第十章 甾体激素类药物的分析.ppt

第十章,甾体激素类药物的分析,基本结构：环戊烷骈多氢菲,A,B,C,D,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19,分类：,甾体激素,肾上腺皮质激素,性激素,雄性激素及蛋白同化激素,孕激素,雌激素,肾上腺皮质激素,氢化可的松,肾上腺皮质激素,醋酸地塞米松,雄性激素,丙酸睾酮,蛋白同化激素,苯丙酸诺龙,孕激素,黄体酮,雌激素,炔雌醇,一、结构与性质,1.肾上腺皮质激素,2.雄性激素及蛋白同化激素,3.孕激素,4.雌激素,二、鉴别试验,（一）与强酸的呈色反应,甾体激素类药物,呈色,H2SO4H3PO4HClO4HCl,（母核）,(二)官能团的反应,肾上腺皮质激素药物,呈色,四氮唑盐OH,1C17醇酮基,还原性,A.呈色反应,肾上腺皮质激素药物,Cu2O橙红色,碱性酒石酸铜,B.沉淀反应,Ag黑色,氨制硝酸银,甾酮类激素药物,呈色,羰基试剂,2.C3酮基和C20酮基,常用的羰基试剂：2,4-二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼,异烟腙（黄色）,睾酮,黄体酮,异烟双腙（黄色）,具有甲酮基或活泼亚甲基的甾体激素类药物,呈色,亚硝基铁氰化纳间二硝基酚芳香醛,3.甲酮基,黄体酮,蓝紫色,亚硝基铁氰化纳,其他甾体,淡橙色不显色,黄体酮,蓝紫色,有机氟,F,有机破坏,有机氯,Cl,4.有机卤素,茜素氟蓝硝酸亚铈,硝酸硝酸银,AgCl,呈色,茜素氟蓝,蓝紫色,F-,雌激素类药物,红色偶氮染料,重氮苯磺酸,5.酚羟基,含炔基的甾体激素,银盐沉淀,硝酸银,6.乙炔基,炔雌醇,白,KOH,(三)制备衍生物测定m.p.,（四）水解产物的反应,-3-酮240nm,苯环280nm,（五）UV法,33003000cm-1,30002700cm-1,19001650cm-1,16501450cm-1,1000650cm-1,（六）IR法,37503300cm-1,醋酸可的松,结构特征：43酮、C17OHC20酮基、C11酮基、醋酸酯,结构特征：43酮、C17OHC17乙炔基,炔诺酮,结构特征：酚羟基、C17OHC17乙炔基,炔雌醇,（七）TLC法,主要用于甾体激素类药物制剂的鉴别,方法：对照品法要求供试品溶液所显主斑点的颜色和位置与对照品溶液的主斑点相同。,（八）HPLC法,主要用于甾体激素类药物制剂的鉴别（如：醋酸曲安奈德软膏、醋酸氟轻松软膏）,方法：对照品法要求在含量测定项下记录的色谱图中，供试品峰的tR与对照品峰的tR一致。,三、杂质检查,（一）其他甾体,定义与标示药物结构不同的甾体化合物都称为“其他甾体”,Li/NH3C2H5OH,弱酸,雌二醇3甲醚,苯丙酸诺龙的合成路线,I,II,强酸,苯丙酰氯,HCl,III,特点（1）可能存在多个甾体杂质（2）结构类似,2.来源原料、中间体、异构体、降解产物,4.方法（具有一定分离能力）TLC法（高低浓度对比法）HPLC法（类似高低浓度对比法）,（1）TLC法（高低浓度对比法）,判定方法：规定杂质斑点数目规定杂质斑点颜色,特点：（1）简便易行，不需特殊的仪器；（2）不需对照品；（3）只能控制单个杂质的限量；（4）要求杂质与主成分的显色灵敏度接近。,（2）HPLC法（高低浓度对比法）,判定方法：规定杂质峰数目规定杂质峰面积,（二）游离磷酸,地塞米松磷酸钠氢化可的松磷酸钠倍他米松磷酸钠氢化泼尼松磷酸钠,对照品法,原理：,方法：,（对照液0.0035%KH2PO4）,（三）甲醇和丙酮,（灵敏度法）,甲醇不得出峰检测限=3.1ng,丙酮5.0%内标法+校正因子,GC法,炔雌醇,（四）雌酮,原理Zimmermann反应,碱性KOH乙醇,高纯度,来源合成中用二氧化硒(SeO2)脱氢,原理,方法,四、含量测定,（一）UV法,-3-酮240nm（）,肾上腺皮质激素雄性激素和蛋白同化激素孕激素,苯环280nm（）,雌激素,（二）反应分光光度法,1.适用于非分光光度活性药物2.使待测组分光谱位移，避免干扰3.增加测定灵敏度4.增加选择性,弱、非分光光度活性药物,强分光光度活性药物,化学反应,肾上腺皮质激素类,C17-醇酮基,强还原性,1.原理,四氮唑比色法,O,OH-,分子重排,蓝四氮唑（BT）,双甲瓒（暗蓝）,2.方法,ChPTTC（RT）BPTTC（RT）USPBT,对照品法,3.讨论,（1）基团对反应速度的影响,C11=OC11OH,C21OHC21-酯,C16无论何种取代基,（2）溶剂、水分的影响,含水量5%,含水10%A10%含水30%几无反应,无水乙醇,（3）O2与光线的影响,反应过程反应产物,怕光,避光、快速,O2影响颜色强度和稳定性,隔绝空气、快速、充N2,（4）碱的种类及加入顺序,反应应在强碱性（pH13.75）条件下进行以氢氧化四甲基铵的结果最佳,加入顺序：,（5）温度与时间,t甲瓒分解%,4.特点：缺点影响因素太多优点测定结果能指示药品的稳定性（氧化及降解产物无此反应）,肾上腺皮质激素、雄性激素和蛋白同化激素、孕激素,C3酮基,1.原理,异烟腙（黄色）,2.方法,暗45,对照品法,3.讨论,反应速度,（1）,C3=OC17=O、C20=OC11=O不反应,反应专属性C3酮基,（2）溶剂的选