质量标准中有关物质测定方法的建立ppt课件

1、药品研究与生产过程中有关物质的控制方法和要求，化学二室谢风2005年4月、2月，在有关物质原料药物合成过程中引入制剂中发生的贮藏、运输、使用过程中发生。 控制的必要性，3、有关物质测定方法的仪器角度：高效液相色谱法(HPLC法)、薄层色谱法(TLC法)、紫外分光光度法(UV法)、气相色谱法(GC法)、毛细管电泳色谱法(CE )等试验角度：对照品法本身(稀释)对照法的正规化有关物质计算方法的杂质对照品法的响应因子(重量修正因子)计算的自对照法，不计算响应因子的自对照法采用因杂质不同而不同的方法等。 关于物质计算方法的定量检查和限度检查，5、高效液相色谱法(HPLC法)、1 .色谱条件的确定(即专业性试验)提供了被分析物在杂质和辅助材料存在时能够区别的证明，通常通过在纯物质(原料或制剂)中添加一定量的杂质或辅助材料，从而确定各杂质制备了含有1%(w/w )浓度的各中间体(即各杂质)的主成分对照品溶液作为系统适用性试验用溶液，确认了色谱条件的适用性。 6、专业性试验验证图、7、2 .检测波长的决定涉及各被检测物质在其波长的响应因子是否相同、即重量修正因子的问题。 (f=A杂质/A被检测成分)选择主成分具有与各杂质相同紫外吸收的波长(f=1.0) . 通过选择各杂质的紫外吸收大于主要成分的紫外吸收的波长(f1.0)，能够更严格地控制杂质的极限。 选择各杂质的紫外吸收比主要成分的紫外吸收小的波长时，如果不添加重量修正因子(f1.0)，就会得到错误的判断。 目前，国外关于该研究的进展，8、3 .试样溶液浓度的确定(灵敏度试验最低检测量的测定)试样溶液浓度的设定很重要。 通常根据最低检测量和最大采样量进行该设定。 最低检测量虽然是绝对值，但其真正意义确实是其相对值，也就是相对于试验品溶液中样品浓度的相对值。 其测定方法分为直观评价法和基于可靠性躁动比的方法。 最大样本量增加样本溶液的浓度，直到被分析物达到不拖尾的浓度。 9、3 .试样溶液浓度的确定设定杂质总量不得超过1.0%，最低检测量必须达到通常对照溶液浓度的1/101/50 (相当于试样溶液浓度的0.1%0.02% )。 即，供试品溶液的浓度为最低检测量的至少1000倍20000倍，并且最低检测量根据各要因而变化(即耐性系数)，因此，在保证供试品溶液的浓度不拖尾(即比最大样品量小)的基础上，将该浓度设定得高以适用各种条件. 10、3 .试样溶液的浓度的确定例中，在样品量规定为20l、主成分的最低检测量规定为1g/ml (用浓度表示)、杂质限度规定为1%的情况下，试样溶液的浓度可以设定为1mg/ml20mg/ml，或者可以设定得更高，但总是拖尾主成分的峰拖尾情况也可以通过流速适当调节，11、3 .试样溶液浓度的确定，12、4 .样品回收试验(正确性试验)的正确性试验可以通过在样品中加入已知量的杂质的方式进行评价。 准确称量各杂质，将1%(w/w )浓度的各杂质加入样品溶液中，验证所采用的色谱条件下是否能分离检测出各杂质。 该原理与上述专业属性研究相一致。 13、5 .流速、柱温和溶剂的选择，通常调节流速使主成分的保持时间稍长，使主成分的峰不拖尾即可。 柱温对分离效果的影响有一定程度，但不明显，如果有柱温箱，通常设定在35以下。溶剂的选择应测定样品溶液在该溶剂中的稳定性，以免选择挥发性强的溶剂，同时保证对照溶液的主成分峰面积精度良好。14、6 .积分参数的设定积分参数的设定很重要。 这主要由斜率、峰宽和最小峰面积构成。 采用自对照法时，对照溶液和试样溶液必须以相同的斜率、峰宽进行积分计算。 这里主要是试样溶液的最小峰面积的设定，它会直接导致测定结果。 如果设定过小，则较多的小峰、以及基线位移的小峰被积分为杂质峰，杂质峰面积增加，如果容易判断为不合格的设定过大，则杂质的存在不会发生反应。 15、6 .最小峰面积的设定不是绝对值而是相对值。 英国药典规定，当有关物质的检测通过HPLC法测定时，丢弃对照溶液的主峰面积的几分之几的峰面积。 在通常样品测定中，通常为1/101/20 (即相当于样品测定浓度的0.1%0.05% ) . 如果将杂质限度设为1.0%、对照溶液的峰面积设为10000，则最小峰面积可以设定为1000500左右。 在评价新药的稳定性时，可以设定为0.01%的最小峰面积。 同时要注意，在销售和购买原料药物的合同中，为了确保双方达成共识，必须重视这一点。 16、7 .保留时间的设定在经过上述方法学认证后，决定试样溶液的保留时间，通常洗脱全部杂质和经过强力破坏试验的杂质，规定为主成分保留时间的数倍。17、8 .强力破坏试验水破坏原料适量，加水溶解后，在90下放置24小时。 氧化破坏取适量原料，用5%过氧化氢溶液溶解后，在90下放置24小时。 强碱破坏了原料适量，用1mol/L氢氧化钠溶液溶解后，在90下放置24小时。 强酸破坏原料的适量，加入盐酸溶液1mol/L溶解后，在90下放置24小时。 高温破坏采集原料适量根据各品种的熔点，在高温下破坏，改变外观性状，采集强光破坏采集原料适量，在紫外灯下照射48小时。18、9 .定量检测是有关物质检测为定量检测的杂质对照品法，上述项目各项研究后需要增加线性试验和必要的方法论项目。19、10.HPLC/UV二极管阵列检测器或二极管阵列检测器的论证也是当前常采用的强有力手段。 对一个色谱峰的若干个进行紫外扫描，比较所得到的扫描图像的接近度，从而评价所检测出的峰的纯度。 我的房间里有这个检查器，做过很多次这方面的工作。20、薄层色谱、薄层色谱广泛应用于具有紫外吸收的物质和不具有紫外吸收的物质。 但是，由于没有正确的定量性质，其应用受到一定的限制。 1 .展开剂的确定与HPLC法相同，将含有1%浓度各中间体的主成分对照品溶液作为系统适用性试验用溶液进行调制，确认展开剂的适用性。21、2 .检测方法的确定可在紫外光下检测，但通常只有两种波长254mn和360nm，因此测量有限。 用显色的方法进行时，通常需要在喷雾显色剂后立即进行确认。22，3 .决定供试品溶液和对照溶液浓度(灵敏度试验最小检测点样品量的测定)的原理与HPLC法相同。 最低检测量是持续稀释样品溶液的浓度，对样品进行采样，直到不能观测到为止。 最大点样本量可以增加样本溶液的浓度，直到达到不拖尾的浓度。 通常，考虑到耐试验因素的影响，将试样溶液浓度设定为稍小于最大点样品量即可。 在这个考试中必须附上考试的样品图像。 目前对USP、BP和EP有一些规定。. 23，4 .定量确定通常不能用TLC法正确定量，因此可以采用制备一系列浓度对照溶液测定杂质处于哪个浓度之间的方法，但该方法很麻烦。 24、紫外分光光度法(UV法)在某些溶血剂的杂质检测中，也常采用在可见区域的某个波长下测定样品溶液的吸收度值，使其不超过某个限度的方法。 在此需要注意的是，添加溶剂、辅助剂(制剂时)的紫外扫描图像，以验证该方法的专业性。 25、有关物质质量标准的制定，1 .通常需要在原料药的质量标准中制定有关物质检测项目。 制剂经过制剂技术后，与原料药相比，有关物质增加，稳定性评价后，有关物质的质量增加，必须按照质量标准制定有关物质的检查项目。 如果没有明显增加，则认为不制定。 26、有关物质按质量标准制定，2 .按质量标准的系统适用性试验，规定理论板数在主成分的峰值应该低于多少(通常为2000 )，而且，将适当的杂质(该杂质最难分离的物质)用于系统适用性试验用溶液的制备，将杂质浓度调制为主成分浓度的1%进行试验该方法已多次被USP、BP、进口样品和国外药品资料采用。 27、制定有关物质质量标准2 .例：供试溶液浓度为0.5mg/ml，对照溶液浓度为5g/ml (限度为1.0% )系统适用性试验用溶液：对照溶液浓度为0.5mg/ml； 最难分离的杂质对照品浓度为5g/ml(1.0% )，28，制定有关物质的质