Western blot实验所需试剂配制方法_第1页
Western blot实验所需试剂配制方法_第2页
Western blot实验所需试剂配制方法_第3页
Western blot实验所需试剂配制方法_第4页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1 Western blot实验所需试剂配制方法制胶试剂：1. 30（W/V）丙烯酰胺溶液： 名称用量备注Acrylamide29gN-甲叉双丙烯酰胺(N，N-methylene-bisacylamide，BIS)1g充分搅拌溶解去离子水80ml定容至100ml，0.45m滤膜过滤除杂，置于棕色瓶中4保存，（注意：丙烯酰胺具有强烈的神经毒性，通过皮肤吸收并具有累积性，配制时应戴手套操作）2. 10（W/V）过硫酸铵： 名称用量备注过硫酸铵0.1g去离子水1ml现配现用（注意：10过硫酸铵溶液在4保存能使用两周左右，过期会失去催化效果）3. 1M Tris-HCL, pH=6.8 (36%的浓盐酸) ：名称用量备注Tris12.1去离子水80ml浓盐酸8.8-9ml预实验已确定去离子水加入去离子水定容至100ml后，室温保存4. 1.5M Tris-HCL, pH=8.8 (36%的浓盐酸) ：名称用量备注Tris18.17去离子水80ml浓盐酸2.8-3ml预实验已确定去离子水加入去离子水定容至100ml后，室温保存5. 10%SDS：名称用量备注SDS10g去离子水80ml加入去离子水定容至100ml后，室温保存缓冲液配置：6. 5Tris-Glycine Buffer(SDS-PAGE电泳缓冲液)名称用量备注 pH=8.3Tris15.1gGlycine94.0gSDS 5.0g去离子水800ml加入去离子水定容至1L后，室温保存7. 1膜转移缓冲液：名称用量备注Glycine2.9g2.9gTris5.8g5.8gSDS0g0.37g甲醇用前加200ml甲醇用前加200ml甲醇去离子水定容到1000ml定容到1000ml室温保存8. 1膜转移缓冲液：名称用量备注Glycine2.9g2.9gTris5.8g5.8gSDS0g0.37g甲醇用前加200ml甲醇用前加200ml甲醇去离子水定容到1000ml定容到1000ml室温保存9. 5SDS-PAGE Loading Buffer： 名称用量备注1MTris-HCL, pH=6.81.25ml2.5mlSDS0.5g1g甘油2.5ml5mlBPB（溴酚蓝）25mg50mg超纯水至5ml10ml分装200ul/管50充分溶解，30min，离心取上清，0.45uM过滤2ME10ul/200ul使用前添加，添加后可室温保存一个月10. 封闭缓冲液：名称用量备注脱脂奶粉5gTBST100ml充分溶解后， 4 保存其它：（备用）11. 考马斯亮蓝R-250染色液： 名称用量备注考马斯亮蓝R-2500.1g异丙醇25ml搅拌溶解冰醋酸10ml搅拌均匀去离子水65ml搅拌均匀，滤纸除去颗粒物，室温保存12. 考马斯亮蓝染色脱色液： 名称用量备注冰醋酸100ml甲醇100ml去离子水800ml充分混匀后使用13. 2%的丽春红贮备液(20mL)：名称用量备注丽春红5g三氯乙酸0.4
人人文库> 全部分类> 行业资料 > 管理策划

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论