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文档简介

抗体类型和特征,1。PPT学习交流,抗体(antybody,Ab),具有抗体活性的血清蛋白称为免疫球蛋白,是由抗原刺激的机体B淋巴细胞分化和分裂形成的一组特殊球蛋白。类型:免疫球蛋白G(IgG)免疫球蛋白M(IgM)免疫球蛋白A(IgA)免疫球蛋白D(IgD)免疫球蛋白E(IgE),1。抗体,2。PPT学习和交流,2。抗体结构,决定簇补体区(cdr),骨架区框架区,糖基化位点CHO,补体固定位点,轻链轻链,l,重链,H链,H,可变区,V,恒定区,C,3,PPT学习交换,2。抗体结构,抗体和抗原表位结合高变区(HVR)示意图(g代表相对保守的甘氨酸),4,PPT学习交换,3。抗体类型,第一代抗体3.1多克隆抗体,第一代抗体3.2单克隆抗体,第二代抗体3.3抗体,第三代抗体3.3基因工程抗体,第五代抗体,PPT学习交换,多克隆抗体,当一种抗原被注射到实验动物体内时,一系列抗体产生细胞会与该抗原不同程度地结合,在被该抗原刺激后,血液中会产生不同类型的抗体。这种由一种抗原刺激产生的抗体称为多克隆抗体。3.1第一代抗体,6,PPT学习和交流,优点:来源广泛,易于制备,3.1第一代抗体,缺点:特异性低,易于交叉反应,不适合大规模制备,应用:疾病被动免疫治疗,实验室免疫学实验,7,PPT学习和交流,3.2第二代抗体,单克隆抗体,它是由单个B细胞克隆产生的高度均一的抗体,仅针对特定抗原表位,称为单克隆抗体。杂交瘤技术通常用于制备。杂交瘤抗体技术是基于细胞融合技术,将具有特异性抗体分泌能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合成B细胞杂交瘤。8,PPT学习和交流,3.2第二代抗体,优点:高纯度,强特异性,高滴度,很少或没有血清交叉反应,缺点:作为一种药物,它能引起人抗小鼠(兔)抗体反应,应用:疾病诊断,被动免疫,生物靶向药物,9,PPT学习和交流,3.3第三代抗体-基因工程抗体,基因工程抗体,制备单克隆抗体的细胞工程技术与生产重组分子的基因工程技术相结合,编码抗体的基因根据这种基因重组抗体被称为基因工程抗体。10,PPT学习和交流,3.3第三代抗体基因工程抗体抗体抗体抗体,嵌合抗体嵌合抗体小分子抗体小分子抗体双特异性抗体偶联物Abcongate抗体Abfusionprotein,基因工程抗体类型:11,PPT学习和交流,3.3.1基因工程抗体嵌合抗体,其特征在于其对小鼠来源的抗体的结合抗原的特异性和亲和力,以及降低了小鼠来源的抗体对人体的免疫原性。嵌合抗体是利用DNA重组技术,将异源单克隆抗体的轻链和重链可变区基因插入含有人抗体恒定区的表达载体,转化哺乳动物细胞表达嵌合抗体。在如此表达的抗体分子中,轻链和重链的V区是异源的,而C区是人的,因此整个抗体分子的近2/3是人的。12,PPT学习交流,3.3.2基因工程抗体抗体抗体-小分子抗体,类型:Fab抗体FabfragmentFv片段Fv片段单链抗体单链可变片段,单链抗体,小分子抗体,具有抗原结合功能的小分子片段。13,PPT学习交流,3.3.2基因工程抗体-小分子抗体,小分子抗体特点:1)原核表达,制备简单,成本低2)质量小,易于穿透组织屏障并进入病变部位,3)不与Fc受体结合,更集中于靶部位4)体内半衰期短,有利于体内有毒物质的清除,降低放射免疫分析的背景。5)可与各种药物和放射性同位素偶联6)低免疫原性,14,PPT学习和通讯,3.3.2基因工程抗体抗体抗体-小分子抗体,制备小分子抗体:酶消化细菌表达(常用)酵母表达哺乳动物细胞表达昆虫细胞表达植物细胞表达,15,PPT学习和通讯,3.3.2小分子抗体-Fab抗体,Fab抗体,由完整的轻链和重链Fd片段通过链间二硫键连接形成异二聚体。特点:保持天然抗体Fv片段,结构稳定,最早出现,研究透彻。它主要用于抗体结合物。16、PPT学习交换,3.3.2小分子抗体Fab抗体,Fab抗体分子的制备,17、PPT学习交换,3.3.2小分子抗体单链抗体单链抗体单链抗体由抗体轻链和重链可变区基因拼接而成的重组蛋白,具有仅1/6的完整分子的分子量。其特点是最小的片段,抗原结合位点完整,能够微生物发酵生产,对实体肿瘤有很强的穿透力,是生物“导弹”的理想材料,在开发双功能抗体、催化抗体、免疫毒素和抗体融合蛋白方面有广阔的应用前景。18、PPT学习交流,3.3.2小分子抗体-单链抗体,单链抗体抗体基因的构建一般采用从杂交瘤细胞中提取的基因,逆转录成cDNA,通过聚合酶链反应扩增VL和VH基因,然后用合成的寡核苷酸序列,即接头,将VL的C端与VH的N端或VH的C端与VL的N端连接起来,形成单链抗体基因。19,PPT学习通讯,3.3.2小分子抗体Fv片段,Fv片段,由VH和VL组成,是抗体的抗原结合位点,分子量仅为完整分子的1/6。具有与单链抗体相同的特性。20、PPT学习交流,3.3.2基因工程抗体双特异性抗体双特异性抗体,是一种含有两个特异性抗原结合位点的人工抗体。特征:一个位点可与靶细胞表面抗原结合,另一个位点可与负载物质如毒素、酶、细胞因子、放射性毒素等偶联。它可以在目标细胞和功能分子(细胞)之间建立桥梁,并刺激目标免疫反应。21,PPT学习交流,3.3.2基因工程抗体-双特异性抗体,双特异性抗体代表类型和结构,22,PPT学习交流,3.3.2基因工程抗体-双特异性抗体,双特异性抗体代表类型和结构,23,PPT学习交流,3.3.2基因工程抗体-双特异性抗体,双特异性抗体的应用:肿瘤放射免疫诊断肿瘤药物杀伤肿瘤免疫杀伤,24,PPT学习交流,3.3.3基因工程抗体抗体、25、PPT学习交换、3.3.3基因工程抗体-抗体缀合物、26、PPT学习交换、3.3

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