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第15章免疫学检测方法及其原理,1解释血清学反应的概念和特点2叙述抗原抗体检测方法及用途3简述免疫标记技术的原理和方法4简述T细胞功能检测的方法,学习目标,第1节抗原和抗体的检测,一、原理,利用抗原抗体在体外特异性结合后出现的各种现象，可对样品中的抗原或抗体进行定性、定位和定量的检测,未知,抗体,抗原,已知,抗原,抗体,检测,检测,二、特点,3可见性,是抗原抗体检测的基本原理,是抗原抗体亲和度大小的体现,是形成可见复合物的关键,1特异性,2可逆性,三、常见的抗原抗体反应种类,1凝集反应（agglutination）,颗粒性抗原（细菌或细胞）与相应抗体结合后，在一定条件下，出现肉眼可见的凝集物，称凝集反应,直接凝集反应间接凝集反应,玻片法试管法,定性试验，如血型鉴定,半定量试验，如肥达反应,将可溶性抗原吸附于一种与免疫无关的颗粒状载体表面，成为致敏颗粒（免疫微球），再与相应抗体结合出现凝集现象称为间接凝集反应。,2沉淀反应（precipitation）,可溶性抗原（血清蛋白、外毒素、组织浸出液、细菌滤液等）与相应抗体结合，在一定条件下，形成肉眼可见的沉淀物，称沉淀反应。,（1）单向琼脂扩散试验,（2）双向琼脂扩散试验（3）对流免疫电泳3补体参与的反应（complementmediatedreactions）,4免疫标记技术（immunolabellingtechnique）,（1）免疫荧光法（immunofluorescencetechnique）,（2）免疫酶技术（immunoenzymatictechinques，EIA）,图15-5ELASA操作原理示意图,（3）放射免疫测定法（radioimmunoassay，RIA）,第2节免疫细胞及其功能的检测,一、免疫细胞数量的检测,流式细胞术,二、免疫细胞功能的检测,1T细胞功能的检测,（1）淋巴细胞转化试验,（2）细胞毒试验,2B细胞功能检测,B细胞增殖试验抗体形成细胞测定,3检测细胞免疫功能的皮肤试验,正常机体对特定抗原产生细胞免疫应答后，再用相同抗原做皮肤试验，即出现以局部红肿为特征的迟发性超敏反应，细胞免疫正常者呈阳性反应，而细胞免疫低下者则呈阴性反应。,第3节细胞因子的检测,1生物活性检测2免疫学检测法3生物学检测,第4节HLA分型技术,一、血清学分型技术,1HLA-类抗原的检测,HLA-A、B、C抗原型别鉴定常规使用微量补体依赖淋巴细胞毒试验（CDC试验）。,2HLA-DR、DQ抗原检测,二、细胞学分型技术,LA-Dw和HLA-DP抗原的特异性可用混合淋巴细胞反应
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