生物技术制药复习要点与重点

复习要点第一章导言1.生物药物的概念和21世纪生物药物的分类2.生物技术的概念和现代生物技术的组成和特点3.基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技术的定义4.基因诊断和基因治疗的概念5.制药应用中的两种生物技术6.生物药物的两大来源和生物药物的特点7.生物制药的特点、生物制药的基本过程和生物制药的基本方法第五章发酵工程制药1.发酵定义和发酵类型2.菌种的选育方法3.培养基的概念和培养基制备的原则4.发酵的基本过程5.微生物发酵法6.发酵过程的影响因素及控制7.代谢工程的定义8.简述发酵工程下游加工的特点和一般程序第二章基因工程制药1.基因的概念和基因的一般特征2.基因工程药物的概念3.基因工程药物制药的主要过程4.建立基因工程药物分离纯化工艺的基础5.基因工程药物分离和纯化的一般方法6.基因工程产品的质量控制内容7.基因工程药物临床前安全性评价的特殊性8.蛋白质工程的概念第三章动物细胞工程制药1.细胞定义、细胞特征和细胞化学成分2.细胞培养的定义、基本条件和基本过程3.细胞融合技术的定义和基本过程4.细胞工程技术的概念和动物细胞工程药学的基本概念5.动物细胞培养的基本技术和特点6.细胞株、细胞系、原代培养和传代培养的概念7.动物细胞的大规模培养方法8.转基因动物的概念及转基因技术方法9.转基因动物在制药工业中的应用10.动物乳腺生物反应器概念第四章植物细胞工程制药1.植物细胞工程制药的两个主要内容2.植物细胞全能性的定义和原则3.植物细胞特征外植体、去分化、再分化、愈伤组织培养的概念4.植物细胞培养方法5.转基因植物的概念和主要方法6.植物细胞工程制药有哪些应用第六章酶工程制药1.酶工程的概念和现代酶工程研究的主要内容2.酶固定化的概念、方法和固定化酶的特点3.细胞固定化的概念和固定化细胞的特性4.酶反应器的概念第七章生物制药新技术抗体工程制药1.概念抗体，多克隆抗体，单克隆抗体抗体，杂交瘤技术，抗体工程2.单克隆抗体制备的基本过程3.杂交瘤细胞在3。帽子中等4.单克隆抗体的鉴定和检测项目5.基因工程抗体的概念和基因工程抗体的类型嵌合抗体、修饰抗体、单链抗体结合蛋白等。6.噬菌体抗体工程和表达抗体的转基因动物的优势7.反义核酸(核酶)、核酶(核酶核酸)、核糖核酸干扰的概念8.核酸疫苗又称基因疫苗或DNA疫苗及其优点9.基因治疗的概念、必要条件和主要方法10.干细胞和胚胎干细胞的概念和应用11生物芯片基因芯片、蛋白质芯片12.回顾要点基本概念1.生物技术是以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术和其他基础学科的科学原理，根据预先设计的设计改造生物或加工生物材料，为人类生产所需的产品或达到某种目的。2.发酵工程微生物工程是利用微生物制造工业原料和工业产品并提供服务的技术。其特征：发酵工程针对特定的产品，这要求微生物细胞能够正常生长并过度积累目标产物。3.酶工程是酶学和工程学相互渗透、相互结合而形成的一门新的技术学科。它是一种从应用目的出发研究酶，利用酶的特殊催化功能，并通过工程将相应的原料转化为有用物质的技术。4.基因工程是将重组对象的目的基因插入载体，拼接后转移到新的宿主细胞中，构建工程菌(或细胞)，实现遗传物质的重组，使目的基因在工程菌中复制和表达的技术。5.蛋白质工程是基于蛋白质分子的结构规则和它们的生物学功能之间的关系。现有的蛋白质被修饰或通过基因修饰或基因合成产生新的蛋白质。6.抗体工程使用单克隆抗体技术和基因工程技术来产生天然抗体、修饰抗体和开发新抗体。7.金属工程利用多基因重组技术有目的地修饰和改造细胞代谢途径，改变细胞特性，并与细胞基因调控、代谢调控和生化工程相结合，实现新的代谢途径的构建和特定目标产物的生产，是一个新兴的学科领域。8.生物制药是指利用生物学、医学、生物化学等研究成果制成的一类用于预防、治疗和诊断的产品。综合运用了生物、生物组织、细胞、体液等物理、化学、生物化学、生物技术、药学等学科的原理和方法。9.基因工程药物是指通过DNA重组技术生产的蛋白质、多肽、酶、激素、疫苗、单克隆抗体和细胞生长因子药物。10.基因DNA分子中含有特定遗传信息的核苷酸序列是遗传物质的最小功能单位。11.细胞是所有生物进行生命活动的基本结构和功能单位。细胞是被膜包围的原生质体，可以独立繁殖。12.培养基是适合不同细胞生长、繁殖或积累代谢物的人工营养基质。其主要成分是碳源、氮源、无机盐、生长因子、前体和水。13.杂交瘤技术：在诱导剂的作用下，将含有特定免疫信息的淋巴细胞与无限增殖的肿瘤细胞融合，产生具有特定活性的细胞及其产物的技术。14.单克隆抗体由克隆产生，其结构和功能与一个抗原决定簇完全相同。15.嵌合抗体通过用鼠单克隆抗体的可变区(C区)替换人抗体的恒定区(C区)获得的抗体16.固定化酶是指限制或固定在特定空间位置的酶，具体地说，是指通过物理或化学方法处理使酶不容易随水流失的酶制剂，即其运动受到限制，但也能起到催化作用。17.生物传感器是由生物识别物质(酶、微生物动物和植物组织的抗体等)组成的分析系统。)和基于酶(细胞)固定技术的传感器18.转基因动物利用基因工程技术将外源基因导入动物生殖细胞、胚胎干细胞和早期胚胎，并将其稳定整合到受体动物的染色体上。它还可以通过各种发育途径将外源基因稳定地传递给这种动物的后代。19.基因敲除利用基因靶向技术靶向灭活内源基因。20.核糖核酸干扰(RNAi)是指转录后基因沉默现象，其中由有义核糖核酸和对应于某些mRNA的反义核糖核酸组成的双链核糖核酸分子导致特定的Mrna降解，导致其不能表达。21.酶联免疫吸附试验是用酶代替放射性同位素来标记抗原或抗体，并将酶与抗原和抗体共价结合，称为酶联免疫吸附试验。基因治疗指的是23.原代培养：从体内取出后立即培养的细胞是原代细胞。第一代培养细胞和10代以内的细胞称为原代细胞培养。24次传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，制备成细胞悬液，并分成两个或多个培养瓶进行进一步培养，这称为传代培养25细胞系：原代细胞通常被传递到大约10代，细胞生长停滞，大多数细胞衰老和死亡，少数细胞存活到40-50代。这个传代细胞是细胞系。26细胞系：细胞系传代至50代后，细胞生长再次停滞。由于遗传物质的改变，只有一些细胞在培养条件下可以无限期传代。这个传代的细胞是一个细胞系。细胞系27与细胞系的区别：细胞系的遗传物质发生变化，具有癌细胞的特性，失去接触抑制，易于传代。基本方法：1.生物大分子分离纯化的主要方法有超滤和凝胶过滤、离子交换、电泳和等电聚焦。等电点沉淀、有机溶剂分级沉淀、亲和层析等。2.生物制药的基本方法包括提取、发酵、化学合成、组织培养和现代生物技术3.蛋白质药物分子量的测定方法有超速离心法、凝胶色谱法、聚丙烯酰胺凝胶电泳生物质谱等。4.酶和细胞的固定化方法包括载体偶联法、交联法、包埋法和新的固定化方法。5.常用菌种保藏方法斜面低温保藏法石蜡油保藏法沙管保藏法麸皮保藏法甘油悬液保藏法冷冻真空干燥保藏法液氮超低温保藏法宿主保藏法等6.在基因工程操作中获得目标基因的方法：逆转录、化学合成、聚合酶链反应等。7.基因诊断的主要技术包括基因探针技术、聚合酶链反应技术、单克隆抗体试剂等。8.发酵工程制药中的微生物发酵：固体发酵和液体发酵9.基因治疗中引入外源基因的方法。10.基本流程：1.基因工程制药的基本过程：获得目标基因，构建重组质粒，构建工程菌(或细胞)，工程菌培养、产品分离纯化、除菌过滤、半成品验证、成品验证和包装。2.发酵的基本过程包括菌种制备、种子制备、发酵、发酵液处理、提取和精制。3.用于单克隆抗体制备的基本过程抗原的制备、动物免疫、抗体产生细胞与骨髓瘤细胞的融合以形成杂交瘤细胞、杂交瘤细胞的选择性培养、能够产生特定抗体的阳性克隆和克隆的选择、体外培养(动物腹腔接种培养)以及单克隆抗体的大量制备。4.动物细胞培养的基本过程：取动物器官、组织、切割组织、胰蛋白酶处理、单细胞细胞培养。5.生物制药的基本流程1。原材料的选择、预处理和保存。原料粉碎。提取4。分离和纯化5。浓度6。结晶7。把弄干6.变性-退火-延伸三个基本步骤基本原则、组成、分类和特点1.单克隆抗体制备的基本原理单克隆抗体杂交瘤细胞是通过B淋巴细胞杂交瘤技术，将能够产生单一抗体的淋巴细胞与能够增殖的骨髓瘤细胞融合而形成的。通过有限稀释法和克隆将杂交瘤细胞制成纯的单克隆细胞系，生产出抗原决定簇、结构和特异性完全相同的高纯度抗体。2.植物细胞培养技术的理论基础。植物细胞的全能性。3 .现代生物药物型基因药物、重组药物、天然药物、合成和半合成药物。4.现代生物技术主要包括基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程。5.现代生物技术具有：高效、高智能、高投入、高竞争、高风险和高势能的特点。6.生物药物来源主要有两种类型：(1)天然生物材料是最主要的药物来源8.生物制药的特点化学结构和组成相对复杂；相对分子量相对较大，通常难以化学合成。药理作用针对性强，不良反应少。疗效确切，营养价值高；一些生物材料和药物是无法替代的。9.固定化酶具有生物催化剂和固体催化剂的双重功能。(1)可以多次使用；(2)反应后，酶底物产物易于分离，产物无残留酶，易于纯化，产品质量高。反应条件易于控制。酶的利用率高。它比水溶性酶更适合多酶反应。固定化细胞的特性包括细胞特性、生物催化剂功能和固相催化剂特性。优点：不需要酶的分离纯化；保持酶的原始状态；酶回收率高；稳定性高于固定化酶；胞内酶辅助因子可再生；细胞本身含有多酶系统；抗污染能力强。11.影响外源蛋白在大肠杆菌中表达的主要因素有：外源基因的密码子使用；mRNA结构；表达载体的构建；培养条件如何实现高表达.发酵工程制药的特点是以特定的产品为技术目标，要求微生物细胞既能正常生长，又能过量积累目标产物。13.生物制药的特点(特殊性)1。生物原料的组成非常复杂。活性成分含量低。可变性和破坏4。分离和制备过程的影响因素相对“均匀”13.影响发酵过程的因素：温度、酸碱度、溶解氧、菌体浓度、泡沫和营养浓度。如何控制.14.抗生素是微生物发酵生产的主要药物类型；氨基酸。核苷酸维生素；类固醇激素。治疗酶和酶抑制剂等。15.细胞特征：具有结构自组装、生理活动自调节和增殖自复制的能力。16.生物技术在药物研究中的两种基本作用模式1被用作生产工具生物技术药物2.作为研究工具-合理的药物设计17.单克隆抗体的优点和局限性单克隆抗体的特点是高度特异性、高度均一性和可重复性程度特异性：大规模生产和稳定性：局限性：固有的亲和力和有限的生物活性限制了其应用范围，反应强度不如多克隆抗体强，制备工艺复杂、耗时、费力且昂贵。18生产动物细胞类型贴壁依赖细胞、非贴壁依赖细胞、兼性贴壁细胞19.动物细胞培养的特点是无细胞壁，机械强度低，对剪切力敏感，对环境适应性差。倍增时间长，生长缓慢，易污染。培养期间必须添加抗生素。培养过程中的需氧量低，有些需要一些CO2。在培养过程中，细胞彼此成簇附着在一起。20.