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文档简介

基因工程的工具,1、化学“剪刀”:,2、化学“浆糊”:,3、分子“运输车”:,作用:特点:,切割DNA分子,强专一性,1、化学“剪刀”,限制性核酸内切酶(简称:限制酶),例:EcoRI:识别序列是GAATTC,切割位点是G和A之间,参见课本P57第3段,2、分子“运输车”,作用:,将外源基因送入受体细胞,运载体(常见:质粒),(拟核),质粒,我问你答:1、质粒是从什么生物中发现的?2、质粒的成分是什么?它是什么形状的?3、质粒进入其他生物细胞后,是否会被该生物消灭?它如何继续存在?,细菌,DNA,环状,不会,自主复制,或整合到该生物的染色体上。,抗生素抗性基因,2、分子“运输车”,运载体(常见:质粒),(拟核),质粒,如,抗青霉素基因,用于筛选含目的基因的受体细胞,1、本质:,质粒,2、形状:,3、特点:,DNA,小环状,能“友好”地“借居”,能自主复制,独立存在,4、在受体细胞内如何存在:,插入到受体细胞的染色体中,含有作为标记的基因,切开的质粒与目的基因为什么可以实现完美对接?,重组质粒/重组DNA,质粒是怎样运载目的基因的?,因为他们是由同一种限制酶剪开的,有相同的粘性末端(即,一段单链DNA)。,3.化学“浆糊”,作用:连接目的基因和质粒(磷酸与脱氧核糖之间的化学键),DNA连接酶,基因工程的工具总结:,限制性核酸内切酶(简称:限制酶),1化学“剪刀”:,2、分子“运输车”:,3、化学“浆糊”:,DNA连接酶,运载体(常见:质粒),作用:,切割目的基因和质粒,作用:,连接目的基因和质粒,作用:,将外源基因送入受体细胞,(磷酸与脱氧核糖之间的化学键),(磷酸与脱氧核糖之间的化学键),目的基因,4、筛选含目的基因的受体细胞,三、基因工程的基本步骤:,此酶与剪切目的基因的限制酶是同一种,获取方法见P59第1段,(如,细菌),“基因表达”:DNARNA蛋白质(性状),?,目的基因,4、筛选含目的基因的受体细胞,三、基因工程的基本步骤:,重组质粒,DNA连接酶,?酶,?,?,?,质粒,导入,筛选,“基因表达”:DNARNA蛋白质(性状),筛选究竟是如何进行的?,抗四环素基因(标记基因),目的基因(如,人的生长激素基因),假如受体细胞是酵母菌,如何鉴别重组质粒是否已经进入了酵母菌?,在培养液中加入四环素,如果。,如果能活下来,说明质粒已进入酵母菌,目的基因也随之进入了酵母菌;反之,,假如目的基因是抗虫基因,受体细胞是棉花细胞,如何鉴别重组质粒是否进入了棉花细胞?,看棉花植株是否具有抗虫性状。,筛选依据:或,具有标记基因所控制的性状;,具有目的基因所控制的性状。,如果能抗虫,说明目的基因已进入棉花细胞;反之,,课堂练习:,1、质粒是广泛分布在细菌中的()A.线状双链DNAB.线状单链DNAC.环状双链DNAD.环状单链DNA,C,2、基因工程中构建重组DNA需要的工具是()A.蛋白酶B.限制酶C.DNA连接酶D.限制酶和DNA连接酶,D,3、基因工程一般包括四个步骤,其正确顺序是()目的基因与运载体重组获取目的基因筛选含目的基因的受体细胞重组DNA分子导入受体细胞B.C.D.,D,下列黏性末端是用同种限制酶切割而成的是()ABCD,B,即时练习:,质粒是基因工程中常用的运载工具,某质粒上有两种抗药基因可作为标记基因,a、b、c为三个可能出现的目的基因插入点,如图所示。如果用一种限制酶将目的基因和质粒处理后,再合成重组质粒。将重组质粒导入某高等植物受体细胞后,用含有药物的培养基筛选受体细胞,预计结果如表所示,(1)如果出现结果,说明目的基因可能接在。(2)如果出现结果,说明目的基因接在。(3)如果出现结果,说明目的基因接在。,C点,a点,b点,小结,基因工程,基本步骤,操作工具,目的基因与运载体重组,筛选含有目的基因的受体细胞,重组DNA导入受体细胞,获取目的基因,限制性核酸内切酶(简称:限制酶),1、化学“剪刀”:,2、分子运输车:,质粒,3、化学“浆糊”:,DNA连接酶,作用:,切割目的基因和质粒,作用:,连接目的基因和质粒,(磷酸二酯键),(磷酸二酯键),课本P92第一段,单个细胞或单一组织细胞经分裂分化后仍具有形成完整生物体的潜能。,1.细胞的全能性:,胡萝卜的根韧皮部细胞,再分化,过程:,3、条件:,无菌,控制温度、PH、光照,培养基含:糖类、无机盐、维生素、植物激素等,(生长素、细胞分裂素),2.植物组织培养的过程:,无固定形态、没有分化的一团细胞,这种繁殖后代的生殖方式的属于无性生殖,切取,接种,愈伤组织的形成,分化形成小芽或根,试管苗的形成,移栽,3、植物组织培养的理论基础:,植物细胞具有全能性。,4、植物组织培养的实践应用,培育无病毒植株,4、植物组织培养的实践应用,植物快速繁殖,4、植物组织培养技术的实践应用,植物快速繁殖,培育无病毒植株,制作人工种子(人工种皮+胚状体),提取原料(药物、食品添加剂、香料、色素、杀虫剂),用于转基因植物的培养在外源基因成功转入植物细胞之后的培育,需要此技术。,下图是有关生物细胞生活史的概括。请据图分析回答问题:(1)所示的变化,在生物学上称为_所示的变化,称为_,(2)FGH过程的技术,在植物学上叫_,其理论基础是_(3)所示过程分别叫_、_。,细胞分裂,细胞分化,植物组织培养,植物细胞的全能性,脱分化,再分化,动物体细胞有没有全能性呢?,去核卵细胞,细胞核移植技术,体细胞的核,重组细胞,早期胚胎

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