第十章 血脂及血浆脂蛋白检验.ppt

第十章血脂及血浆脂蛋白检验,教学目的和要求,熟悉血浆脂蛋白、载脂蛋白分类及特征熟悉脂代谢有关酶类与特殊蛋白质熟悉脂蛋白代谢掌握LDL受体途径掌握脂蛋白代谢紊乱掌握脂蛋白和脂质主要测定方法原理了解高脂蛋白血症的预防和治疗原则,重点血浆脂蛋白结构与受体脂蛋白代谢紊乱脂蛋白和脂质测定主要方法难点脂蛋白代谢受体途经脂蛋白代谢紊乱机制难点脂蛋白代谢受体途经脂蛋白代谢紊乱机制,概述,血浆脂类简称血脂，包括：游离胆固醇（freecholesterol，FC）胆固醇酯（cholesterolester，CE）磷脂（phospholipid，PL）甘油三酯（triglyceride/triacylglycerolTG）糖酯(glycolipids,GL)游离脂肪酸（freefattyacid，FFA）血浆中最多的脂质有胆固醇（总胆固醇totalcholesterol，TC）、PL和TG。血浆脂质总量为4.0-7.0g/L,第一节血浆脂蛋白一、血浆脂蛋白的分类二、血浆脂蛋白的组成和特征,一、血浆脂蛋白的分类,(一)超速离心法,乳糜微粒(chylomicron，CM),极低密度脂蛋白(verylowdensitylipoprotein，VLDL),低密度脂蛋白(lowdensitylipoprotein，LDL),高密度脂蛋白(highdensitylipoprotein，HDL),中间密度脂蛋白(intermediatedensitylipoprotein,IDL),（二）电泳法,根据血浆脂蛋白表面电荷量大小不同，在电场中，其迁移速率也不同，分为：乳糜微粒-脂蛋白前-脂蛋白-脂蛋白,超速离心法与电泳法分离血浆脂蛋白的相应关系,二、血浆脂蛋白的组成和特征,血浆脂蛋白结构,脂蛋白一般以不溶于水的TG和CE为核心，表面覆盖有少量蛋白质和极性的PL、FFA，从而使脂蛋白颗粒能稳定地分散在血浆中。,第二节载脂蛋白,脂蛋白中的蛋白部分称为载脂蛋白(apolipoprotein，apoprotein，Apo)。载脂蛋白在脂蛋白代谢中的生理功能：（1）构成并稳定脂蛋白的结构。（2）修饰并影响与脂蛋白代谢有关的酶的活性。（3）作为脂蛋白受体的配体，参与脂蛋白与细胞表面脂蛋白受体的结合及其代谢过程。,第三节脂蛋白受体,Brown和Goldstein于1974年研究家族性高胆固醇血症(familialhypercholesterolemia，FH)患者代谢缺陷时，在成纤维细胞膜上发现了LDL受体(LDLreceptor，LDLR)的存在。以后相继发现有VLDL受体和清道夫受体等。,一、低密度脂蛋白受体受体结构,由836个氨基酸残基组成36面体结构蛋白，分子量约115kD，由五种不同的区域构成。,LDL受体基因结构及功能,1人LDL受体基因长度45kD，由18个外显子和17个内含子组成。2受体亲和性含ApoB100的脂蛋白可与LDL受体以高亲和力结合。3.LDL受体广泛分布于肝、动脉壁平滑肌细胞、肾上腺皮质细胞、血管内皮细胞、淋巴细胞、单核细胞和巨噬细胞。,若胞内游离胆固醇浓度升高，则：抑制HMGCoA还原酶，以减少自身的胆固醇合成；抑制LDL受体基因的表达，减少LDL受体的合成，从而减少LDL的摄取；激活内质网ACAT，使游离胆固醇在胞质内酯化成胆固醇酯贮存，以供细胞的需要；,LDL受体途径：LDL或其他含ApoB100、E的脂蛋白如VLDL、-VLDL均可与LDL受体结合，内吞入细胞使其获得脂类，主要是胆固醇，这种代谢过程称为LDL受体途径。该途径依赖于LDL受体介导的细胞膜吞饮作用完成。,二、极低密度脂蛋白受体,结构与LDL受体类似。仅对含ApoE的脂蛋白VLDL、VLDL残粒有高亲和性结合，对LDL为显著的低亲和性。在肝内几乎未发现，广泛分布在代谢活跃的心肌，骨骼肌、脂肪组织等细胞.VLDL受体不受细胞内胆固醇负反馈抑制,三、清道夫受体,SR-A类清道夫受体,SR是一个大家族，按分子结构分为六大类:SR-A、-B、-C、-D、-E、-F。,SR-A类清道夫受体(SR-A）有6个结构功能区组成。该受体的I、型均由六个区域部分组成，包括:,清道夫受体配体谱广泛，有：乙酰化或氧化LDL。多聚次黄嘌呤核昔酸，多聚鸟嘌呤核苷酸。多糖如硫酸右旋糖酐、细菌脂多糖(内毒素)。某些磷脂，如丝氨酸磷脂(卵磷脂不是配体)。配体谱的共同特点均为多阴离子化合物。,清道夫受体配体,清道夫受体功能,可能有以下方面：,使细胞泡沫化，促进粥样斑抉的形成。,清除细胞外液修饰LDL，有防御功能。,具有清除血管过多脂质和病菌毒素等功能。,四、胆固醇酯转运蛋白,胆固醇酯转运蛋白（CETP）属于脂质转运蛋白（lipidtransferprotein，LTP），是由肝、小肠、肾上腺、脾、脂肪组织及巨噬细胞合成的一种疏水性糖蛋白，介导脂蛋白中各种中性脂质的转移和交换。cDNA编码的CETP含476氨基酸残基，分子量为53kD；成熟CETP含4个天冬酰N-糖链，分子量为74kD。,CETP对胆固醇的逆转运过程,第四节脂蛋白代谢,一、血浆脂蛋白代谢密切相关的酶类参与脂质代谢的酶有：脂蛋白脂肪酶（lipoproteinlipase，LPL）肝脂酶（hepatictriglyceridelipase，HTGL）LCAT等。,1LPL,LPL是脂肪细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、乳腺细胞以及巨噬细胞等实质细胞合成和分泌的一种糖蛋白，分子量为60kD。ApoC为其必需的辅因子。作用是分解脂蛋白核心成分的甘油三酯，并促使脂蛋白之间转移胆固醇、磷脂及载脂蛋白。活性LPL以同源二聚体形式存在，通过静电引力与毛细血管内皮细胞表面的多聚糖结合，肝素可以使此结合形式的LPL释放入血，并提高其活性。,2HTGL,HTGL亦称为肝性LPL（hepaticLPL）其特点：HTGL活性不需要ApoC作为激活剂；SDS可抑制HTGL活性，而不受高盐浓度及鱼精蛋白的抑制；主要作用于小颗粒脂蛋白如VLDL残粒、CM残粒及HDL，调节胆固醇从周围组织转运到肝，使肝内的VLDL转化为LDL。,3LCAT,LCAT由416个氨基酸残基组成，分子量为6.3kD，属于糖蛋白。LCAT由肝脏合成释放入血液，以游离或与脂蛋白结合的形式存在。作用是将HDL中的卵磷脂的C2位不饱和脂肪酸转移给游离胆固醇，生成溶血卵磷脂和胆固醇酯，使HDL变成成熟的HDL球状颗粒。,二、脂蛋白代谢,外源性代谢途径：饮食摄入的胆固醇和TG在小肠中合成CM及其代谢过程。内源性代谢途径：包括由肝脏合成VLDL，VLDL转变为IDL和LDL，LDL被肝脏或其它器官代谢的过程。HDL的代谢过程,1CM代谢,2.VLDL、IDL、LDL代谢,3HDL代谢,第五节脂蛋白代谢紊乱,一、高脂蛋白血症二、低脂蛋白血症三、脂蛋白代谢紊乱与动脉粥样硬化,一、高脂蛋白血症,高脂血症（hyperlipidemia）是指血浆中胆固醇和/或TG水平升高。由于血脂在血中以脂蛋白形式运输，因而实际上高脂血症就是高脂蛋白血症（hyperlipoproteinemia，HLP）。,（一）高脂蛋白血症的分型,（二）原发性高脂蛋白血症,1家族性多基因性高胆固醇血症2家族性高胆固醇血症3家族性异常-脂蛋白血症4家族性乳糜微粒血症5家族性高甘油三酯血症6其他家族性高脂血症,三）继发性脂蛋白血症,1糖尿病2甲状腺功能减退3肾脏疾患4肥胖症5酗酒6药物,（四）高HDL血症,血浆HDL-胆固醇（HDL-C）含量超过2.6mmol/L，定义为高HDL血症。CETP及HTGL活性降低是引起高HDL血症的主要原因。若CETP缺陷，HDL内的CE蓄积，使HDL增多；若HTGL活性降低，HDL被肝细胞摄取减少并使HDL2HDL3转换过程减慢而停留在血液中，并使其浓度增加，出现高HDL血症。,高HDL血症分为原发性和继发性两类原发性高HDL血症的病因有：CETP缺损；HTGL活性降低；其他。继发性高HDL血症病因有：运动失调；饮酒过量；原发性胆汁性肝硬化；治疗高脂血症的药物引起；其他。,二、低脂蛋白血症,（一）低脂蛋白血症的诊断血清TC在3.3mmol/L以下，或TG在0.45mmol/L以下，或LDL-C在2.1mmol/L以下者，属于低脂蛋白血症。TC和TG同时降低者多见，脂蛋白中多见HDL、LDL和VLDL降低。（二）病因原发性低脂蛋白血症的原因有ApoA缺乏或变异、LCAT缺乏症、无-脂蛋白血症（Tangier病）、无-脂蛋白血症、低-脂蛋白血症等。,三种无（低）脂蛋白血症的主要特点,三、动脉粥样硬化,(一)、动脉粥样硬化概述,(二)、引起AS的脂蛋白,(三)、HDL的抗AS功能,(四)、代谢综合征,AS是指动脉内膜的脂质、血液成分的沉积，平滑肌细胞及胶原纤维增生，伴有坏死及钙化等不同程度病变的一类慢性进行性病理过程。AS主要损伤动脉内壁膜凡能增加动脉壁胆固醇内流和沉积的脂蛋白如LDL、-VLDL、oxLDL等，是致AS的因素；,(一)、动脉粥样硬化概述,损伤动脉壁的内膜，严重时累及中膜是AS主要病理特征。常易受累及的是主动脉、颈动脉、冠状动脉、脑动脉、肾动脉及周围动脉等。,病理特征,CM和VLDL经LPL水解生成CM残粒与IDL，并转变成富含胆固醇酯和ApoE的颗粒沉积于血管壁。型高脂血症出现-VLDL，因为肝脏的残粒(ApoE)受体结合率降低，血中滞留的脂蛋白转变成-VLDL，经清道夫受体介导摄取进入巨噬细胞引起AS的增强作用。,(二)、引起AS的脂蛋白,脂蛋白残粒,变性LDL,LDL的蛋白组分经化学修饰，立体构像发生改变，生物学活性也有相应的变化，这种经化学修饰的LDL称为变性LDL或修饰,目前发现的变性LDL包括:乙酰LDL、氧化LDL、糖化LDL其中乙酰LDL中的ApoB100赖氨酸残基被乙酰化产生修饰LDL，激活巨噬细胞，使巨噬细胞摄取乙酰LDL而转变成泡沫细胞，促进AS形成。,B型LDL,血中LDL-C升高并被氧化是AS发生的前提条件LDL一般分为A型和B型亚组份:B型(小而密的LDL)，是AS发生强危险因素,含B型LDL为主个体,较含一般LDL者有三倍发生心肌梗死的危险性，LDL亚组份不同，CHD的发病率也不同。小而密LDL(SD-LDL)可能与遗传有关。,LP(a)存在于所有人群中，波动在0l000mg/L，Apo(a)的分