ABO正反定型不符的问题分析及解决办法

ABO正反定型不符的问题分析及解决办法ABO正定型是用已知的标准血清检测红细胞上未知的抗原ABO反定型是用已知的标准红细胞检测血清中未知的抗体一引起ABO正反定型不一致的原因分析1.技术因素例如(1) 试剂贮存不当 (2) 使用技术错误(3) 使用错误的试剂 (4) 使用污染或失效的试剂 (5) 离心速度不当2.存在IgM性质的自身冷抗体由于自身冷抗体(冷凝集病,CHD)而导致自身溶血的病人，在低于37时血细胞自发凝集，影响正反定型。3.抗原表达弱或缺失例如 a.白血病b.双胞胎c.H基因变异4.高水平可溶性血型物质的病人。5.混合视野：例如(1) 来自近期输注非ABO同型红细胞病人的血样 (2) 骨髓移植后不久 (3) Tn或A3型红细胞6.缺失或弱抗-A、抗-B例如(1) 新生儿血清 (2) 免疫缺陷、紊乱病人 (3) 老年人7.前带现象当抗-A或抗-B的效价（如35000）IgG太高时, 立即离心法与A 或B细胞不反应。8.多凝集：多凝集红细胞，具有不正常的膜结构，可被正常成人血清凝集。9.不正常血清蛋白：白蛋白/球蛋白比例失调的血清引起红细胞产生缗钱状假凝集。10. 血样血清中存在抗试剂成分的抗体：例如抗防腐剂的抗体、抗EDTA的抗体等，此种抗体可以通过将红细胞洗涤而解除。二、ABO正反定型不符的解决方法有以下几个（一）出现弱反应或缺失抗原的解决方法有1.洗涤RBC且延长孵育时间进行试验，如果使用洗涤红细胞后反应加强，则考虑是血型物质的抑制2.酶处理红细胞再次试验3.吸收放散确定是否是亚型。4.了解输血史(尤其是O型红细胞输注)来分析混合视野5.了解病情诊断（尤其是白血病）6.了解是否是骨髓移植受者7.了解是否是双胞胎8.是否使用从前未使用过的单克隆抗体血清进行了血型鉴定9.分泌型型物质检查10. 进行玫瑰花试验来确定是否混入其它红细胞，或进行细胞分离（二）出现弱反应或缺失抗体例如1.年龄：新生儿及老人。2.低球蛋白血症：如白血病人、使用免疫抑止药物、低球蛋白的恶性淋巴瘤病人、骨髓移植后病人。3.丙球缺乏血症：如免疫缺陷病人4.双胞胎嵌合体解决方法有1.延长反应时间2.放在室温检查血清中的抗体。用A、B、O及自身红细胞进行检查 ，用酶处理的A、B、O及自身细胞进行检查。可能需要在试验前进行冷抗体的自身吸收3.确定病人年龄以及临床诊断（例如新生儿还有免疫病）有关新生儿血型，这是资格证经常考试的题目例如，6个月大新生儿正定性型是O型，反定型是B型，请问新生儿是什么血型？答案应该是O型，因为婴儿尚未产生自己的抗体或有从母亲获得的血型抗体，所以新生儿不适合用血清做反定型。4.确定输血史（例如非ABO同型的血浆输注）（三）出现多余抗原（额外抗原）可能情况有1.抗原发生改变：（1）获得性B：肠道疾病患者，细菌作用导致（2）多凝集现象：红细胞被掘大多数人的正常血清凝集2.红细胞已经被抗体包被：例如自家免疫溶血性贫血、输血反应及HDN。3.非抗A及抗B的抗体与相应抗原形成复合体吸附在红细胞表面，引起正定型非特异性凝集。4.混合视野：非同型输注，例如O型红细胞给其他型输用，非ABO同型的骨髓移植，A3亚型等。5.低频率抗原抗体反应：定型血清中的存在低频抗原的抗体，与对应的低频抗原产生阳性反应。解决方法有1.将红细胞洗涤再进行试验，确定是否是病人或献血员的血清中存在针对ABO定型试剂成分的抗体2.用O型及自身红细胞于室温检查病人血清，确定血清中是否有冷自身抗体，如果有，则用2ME或DTT处理。3.用不同厂家的试剂检查洗涤的红细胞4.了解病人的临床诊断5.如果怀疑是获得性B，则用酸化的抗-B检查6.进行ABH分泌型型物质检查7.如果用多克隆抗-A检查结果是混合视野，则用蛋白酶处理RBC试验，考虑是否是多凝集（四）出现额外抗体：产生未知抗体反应的可能情况有1.蛋白或血浆不正常引起的缗钱状凝集：血清蛋白浓度异常，球蛋白浓度由于疾病而升高（例如多发性骨髓瘤），原发性巨球蛋白血症，纤维蛋白原浓度升高，血浆扩容剂的使用以及何杰金氏淋巴瘤，新生儿脐血中的华通氏胶。2.冷反应性自身抗体：存在ABO系统的意外抗体：例如A2或A2B个体血清中可能存在天然抗A1，顺式AB人群中弱的抗-B,导致反定型试验多出抗体。3.被检者血清中存在ABO系统以外的特异性冷同种抗体，反定型时出现假阳性反应。解决方法有1.在室温及4检查，确定是否存在自身抗体或冷同种抗体2.洗涤红细胞再次进行试验，防止血清中有针对试剂红细胞保存液成分的抗体在37定型，去除冷自生抗体干扰后定型，血型物质检测