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文档简介
.,1,第七章农药及其代谢产物的测定,.,2,第一节有机磷农药,一、理化特性,代谢(氧化、还原、水解、结合),二、代谢和生物监测指标,吸收,分布,排泄,毒作用,.,3,生物监测指标,1、血液中有机磷农药接触性生物标志物2、血液中胆碱酯酶活性效应性生物标志物,轻度中毒:正常人的70%50%中度中毒:正常人的50%30%重度中毒:正常人的30%以下,.,4,三、样品采集及保存,2、血液中胆碱酯酶活性的测定,1、血液中有机磷农药的测定,四、血液中有机磷农药的测定,.,5,1、测定原理,3、样品处理和测定,2、色谱条件,担体:ChromsorbW-HP,80100目,固定液:SE-30,甲基硅橡胶,四、血液中有机磷农药的测定,4、注意事项,.,6,(一)三氯化铁分光光度法,1、测定原理,五、全血胆碱酯酶活性的测定,红棕色羟肟酸铁络合物,520nm,2、绘制标准曲线,.,7,2、绘制标准曲线,3、样品处理和测定,取A和B两管,各加入水0.96ml及耳垂血40u1,摇匀,置于37水浴中,预热510min.,向样品管A中,加乙酰胆碱标准液1ml,准确计时,于370.5水浴30min后,立即加碱性羟胺4ml,振摇3min终止反应.,向对照管B中,先加碱性羟胺4ml,振摇3min,再加乙酰胆碱标准液1ml。,.,8,3、样品处理和测定,取A和B两管,各加入水0.96ml及耳垂血40u1,摇匀,置于37水浴中,预热510min.,向样品管A中,加乙酰胆碱标准液1ml,准确计时,于370.5水浴30min后,立即加碱性羟胺4ml,振摇3min终止反应.,向对照管B中,先加碱性羟胺4ml,振摇3min,再加乙酰胆碱标准液1ml。,向A和B两管中,各加1+2盐酸2m1,振摇1min,然后各管加10三氯化铁溶液2ml,摇匀,过滤。于520nm处测定吸光度。,.,9,4、结果计算,被水解乙酰胆碱的吸光度B管吸光度A管吸光度,被水解乙酰胆碱的量(mol),40u1血胆碱酯酶活性绝对值(C),全血胆碱酯酶活性值(mol/ml)C/0.04,正常人全血胆碱酯酶活性值,胆碱酯酶活性百分数,接触者全血胆碱酯酶活性值,100%,5、注意事项,.,10,1、测定原理,(二)DTNB分光光度法,412nm,2、绘制标准曲线,.
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