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结直肠癌异时性肝转移的分子标志物：miR-181a及其生物学功能,顾晋陈治国,研究背景,microRNA的概念及其作用机制,研究背景,miRNA对肿瘤的发生发展起着重要的作用miRNA在不同肿瘤组织中具有特征性表达模式miRNA与肿瘤的生物学行为密切相关可用于诊断CLL、乳腺癌和软组织肉瘤等肿瘤miRNA与结直肠癌（CRC）肝转移的关系？,实验目的,筛选可能有助于预测CRC肝转移的miRNAsCRC肝转移相关的miRNAs功能研究,无肝转移的CRC,肝转移,miRNA表达的芯片检测,伴有同时性肝转移的CRC,生物信息学分析,原位杂交检测,筛选出CRC肝转移相关miRNAs,分子生物学验证,组织芯片构建,实验方案,实验方案,体外培养,病毒感染,基因增强表达效率测定,比较转染前后生物学性状的改变,低转移潜能CRC细胞系HT29,接种,裸鼠移殖瘤,裸鼠局部成瘤能力,浸润能力,生长增殖,裸鼠局部瘤的转移潜能,携带miRNA前体的慢病毒表达载体,实验结果,完成miRNA芯片检测无肝转移的CRC组织：5例伴有同时性肝转移的CRC组织：5例筛选出7个在两组间差异表达倍数大于1.7倍的miRNAsmiR-181a，152，320aLet-7d，miR-15b，20b，223,实验结果,构建组织芯片同时性肝转移的CRC原发灶：n=160异时性肝转移的CRC原发灶：n=37无肝转移的CRC原发灶：n=97远癌正常CRC粘膜：n=72原位杂交Dig标记的LNA探针,实验结果,构建慢病毒过表达载体LV-miR-181a-GFPLV-NC-GFP慢病毒载体转染HT29细胞系,实验结果,Figure1.miRNAdetectionincolorectalcancertissuesbyLNA-ISH.,表1.miRNAs在CRC组织中的表达情况,Figure2.overallsurvivalinCRCpatientswithdifferentexpressionlevelofmiR-181a,Figure3.TheexpressionofreportergeneGFPinHT29cellline,Figure4.ThefoldchangeofthemiR-181aexpressionincellline,Figure5.miR-181aenhancetheproliferationofHT29cell,Figure6.miR-181aenhancethemigrationofHT29cellinvitro,Figure7.miR-181aenhancethemigrationandinvasionofHT29cellinvitro,Figure8.InvivotumorgrowthinNOD-SCIDmice,Figure9.Xenografttumorsinthreegroups,结论,miR-181a对预测CRC异时性肝转移可能具有重要的意义miR-181a高表达是预后不良的分子标
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