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文档简介

实验三 试样中维生素C的含量测定及结构分析一 实验目的1、掌握UV-916型紫外可见分光光度计的使用方法。2、学习紫外-可见分光光度法测定有机化合物含量。二 实验原理维生素C 又称抗坏血酸,是一种含不饱和烯酯结构的酸性多羟基化合物；分子式为C6H8O6；分子量为176.13；结构式为维生素C 具有不饱和共轭结构，在紫外-可见光区有吸收，紫外吸收最大波长在245nm附近。维生素C 呈无色无臭的片状晶体，易溶于水，不溶于脂溶剂。在酸性环境中稳定，遇空气中氧、热、光、碱性物质，特别是有氧化酶及痕量铜、铁等金属离子存在时，具有抗氧化作用，是知名度最高的营养素。三 仪器试剂1、仪器：UV-916型紫外可见分光光度计，石英比色皿2个；50 mL、100mL 容量瓶各1个；25mL 容量瓶或具比色管7个；5mL 吸量管2支；50mL烧杯2个；10 mL量筒1个。2、试剂：维生素C（抗坏血酸）；10%的盐酸四 实验内容（一）解析维生素C的红外吸收光谱图，根据谱图分析其基本结构。（二）测定试样中维生素C的含量1、标准溶液的配制 用分析天平准确称取0.010g 抗坏血酸，用少量水溶解后，加2 mL 10%盐酸，用蒸馏水定容至100mL，配成浓度为100g/mL的标准溶液。再分别吸取0、0.50、1.50、2.50、3.50、4.50 mL 维生素C 标准溶液（100g/mL）于6个25mL容量瓶中，用水稀释成一系列不同浓度的标准溶液（020 g/mL）。2、样品的制备 取桔子、橙子、苹果肉样品。称取5.00g于50mL小烧杯中，加入12滴10%盐酸或加入1%盐酸5mL，匀浆。转于到25mL容量瓶（或具塞比色管）中，用水稀释至刻度。若提取液澄清，可直接取样测定，若浑浊，用离心机离心消除（将部分溶液转入10mL离心管中用离心机离心10min，取上层清液作为提取液）。取3.00mL提取液放入盛有于2mL 10%盐酸的50mL容量瓶中，用水稀释至刻度。3、吸收光谱图的扫描 用某一中间浓度的标准溶液，用蒸馏水作参比，于220280nm范围扫描吸收曲线，从曲线上查得最大吸收波长（245nm附近）。4、标准曲线的绘制 于最大吸收波长处分别测定标准系列溶液的吸光度，然后以浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。5、样品的测定 于最大吸收波长处测定试样的吸光度，从标准曲线上查出试样的浓度，平行测定两次。实验数据记录表格一 吸收曲线的绘制标准溶液的浓度：_最大吸收波长max = _nm二 试样中维生素C的含量测定1、标准曲线的绘制：测量波长：_；标准溶液的原始浓度：_溶液编号012345吸取体积/mL浓度/（g/mL）A2、未知物含量测定平行测定次数12吸光度，A试样浓度（g/mL）五 数据处理及结果讨论1、绘制维生素C的吸收光谱图，确定最大吸收波长；2、绘制维生素C在最大吸收波长的标准曲线；3、
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