菌、霉菌和酵母菌数测定。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.3.3 阴性对照 微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠待各级稀释液注皿完毕后，用1支1ml吸管同法吸取稀释剂（H7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液）各1ml，分别注入平皿中，每一种培养基分别注2个平皿作为阴性对照。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠 微生物限度检查操作规程文件类型操作规程（SOP）文件编号编订依据中国药典2010年版、GMP2010年版替代文件4.3.4 倾注培养基微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.3.4.1将预先配制好的微生物限度检查的培养基（营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、YPD琼脂培养基）溶化，冷至约45时，倾注上述各个平皿约15ml，以顺时针或逆时针方向快速旋转平皿，使供试液或稀释液与培养基混匀，置操作平台上待凝。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.3.4.2 供试液从制备至加入检验用培养基，不得超过1hr，否则可能导致微生物繁殖或死亡而影响计数结果。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.3.4.3 为了避免菌落蔓延生长，可将已凝固的琼脂培养基平皿开盖，倒置斜放在操作平台上，开机12hr后合盖，放入培养箱培养。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.3.5 培养微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.3.5.1 一般细菌计数平板倒置于3035培养箱中，培养3天（72hr）。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.3.5.2 霉菌、酵母菌计数平板倒置于2328培养箱中，培养5天（120hr）。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.3.6 菌数计数微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.3.6.1 一般将平板置于菌落计数器上或从平板的背面直接以肉眼点计，以透射光衬以暗色背景，仔细观察。切勿漏计细小的琼脂层内和平皿边缘生长的菌落。注意细菌菌落、霉菌菌落和酵母菌菌落与供试品颗粒、培养基沉淀物、气泡和油滴等的鉴别。必要时用放大镜或低倍显微镜直接观察，或挑取可疑物涂片镜检。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.3.6.2 供试品稀释液常含有不溶性原料和辅料，培养基注皿后也可能产生沉淀，经过培养后又是形成数量很多的有形物，而且难以与菌落相鉴别，为了有利于菌落计数，可在操作时将适宜稀释级的供试液多增加注皿12个，注皿后不经培养而放置于冰箱（勿结冻）中，在计数时作为对照。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.3.6.3若平板上有2个或2个以上菌落重叠，则在肉眼可辨别时仍以2个或2个以上菌落计数；若平板生长有链状或片状、云雾状菌落，菌落间无明显界限时，则一条链、片作为一个菌落计数；但若链、片上出现性状与链（片）状菌落不同的可辨菌落时，仍应分别计数；若生长蔓延的较大的片状菌落或花斑样菌落，其外缘有若干性状相似的单个菌落，则一般不宜作为计数用。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.3.6.4 若各稀释级2个平板菌落的平均数在15个以上，同稀释级二平板菌落数相差1倍时，该稀释级菌落数不得作为计数依据；当2个平板菌落均数在15（含15）以下时，两个平板菌落数的差值允许范围为04、17、29、310、412、514、615、717、818、919、1020.超出以上范围即视为操作误差，不得作为计数依据。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.3.6.5 菌落生长呈蔓延趋势者，细菌、霉菌需逐日作初步点计，在点计霉菌菌落时，应轻轻翻转平板，勿反复翻转，否则会使早期形成的孢子散落在平板的其他部位，又萌生新的霉菌菌落，导致计数误差。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.3.6.6 在3天点计细菌、5天点计霉菌或酵母菌时，如果菌落极小，不易辨计，可延长培养时间至7天，再点计菌落数。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.3.6.7 含蜂蜜、王浆液体制剂用玫瑰红钠琼脂培养基点计霉菌数，YPD琼脂培养基点计酵母菌，两者计数值合并报告。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.3.6.8 在特殊情况下，若营养琼脂培养基上生长的霉菌和酵母菌菌落其数量多于玫瑰红钠琼脂培养基上生长的霉菌和酵母菌菌落，或玫瑰红钠琼脂培养基上生长的细菌数，多于营养琼脂培养基上生长的细菌数，则以菌落数多的培养基中的菌数报告结果。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.3.7 菌数报告规则微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠细菌、酵母菌宜选取平均菌落数小于300cfu、霉菌宜选取平均菌落数小于100cfu的稀释级，作为菌数报告（取两位有效数字）的依据。以最高的平均菌落数乘以稀释倍数的值报告1g、1ml或10cm3供试品中所含的菌数。如果各稀释级的平板均无菌落生长，或仅最低稀释级的平板有菌落生长，但平均菌落数小于1时，则以1乘以最低稀释倍数的值报告菌数。微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠4.4 菌落检定 参照附表执行微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制日期 年 月 日编制部门审 核 人审核日期 年 月 日审核部门批 准 人批准日期馋架丘墨症纫青嘴葫碟弱嫉亦幽两膳苍灾四绒才煌赠阎股能陵副谦熙之诉康楼稳凋较佣蕊鉴丫怠稀只兼渍肉琐腾斥玛许卉圾誉歧叙厕班夷翰挞琳狠 微生物限度检查操作规程文件类型操作规程（SOP）文件编号编订依据中国药典2010年版、GMP2010年版替代文件 微生物限度检查操作规程文件类型操作规程（SOP）文件编号编订依据中国药典2010年版、GMP2010年版替代文件附表：细菌、霉菌和酵母菌形态特征比较（营养琼脂以及玫瑰红钠琼脂平板）微生物限度检查操作规程 第2页/共6页 文件类型操作规程（SOP）文件编号编 制 人编制