五日生化需氧量的测定

7月5日生化需氧量测定生物化学需氧量(BOD)是在一定条件下，微生物在分解水中某些可氧化物质(主要是有机物)的生物化学过程中消耗溶解氧的量，间接表示水中微生物可分解的有机物量，是反映有机物污染的重要类别指标之一。测量BOD的方法包括稀释接种方法、微生物传感器方法、活性污泥曝气分解方法、库仑滴定法、压力测定方法等。本实验采用稀释接种法确定污水的BOD。也称为5日培养法(BOD5)，该方法采用一定量的水样，或稀释的水样从20 培养到15天，分别测定水样培养前后溶解氧的差异，有关内容请参阅教材第2章第5节。一、实验目的和要求1.掌握稀释接种法测定博D5的基本原理和操作技术。2.复习第二章第五节的相关内容，提出为了确保测量准确性，要好好调节哪些条件。二、仪器1.恒温培养基。2.5 20l细玻璃瓶。3.1000-2000ml定量机。4.玻璃混合棒：杆长应比使用的桶高长200mm，杆底应固定有略小于桶直径的直径和几个小孔的硬质橡胶板。5.溶解氧瓶：200-300毫升，有泥浆玻璃塞，有供水棒用钟形入口。虹吸管：添加水样和稀释水。三、试剂1.磷酸盐缓冲溶液：二氢钾8.58磷酸(KH2PO4)，氢钾2。75g磷酸(K 2HPO4)，33.4g磷酸二氢钠(Na2HPO47H2O)和1.7g氯化铵(NH4C1)溶于水，稀释为1000毫升。此溶液的pH值必须为7.2。2.硫酸镁溶液：将22.5g硫酸镁(MgSO47H2O)溶于水，稀释为1000毫升。氯化钙溶液；将无水氯化钙27.5g溶于水，稀释为1000毫升。4、氯化铁溶液；将0.25g氯化铁(FeCl36H2O)溶于水，稀释为1000mL。5.盐酸溶液(0.5mol/L):40毫升(=1.18g/mL)盐酸溶于水，稀释至1000毫升。6.氢氧化钠溶液(0.5毫升/L):将20g氢氧化钠溶于水，稀释为1000毫升。亚硫酸钠溶液(1/2 Na2 so 3=0.025mol/l)；将1.575g亚硫酸钠溶于水，稀释为1000毫升。这种溶液不稳定，必须每天配制。葡萄糖-谷氨酸标准溶液；葡萄糖(C6H12O6)和谷氨酸(hooc-CH2-CHN H2-coh)在103 干燥LH后，分别将150毫克溶于水，稀释到1000毫升容量瓶内，放入标记中均匀搅拌。这种标准溶液在使用前准备好。9.稀释水：在5 20l玻璃瓶内装一定量的水，调节20左右的水温。然后可以用无油空气压缩机或薄膜泵将这种水曝气2 8h，使水的溶解氧接近饱和，或者用适量的纯氧敲鼓。瓶盖是经过洗涤干燥的纱布2层，放在20培养箱里几个小时，使水中溶解氧含量达到8mg/L左右。使用前每升1毫升氯化钙溶液、氯化铁溶液、硫酸镁溶液、磷酸盐缓冲溶液，加入，均匀混合。稀释数的pH值必须为7.2，BOD5必须小于0.2mg/L。10.接种额：您可以选择以下方法之一以获得适用的接种额：(1)城市污水，一般使用生活污水，在室温下放一昼夜，利用上层清液。(2)取表土土壤浸出液、100克园林土壤或植物生长土壤，加入1L水，搅拌10分钟，使用精制溶液。(3)含有城市污水的河流或湖泊。(4)污水处理厂的出水。(5)分析含难分解物质的废水时，将污水下游3 8公里处的水抽出作为废水的家畜接种液。如果没有这种水，最好将中和或适当稀释的废水连续加气，每天少量添加其废水，同时适当添加表土或生活量，使适合该废水的微生物大量繁殖成为可能。在确定水中是否出现了大量絮状物或化学需氧量减少值的突变时，表明适用的微生物可以繁殖并用作接种溶液。一般的家畜过程需要3到8天。11.稀释水接种；取适量的接种液，添加到稀释水中，均匀混合。每升稀释水添加接种液：生活污水1 10毫升；表层土壤浸出液为20 30毫升。河水，湖水为10 10 100毫升。接种稀释数的pH值必须在7.2，BOD5值必须在0.3和1.0 mg/l之间。接种稀释水后应立即使用。四、测量阶段1.水样预处理(1)水样的pH值超过6.5 7.5的范围，可以用盐酸或氢氧化钠稀溶液控制接近7，但不要超过水样体积的0.5%。水样的酸度或碱度高，可以用高浓度碱或酸性中和。(2)水样中含有铜、铅、锌、镉、铬、砷、氰化物等有毒物质，可以使用驯化微生物接种液中的稀释数进行稀释或增加稀释倍数，从而降低毒物浓度。(。(3)含有少量游离氯的水样一般放置一到两个小时，自由氯可能会消失。(。在短时间内，氯不会消失的水样中加入亚硫酸钠溶液即可去除。1使用10毫升醋酸，10% (m/v)碘化钾溶液l mL，混合和100毫升良好的水样计算其数量。用淀粉溶液作为指示剂，用亚硫酸钠标准溶液滴定玻璃碘。根据亚硫酸钠标准溶液消耗的体积及其浓度，计算水样中应添加亚硫酸钠溶液的量。(4)从水温低的水域或富营养化湖中采集的水样遇到含有过饱和溶解氧的水，这时要将水样加热到20 左右，充分摇晃，将其从过饱和溶解氧中赶出来。从水温高的水体废水排放口获得的水样要迅速冷却到20 ，充分振动，以与空气中的氧气分压平衡。水样的测定(1)未稀释水样的测定；溶解氧含量高、有机物含量少的地面水不稀释，用虹吸管方法将约20 的混合水样直接转移到两个溶解氧瓶内，移动过程中要注意不要产生气泡。用同样的操作把两个溶解氧瓶装满水样，并让水塞多一点。瓶子里不能有气泡。立即测定一瓶溶解氧。将另一瓶放入培养箱，在201 培养5d后。测量溶解氧。(2)需要测定稀释水样：根据实际经验，稀释倍数计算如下：地表水通过将所测量的高锰酸盐指数乘以适当的系数来求(见下表)。工业废水可以由重铬酸钾法测定的cod值确定，一般来说，使用三种稀释率，即稀释数，cod值乘以系数0.075，0.15，0.225，得到三种稀释倍数。使用接种稀释水时，分别乘以0.075、0.15和0.25，得到3个稀释倍数。高锰酸盐指数(mg/L)系数5-5-100.2，0.3从10到200.4，0.6200.5、0.7、1.0COD值可以通过在水样COD测定过程中加热返回60min分钟时检验测试的邻苯二甲酸盐溶液，以大邱测量在同一步骤中制造的标准颜色列来估算。测定稀释倍数后，按测定水样的方法之一。一般稀释法：用虹吸管方法沿圆筒壁将部分稀释水(或稀释水接种)引入1000毫升的量筒，加入所需量的均匀水，然后将稀释水(或稀释水接种)引入800毫升，用带橡胶板的玻璃棒小心混合。搅动时搅动的橡胶板不能露出水面，以免产生气泡。不经过稀释样品采集程序，浸泡在瓶子里，测定当天溶解氧和5d培养后溶解氧的量。取另外两个溶解氧瓶，用虹吸管方法填充稀释水或接种稀释水，分别测定5d前、后的溶解氧含量。直接稀释法：直接稀释法直接稀释在溶解氧瓶内。在两个体积相同(差异小于lmL)的溶解氧瓶内，用虹吸管方法添加部分稀释水(或接种稀释水)，根据瓶的体积和稀释率添加计算的水样量，然后将稀释水(或稀释水接种)完全装满之前，不要将其放入泡沫中。剩下的工作与上述稀释法相同。在BOD5测量中，溶解氧一般由叠氮钠校正确定。对干扰物质，应根据情况使用不同的测定方法。3.BOD5计算直接培养而不稀释的水样：BOD5(mg/L)=c1-c2类型：培养前cl-水样中溶解氧浓度(mg/l)；C2-5d培养后水样中残留溶解氧浓度(mg/L)。稀释后培养的水样：格式：B1-稀释数(或稀释数接种)培养前溶解氧浓度(mg/l)；B2-培养后稀释数(或稀释数接种)的溶解氧浓度(mg/l)；-培养液中稀释数(或稀释数接种)的百分比；-培养液中水样的比例。五、注意事项1.水中有机物的生物氧化过程分为碳化阶段和硝化阶段，如果测量普通水样的BOD5，则硝化阶段不明显或完全不发生，但生物处理池的水中含有大量硝化细菌，因此，测量BOD5时也包含了部分氮化合物的氧气需求。对于此水样，如果只想测定有机物的氧气需求，则必须加入c-稀硫脲(ATU，C4H8N2S)等硝化抑制剂。2.在2个或3个稀释率样本中，如果溶解氧消耗量大于2mg/L，而其馀溶解氧大于lmg/L，则计算结果时需要求平均值。3.为了确认稀释水和接种液的质量及