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文档简介

苏州工业园区职业技术学院,UF-100尿沉渣分析仪检测原理及故障分析指导老师:朱晓芹,项目组成员,王硕组长分配任务协调各组员之间的工作最后校对钟凤秘书查找资料制作PPT吴浩杰查找资料填写项目高静查找资料策划、填写项目报告手册,项目目标,掌握和了解尿沉渣分析仪的检测原理与故障分析,并努力在这基础上对检测原理进行改进,让大家更深入的了解尿沉渣分析仪的原理和使用方法。,小组口号,团结就是力量只有做不到,没有想不到用今天的努力创造明天的辉煌,一尿沉渣分析仪的概述,1.1、尿沉渣分析仪概述尿沉渣显微镜检查是尿常规不可缺少的一部分。可识别尿中细胞、管型、结晶、细菌及寄生虫等。目前,尚无任何一台先进的仪器可以取代显微镜对尿沉渣的检查,尿化学分析一检查结果仅是一种筛查。尿化学检查与显微镜查起互补作用。近年来,除了利用普通显微镜检查,还用相差显微镜或扫描电镜观察血尿中不典型红细胞变化以鉴别血尿来源;用干涉显微镜下识别各种管型的“三维空间”,内部结构更加清晰;用投射电镜可以把细菌管型、白色念球菌管型、血小板管型鉴别出来,这在普通光学显微镜下常误为颗粒管型;用偏振光显微镜检查沉渣,易于识别脂肪管型中的成分。为此,尿沉渣显微镜检查还在发展。,1.2、UF-100尿沉渣分析仪介绍,UF-100尿沉渣分析仪是全自动的尿液细胞分析仪,专为临床实验室的尿液体外分析而设计。此医学仪器能对正常和异常的样本进行筛选,并能提示样本包含的异常项目。实验室将对异常样本做最后的确定。运用流式细胞技术,分析仪能自动地对尿样中的有形成分进行混合、抽吸并分析。仪器通过对前向散射光(FSC)、荧光(FL)和电阻抗(IMP)的直接检测,可以自动地计数5种成分。UF-100还可以为提供精确的筛选,指导尿液分析异常的病人做进一步的检查。,1.3尿沉渣分析仪的临床应用,UF-100尿沉渣自动分析仪通过对前向散射光形波(散射光强度和散射光脉冲宽度)、荧光波形(荧光强度和荧光脉冲宽度)和电阻抗值的大小综合分析,得出细胞的形态、细胞横截面积、染色片段的长度、细胞容积等信息并绘出直方图和散射图。仪器通过分析每个细胞信号波形的特性来对其进行分类。1.前向散射光信号主要反映细胞体积的大小2.Fsc(前向散射光强度):反映细胞横截面积3.Fscw(前向散射光脉冲宽度):反映细胞的长度4.荧光信号反映细胞染色质块的大小5.Fl(荧光强度):反映细胞染色质的强度6.Flw(荧光脉冲宽度):反映细胞染色质的长度,1.4尿沉渣分析仪的主要特性,1.红色半导体激光流式细胞技术、全新特异性DNA/RNA细胞荧光染色技术。2.双通道(沉渣通道/细菌通道)、多角度散色光、多级别荧光强度、新参数、更多信息。3.准确定位尿中各有形成分,完善诊断的高效性。4.红细胞形态分析,提供临床诊断血尿来源的明确依据。5.白细胞高精度分析,协助临床对急慢性感染的监控、治疗和预后判断。6.尿电导率分级定量,反映肾功能及尿液浓缩功能的有效指标7.独立细菌检测通道和特异性的核酸荧光染色技术,精确判断尿中致病性球感菌,有效筛选尿路感染。8.完善的质量控制体系,使尿中有形成分定量检测实现标准化。9.原厂配套的中文尿检管理软件和人性化的中文操作界面,实现了尿液的整体化检测。,二、UF-100尿沉渣分析仪的结构和工作原理介绍,2.1、尿沉渣分析仪的结构尿沉渣分析仪的结构如图2.1、2.2所示图2.1主机正面视图(左侧),图2.2主机左侧视图(背面),2.2、尿沉渣分析仪的工作原理介绍,该仪器运用流式细胞术及特殊荧光染色原理,将尿液标本经染色后,靠液压作用进入鞘液流动池时,被一种无粒子颗粒的鞘流液包围,使尿液中的每个有形成分(细胞、粒子)单个纵列通过流动池中心轴线,每个粒子均被亚激光光束照射,并各自发出不同的荧光强度(信号)。尿沉渣细胞信号可表达为三类:即前向散射光、荧光和电阻抗。如图2.3所示,图2.3尿沉渣分析仪测定原理分析图2.2.1:尿沉渣分析仪测定原理示意图,三、尿沉渣分析仪检测原理分析,3.1分析原则1、尿细胞分析原理尿样被稀释和染色后,加压集中穿过鞘流体室,在那儿每个尿细胞被暴露在氩激光束下。样品的单个细胞发出荧光和散射光是不同的。每个尿细胞散射光的强度、荧光强度和电阻抗转化为电信号,分析电信号后区分出单个尿细胞。2、检测部位UF-100的检测位包括光学检测系统和电阻抗检测系统,如下图所示:,UF-100检测位,3.2、流式细胞计数,全自动尿有形成分分析仪UF-100运用流式细胞计数(FCM)技术,获得尿细胞的前向散射光强度和荧光强度参数。尿样品稀释和染色后,加压集中通过鞘流室。当反应后的样品从样品喷嘴出口进入鞘流室,将被鞘液试剂包围。尿细胞以单行形式逐个穿过流室的中心(垂直)轴。这儿每个尿细胞经过氩激光的照射呈现不同程度的荧光和散射光强度。每个尿细胞的散射光强度和荧光强度转化为电信号,产生相应的直方图和散点图。(参照下图所示)从激光源向前发出的散射光称为前向分散光(FSC),反映细胞的大小。从染色尿细胞发出的荧光反映了细胞的定量属性,例如细胞表面抗原,细胞质内部抗原和核酸(RNA和DNA的量)。关于单个细胞的荧光显微镜分析需要100,000或更多的荧光分子。自从流式细胞计数对于单个细胞仅用3000到5000个荧光分子就可进行分析后,它就确保了此种分析的高精确度。UF-100能够分析尿中有形成分如红细(RBC),白细胞(WBC),上皮细胞(EC),管型(CAST)和细菌(BACT),并且定量显示。,流式细胞计数系统,3.3、电阻抗检测方法,电阻抗检测方法检测电阻的变化。两个电极附着在管口的两端,连续的直流电通过电路。当尿细胞通过管口时,两极间的电阻改变。由于细胞和稀释液的电导率或电阻存在着很大差异,当细胞通过管口时,电阻增强,引起两极间和电阻变化成比例的电压变化。通过管口的细胞体积与电压变化成比例,此数值可以通过欧姆定律显示:V(电压)=I(电流)R(电阻),若两极间电流I固定,电压V根据电阻R的变化而变化。也就是说,但带有较大电阻的细胞穿过,电压增大。因此,电压根据细胞的大小而改变。可以通过将电压作为脉冲波来测出细胞的大小。由于尿标本的电导率是易变的,它将影响电阻抗检测的敏感度。得到不精确的分析数据。为使尿样的电导率稳定,运用URINOPACK稀释样品。一些结晶,譬如对分析有不利影响的非定形尿酸盐结晶,将通过URINOPACK中含有的蛰合物和染色过程中的预温处理而被去除。在注入流体室之前,稀释后样品的电导率已被测量。然后根据这个电导率,检测电流会有所补偿使电压稳定,这个电导率也是与渗透压度密切相关的临床参数。,电阻抗检测系统,3.4、光学系统,光学系统由氩激光(波长:488nm),激光反射系统,流室,前向光集电器和前向光检测仪组成。由波长稳定的,高能量的,高度的方向性的激光作为光源用于流式细胞计数系统,光束直接由二色镜反射,聚光器收集,形成以光点,汇聚于流室中的样品上。样品发出的前向光被聚光器收集,发送至图像检测仪。所收集的前向光由二色过滤器区分为前向散射光和前向荧光。前向散射光通过图像两极真空管转化为电信号。前向荧光通过光电倍增管转化为电信号。,光学系统原理,3.5、电路系统,样品的前向散射光很强,无需高灵敏度的图像检测仪。图像两极真空管将光转化为电信号。前向荧光较弱,需要高灵敏度的光电倍增管作为图像检测仪。光电倍增管吸收光电表面(阴极)的光子能量。借助金属光电的影响,放射光电子。由于外加电压,放射出的光电子增速并生成许多继发电子,引起增幅。极大的增幅后,前向荧光转化为电信号。流室中检测出的电阻抗信号也由于独有的增幅电路而增强。这些电信号由波形处理器测量和处理,然后由微处理器分析和存储。参数(散射光的强度和脉冲波宽度,荧光的强度和脉冲波宽度,高阻抗值)在平面坐标上综合设计,画出散点图。散射光和荧光的强度以及已分类的尿细胞数量用直方图显示(仅用于红细胞和白细胞)。,电路系统,3.6、主机电路系统,主机微处理器控制水路,电磁阀和主阀。然后通过水路控制样品流,试剂和废液。来自检测部的信号在模拟单元处理后发送至波形处理线路。清除噪音,只产生所需的尿细胞信号。微电脑将模拟信号转化为数字信号,然后测定和显示结果,将数据存入存储器。,主机电路系统块图,四、UF-100尿沉渣分析仪常见故障分析,1、通过关机可消除报警,开机后出现报警:“SheathMotorFunctionError”,“AnalysisError”突然的噪音干扰或移动,有时可以通过关机消除报警。2、通过“ErrorCover”消除报警,进样管碰撞、管架移动错误、管架放置错误、压力错误、浮子开关错误等,可以在主菜单上按“Maint”键,接着按“ErrorCover”消除报警。3、压力及真空值校准,压力错误通过“ErrorCover”无法消除时,在主菜单“More”后按“Status”,参照屏幕上的显示,调解左边相应旋钮,可以调准2.2kgcm(215.74kPa)压力、0.5kgcm(49.03kPa)压力和53.33kPa(400mmHg)负压,使压力达到标准。若出现正、负压力泵及屏幕显示值过低,应检查相关管道有无漏气。4、自动进样器错误,清除轨道和试管架工作台上的污垢及异物,除去传感器的污物。将试管架复位并继续进行分析。当出现以下警告:RackMoveError1或RackMoveError2表示管架在移动时架底凹槽与2个黑色的滚动轴承之间磨合出错,此时需清洁管架凹凸处,另外检查滚动轴承是否旋转顺利,若滚动轴承阻力增大,需用无水酒精清洗数次即可。,5、试剂瓶错误,主要见于试剂量不足或浮子开关故障。检查试剂量,试剂量不足则需更换。如果以上报警不是由于试剂量的不足而引起的,则检查浮子开关,再按“ErrorCover”复位。6、手动方式结果正常,自动方式下不吸样,结果偏低,可能是混匀室管道堵塞或漏气,找出堵塞或漏气的位置,用CELLCLEAN或次氯酸钠清通或更换管道。7、手动和自动结果都偏低,甚至为零,检查吸样管路,如样本过滤器、SRV、FLOWCELL等是否堵塞。将过滤器拆下后,用注射器(接移液器头)加次氯酸钠冲洗,注

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