HIV感染的血清学检测ppt课件

，HIV感染血清学检查，1，PPT学习交换，内容，HIV抗体检查：HIV抗体检查HIV确认实验HIVP24抗原检查：2，PPT学习交换，HIV抗体检查，全国艾滋病检查技术规范监控目的的检查是为了了解不同人口的HIV感染率及其变化趋势，针对各种高危人群和普通人口。以诊断为目的的检查是为了掌握临床检查和自愿咨询检查、术前检查、特殊需要的身体检查等个别HIV感染状况而进行的。以血液检查为目的的检查是为了防止输血传播HIV，包括献血者筛选检查和原料血浆检查。HIV抗体检测包括筛选检查(包括初次筛选和重新检查)和确认测试，4，PPT学习交流，HIV抗体套件进展，2抗原方法特异性检测时间1所有病毒间接IgG抗体HIV-12个月2重组或多肽间接IgG抗体HIV-1/-23-4周3重组多聚程序选择检查、重新检查、确认原则酶联免疫吸附分析法、凝集、断层扫描血液、唾液、尿液、组织液产品ELISA、快速、简单、7、PPT学习交换、选择试剂的要求、HIV混合国家SDA生物诊断试剂的注册批准批检查通过临床评价筛选方法：常用的筛选方法包括酶联免疫试验(ELISA)快速测试(RT)和其他检测(1)明胶颗粒凝集试验(PA)(2)斑点EIA或斑点elis 酶结合HRP，AP或化学发光，11，PPT学习交流(a)斑点EIA或斑点ELISA(dot-EIA)以硝酸纤维膜为载体，将HIV抗原点燃到薄膜中，是固相抗原。 添加血清样本效果，后阶段如ELISA。阳性结果显示膜抗原部位有着色斑点。反应时间在10分钟以内，抗原使用较少。第二，快速诊断试剂，12，PPT学习交换，(b)免疫胶体金(或胶体硒)快速测试类似斑点EIA，以硝酸纤维膜为载体。不同的是，用红色胶体金(或胶体硒)a蛋白分解过滤法清洗抗体，而不是用酶标记。13，PPT学习交流，稳定性，室温长期保存。测试没有任何设备，快速、简便、特异性好，灵敏度大致相当于中度敏感性ELISA，适用于急诊检查、门诊急诊个别检查。有SFDA注册的进口试剂和国内产品。结果通常可以在1030分钟内解释。，免疫胶体硒快速测试特征，14，PPT学习交换，在样品垫：上血浆，血清或全血样品。红细胞在移动中被去除，捕获质量控制部分：固定硒标记的特定试剂，无论是否在样品中，都必须出现红线。控制测试结果的有效性，患者部分：固定特定分析试剂，与硒标准特定试剂相结合的所有分析复合物在此处组合形成鲑鱼粘结剂，肉眼可见的红线呈阳性反应，粘结剂部分：具有与分析特异性试剂相结合的硒标记，将分析物与硒标准试剂相结合，15，PPT学习交流，所需的测试笔记数去除，表面保护膜去除在样品垫上，添加全血样品和50ul样品，手指血液方法，静脉血液方法，一滴缓冲液，15分钟内阅读的结果，18，PPT学习交流，患者栏，质量控制栏，19，PPT学习交流，注意事项，不是EDTA抗凝剂的血浆.20，PPT学习交流，(c)HIV-1/HIV-2抗体同时检测唾液中包含HIVgp41/gp36蛋白抗原的HIV-1/HIV-2抗体，被发现为酶免疫间接法。主要检测唾液中的HIVIgA和IgG抗体，敏感性特异性与ELISA相似，避免静脉穿刺。但是样品预处理时间长，价格高。ELISA、WB(免疫印迹)试剂以唾液为样品测定HIV抗体，已被美国FDA批准。21，PPT学习交流，(4)明胶颗粒凝集试验(PA)PA是HIV血清抗体检测的简单方法，将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体，与检测对象样品作用，选择后混合绝热(一般为室温)。检查对象样本中含有HIV抗体时，抗原致敏明胶粒子产生抗体和抗原-抗体反应，根据孔中明胶粒子的聚集读取结果。PA试剂有两种，HIV-1和HIV-2抗原共同致敏的PA试剂(AFDHIV-1/2PA)，已获得我国食品药品监督管理局(SFDA)的注册批准；HIV-1、HIV-2抗原分别致敏的PA试剂(SERODIA-HIV-1/2)可以初步区分HIV-1型和HIV-2型，目前我国还没有引进。22，PPT学习交换，尿液测定，抽样优势，特别是吸毒者抽样机制：基于IgG，IgG少量HIV-1抗体阳性结果必须进行血清学检测，23，PPT学习交换，应用快速试剂，远程区域紧急临床(高风险)职业暴露林对有阳性反应的样品要重新检查，没有阳性报告。复验试验：对超导体具有阳性反应的样品，使用与原始试剂不同的原理或不同制造商的筛选试剂重复检查。如果两种试剂的再测试均为阴性，则报告HIV抗体阴性。如果有阳性反应或为1，就要发送艾滋病确认实验室确认。对第一次筛查有阳性反应的人不能发表阳性报告，可以发表“HIV抗体将被审查”报告。25、PPT学习交流，在第一次尸体检查中，传递了阳性反应样本：填写“HIV抗体复试检查表”，1名检查者及1名具有1名以上技术职称的1名检查和签名。发送地区艾滋病检查中心实验室，再发送到艾滋病确认实验室，或在本实验室重新检查后直接发送到确认实验室。筛选阴性和阳性的人都要检查后咨询。，26，PPT学习交流，HIV抗体初级体检测流程图，27，PPT学习交流，初级体检测结果报告，HIV抗体选择性检测结果报告：“-”HIV抗体阴性“报告(附录)不能产生阳性报告，正在研究HIV抗体确认检查方法：免疫印迹测试(WB)、条带免疫检查(liams )、放射免疫测试(RIPA)、免疫荧光检查(IFA)。国内常用的验证测试方法是WB。32、PPT学习交流，蛋白质印迹实验(WB)广泛使用的确认实验的基本原理HIV全病毒抗原由聚丙烯酰胺凝胶电泳分离出分子量不同的HIV抗原蛋白，并将其他已经分离的蛋白质用硝化纤维素膜带电。把这个膜切成条，每个硝化纤维素膜都含有电泳分离的HIV病毒抗原。33、PPT学习交换，将检查对象血清样品添加到硝化纤维素膜，恒温冲击，完全接触反应，与膜带结合，如果血清中含有抗HIV抗体。添加酶结合抗人IgG抗体和基质后，反应型抗原-抗体结合带呈紫色，结果取决于带发生的情况。34、PPT学习交流，蛋白质抗原分子通过电泳分离，血液中的抗体和抗原的反应，不同的绑扎形成，WesternBlot，35，PPT学习交流，方法，36，PPT学习交流，检测标本中HIV不同抗原的抗体，用作确认试剂各有不同的判定标准，37，PPT学习交流，WB结果判断标准，“不确定”():HIV-1特异性带出现，但带不足以确认阳性，每3个月进行一次随访，共两次，仍然可疑，否定判定，Env具有高非结构化总体和灯光、主要条带、高风险群、不确定性和其他特异性，但是检查泄漏、多种、操作技术、41、PPT学习交流、免疫博客(WB、HIV-1/2混合)、HIV-1阳性在随访期间，可以根据需要用辅助诊断检测病毒核酸及P24抗原。、语音反应、语音报告、选择性检测阳性反应样本、HIV-2血清阳性、免疫印迹方法(WB、HIV-2)、图2HIV抗体确认过程，44，PPT学习交换，肠易激，肠易激决定因素早期筛选试剂的质量和测试技术机体免疫反应病毒特性肠易激不可避免，45，PPT学习交换，P24抗原决定适用范围，HIV-1抗体不确定性或肠易激辅助诊断。HIV-1阳性母亲所生婴儿的鉴别诊断。第四代HIV-1抗原/抗体ELISA试剂呈阳性反应，但HIV-1抗体确认了阴性者的诊断。监测进展情况和抗病毒治疗效果。，46，PPT学习交换，检测原理，P24抗原测试一般采用ELISA夹心法，已知抗体为固相反应板孔，添加到试验血清中，包含P24抗体和封装抗原-抗体复合物的血清，酶(HRP)标记HIV-1抗体和抗原结合，气质，47，为了提高PPT学习交换，血清P24抗原检测灵敏度，ICDP24抗原(immun-complexdisassociate，immd)测定试剂用于HIV-1P24抗原测定。即使分解合成物，灵敏度高，P24抗原也只能在无症状感染者的约50%中检测出来。48，PPT学习交换，报告和解释结果，定性分析：1，HIV-1P24抗原的阳性结果必须通过中和试验确认。2、HIV-1P24抗原阳性仅用作HIV感染的辅助诊断标准，不能据此进行诊断。3、HIV-1P24抗原阴性结果在此检测中只是意味着没有反应，不能排除HIV感染。4、通过胎盘或母乳喂养从母亲那里收到的HIV抗体不能用于诊断母婴传播是否感染了HIV。婴幼儿体内从母亲那里得到的HIV抗体最长可持续18个月。通过HIV p24抗原检测、病毒分离培养、RNA