公开课 动物细胞融合与单克隆抗体

2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体,杂合的原生质体,杂种细胞,愈伤组织,杂种植株,温故知新:,植物体细胞杂交过程,材料1:1970年，有两位科学家做了一个人鼠细胞融合的实验，以证明细胞膜的流动性。那么，如何实现人鼠细胞的融合，动物细胞融合后还有什么用途呢？,人-鼠(想像图),植物细胞A,植物细胞B,原生质体A,原生质体B,原生质体融合,杂合的原生质体,杂种细胞,愈伤组织,杂种植株,如何实现人鼠细胞的融合？阅读教材52页相关内容，思考下列问题：,思考：1、动物细胞融合的概念是什么？2、动植物细胞在结构上有何区别？这对它们杂交或融合过程有什么影响？3、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？那动物细胞融合呢？4、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同？是什么原理？5、动物细胞融合有什么意义？主要应用在哪些方面？6、参照植物细胞杂交过程写出动物细胞融合过程。,杂合的细胞,2个完整的杂交细胞AB,如何实现人鼠细胞的融合？阅读教材52页相关内容，思考讨论下列问题：,小组活动，,讨论：7、植物体细胞杂交可得到杂种植株，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗?为什么？,植物细胞A,植物细胞B,原生质体A,原生质体B,原生质体融合,杂合的原生质体,杂种细胞,愈伤组织,杂种植株,获得杂种植株,去壁原生质体融合诱导新壁杂种植株,细胞膜的流动性,细胞膜的流动性,结果,诱导方法,步骤,融合的原理,动物细胞融合,植物体细胞杂交,比较项目,植物、动物细胞融合的比较,获得杂种细胞,小结1,材料2：在基因工程中,采用抗原-抗体杂交法检测基因表达产物需用到纯度很高的抗体。材料3：传统获得抗体的方法：把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体。用这种方法获得的抗体，不仅产量低，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不够灵敏。,思考：1、抗体由哪种细胞产生的？2、抗体的传统生产方法的缺陷是什么？3、能否通过相应效应B细胞体外培养的方式大量获得抗体?,材料4：效应B淋巴细胞在体内只能由B淋巴细胞增殖分化而来,不再进行分裂,在体外培养的条件下，也很难分裂。,提示：,1.什么细胞可以产生抗体？2.什么细胞可以无限增殖？,思考：用什么方法才能让B淋巴细胞在体外培养时既能产生抗体又能无限增殖?,材料5：1975年,米尔斯坦和柯勒首先将抗原注射入小鼠体内，然后从小鼠脾脏中获得能够产生抗体的B淋巴细胞，与小鼠骨髓瘤细胞融合，得到多种杂交细胞。在特定的选择性培养基中可筛选出杂交瘤细胞。经过再次筛选和抗体检测,得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞。但纯度达不到100%。对单一杂交瘤细胞进行克隆培养,获得足够数量的细胞，在体外培养或注射到小鼠体内增殖。从细胞培养液或小鼠的腹水中，可提取出大量抗体。（由于产生抗体的细胞来自一个杂交瘤细胞,故产生的抗体称为单克隆抗体.）,请根据以上材料,讨论设计单克隆抗体制备过程图.,讨论：,B淋巴细胞,注射特定抗原蛋白,骨髓瘤细胞,培养骨髓瘤细胞,融合,多种杂交细胞,单克隆抗体的制备过程,结合单克隆抗体的制备过程，思考以下问题：1、（只考虑两两融合）融合细胞几种类型？2、本过程中进行了两次筛选，目的分别是什么？第1次筛选要淘汰哪些细胞？3、本过程利用的那些技术？4、杂交瘤细胞有何特点？,“生物导弹”单克隆抗体药物,诊断试剂,用于治疗疾病,1、特点：,特异性强，灵敏度高，产量高。,2、应用：,用于运载药物,优点：准确，高效，快速,单克隆抗体的特点和应用,单克隆抗体,B淋巴细胞骨髓瘤细胞,诱导融合,选择培养,杂交瘤细胞,克隆化培养,抗体检测,产生所需抗体的杂交瘤细胞,体外培养,小鼠腹腔内增殖,单克隆抗体,多种杂交细胞,1、该过程中用到了两种技术,小结2,单克隆抗体的制备过程：,动物细胞培养技术,动物细胞融合技术,2、单克隆抗体的制备过程的三个“一”：,一种诱导细胞融合的新方法，产生了一种新细胞，得到了一种优势抗体。,灭活病毒诱导融合,杂交瘤细胞,单克隆抗体优势：特异性强、灵敏度高，可大量制备,1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A.经过免疫的B淋巴细胞B.没经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞D.没经过免疫的淋巴细胞,A,巩固练习,2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）诱导融合的方法完全相同B.所用的技术手段基本相同C.操作步骤基本相同D.都能形成杂种细胞,D,3.单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是（）A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成,D,4.只能使动物细胞融合的常用诱导方法是（）APEGB灭活的病毒C电刺激D离心,B,5.单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（）淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞A.B.C.D.,C,6.“生物导弹”是指（）A.单克隆抗体B.杂交瘤细胞C.产生特定抗体的B淋巴细胞D.在单克隆抗体上连接抗癌药物,D,有梦想，才会有创造！,已成