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文档简介
根据人们的欲望进行严格的设计,通过体外DNA重组和基因改造等技术赋予生物新的遗传特性,创造更适合人们需要的新生物类型和生物产品。基因工程也称为DNA重组技术,因为它是在DNA分子水平设计和构建的。遗传工程是什么,遗传工程培育抗虫棉的简单过程:提取,抗虫基因,结合载体DNA导入,棉细胞(包括抗虫基因),棉植物(包括抗虫特性)(2)理论基础:其他生物共享一套密码子。(3)技术基础:载体和工具酶的发现。解决抗虫棉栽培关键阶段需要什么工具?1,基因剪刀限制核酸内切酶2,基因缝线DNA连接酶3,基因携带工具运输载体,基因剪刀限制核酸内切酶从原核生物中分离并纯化的酶。识别双链DNA分子的一种特定核苷酸序列,以及每条链特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键分离。eco rigaat TC CTT AAG-bam hi-gg ATCC 3354 cc tagg-,限制性核酸内切酶Eco ri。7,粘性末端是什么?限制酶切割的DNA的单股切口上附着了几个相互补充的核苷酸,这种切口称为粘性末端。8,T,磷酸二酯键,A,9、10,酶识别序列限制:11,切割DNA分子时产生的两个不同的端,12,酶识别特性限制,中心轴两侧DNA上的基本对称,重复阵列(例如gaattccgggcttaaggccc,13,1,限制性核酸内切,主要来源:种类和命名:约4000种作用特性:4。酶识别序列限制5。结果:特定核苷酸序列识别,原核,粘性末端或平端生成,Goon,磷酸二酯键合阻断,特异性,大部分限制性酶识别顺序由6个核苷酸组成,4个,5个或8个核苷酸构成的识别序列,14,2,“分子缝合针”DNA结合酶,在:的作用下,将被切割的DNA片段结合成新的DNA。马上让脱氧核糖和磷酸连接起来。作用原理:催化形成双酯键,15,可以“缝合”粘着端之间的间隙,EcoliDNA结合酶或T4DNA结合酶,用限制性酶切掉的两个核苷酸之间的磷酸二酯结合体恢复,16,T4DNA连接酶“缝合”平端之间的缝隙,但效率低下,T4DNA连接酶,质粒,目的基因,限制酶处理,一个切口的两个粘性末端,两个切口获得目的基因,过程,18,DNA连接酶和DNA聚合酶是一样的吗?怎么了?1)将一个核苷酸连接到现有的核酸片段(引物),磷酸形成酯键,1)在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键,2)使用一条DNA链作为模板,将单个核苷酸通过磷酸二价结合连接到一条互补的DNA链,2) DNA双链中的两个空隙同时存在,19,e colid na连接酶,T4d na连接酶,起源,功能,大肠杆菌,T4噬菌体,磷酸二酯连接恢复,只连接粘性末端,粘性末端和末端的连接(效率低下),同点,差异,DNA连接酶种类体质和噬菌体动植物病毒等,携带基因的载体载体。21,最常用:大肠杆菌质粒,22,常用载体:质粒,带有复制插入的目的基因,一起复制,具有切割胃,具有标记基因的存在,可以用含有氨苄西林的培养基确认,24,教科书知识审查,遗传工程或。通俗地说,就是按照人的意思提取一种生物,放入另一种的细胞,改造该生物的遗传性状。,基因结合技术,DNA重组技术,基因,转化,方向,位置。25,分子手术刀-分子缝合针-分子运输车-限制性酶,DNA结合酶,基因进入受体细胞的载体,26,DNA结合酶,1,种类:2,作用部位:EcoliDNA结合剂,T4DNA结合剂,1。在以下关于限制性核酸内切酶的叙述中,错误的是()a .可以在特定部位剪切DNA分子。b .同一种酶切割其他DNA而产生的粘着性末端切得很好。c .它可以任意切割DNA,形成很多DNA片段。d .每个限制性核酸内切酶只能识别特定的核苷酸序列。,2。基因工程,切割包含质粒和目的基因的DNA片段()a .同种限制性核酸内切酶b .两种限制性核酸内切酶c .同种DNA结合酶dDNA结合酶的作用是()a .在DNA子链和母链之间形成氢键,b .在粘性末端之间形成氢键,C. DNA分子中脱氧核苷酸和磷酸之间的化学键d .以上任何一个都没有错,以下对30,4基因工程的叙述不准确()a,基因工程的原理是,利用基因重组b,基因工程技术,生物可以向另一种生物的DNA分子传递立体定向变异c,一种生物的基因,D,非同源染色体上非等位基因的自由组合,练习,D,3。限制性核酸内切I的识别序列和触点为gcc 1,限制性核酸内切ii的识别序列和触点为1GATC 1。质粒有酶I的触点,目的基因的两侧有酶的触点。请画质粒被限制性核酸内切酶I切割后形成的粘性末端。请画出目的基因两侧被限制性核酸内切酶切割后形成的粘性末端。32,已知的标记基因有抗四环素基因和氨苄西林基因,现在看看哪些细菌的质粒有标记基因或标记基因,怎么样?设计实验,预测实验结果,得出相应的实验结论。对照组:不添加抗生素,按一定浓度添加四环素,实验组2:添加氨苄西林恒定浓度,实验组3:添加四环素和氨苄西林恒定浓度,练习,同时包括四环素基因和氨苄西林耐药基因,
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