临床常用免疫学检查讲稿.ppt

临床常用免疫学检查、免疫学诊断：用免疫学方法识别疾病相关因素，监测病程，判断疗效和预后，参与疾病相关因素的诊断和辅助诊断，检测机体免疫功能状态。 临床常用免疫学检测：血清免疫球蛋白检测、血清补体检测、细胞免疫检测、肝炎病毒标志物检测、感染免疫检测、肿瘤标志物检测、自身抗体检测及其他免疫检测。 1、体液免疫功能检测血清免疫球蛋白及其种类(特别是IgG、IgA和IgM )和水平，为诊断免疫缺陷性疾病和免疫增殖性疾病提供重要参数。 通过检测疫苗和感染因子的特异性抗体及其水平，可直接反映生物特异性体液免疫功能的状态。 1 .免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig )抗体活性和抗体样结构的球蛋白由浆细胞产生，存在于血液、体液、外分泌液和部分细胞的表面。 分类： PS、PS、PS、PS、PS、PS。 1.IgG、IgM、IgA的检测： IgG是血清中的主要抗体成分，是占全部Ig 75 %的唯一能通过胎盘的ig，通过自然被动免疫获得。 IgM是Ig中分子量最大的，最早出现的抗体是五聚体，对机体的早期免疫防御起着重要作用。 IgA分为血清型和分泌型，特别是分泌型IgA，局部会引起对感染、抗过敏的强烈免疫障碍。 检测方法免疫扩散法和免疫比浊法参考值：各年龄阶段存在差异的临床意义： (1).Ig增高常见于慢性肝病、淋巴瘤、SLE、RA、MM等(2) .单一Ig增高是免疫增殖性疾病，如MM(IGG )巨球蛋白血症(IgG . Ig下降：反复呼吸道感染者常见的IGA被分为4类： IgG 1、IgG 2、IgG 3、IgG 4与免疫缺陷症和过敏疾病相关。 IgE测定血清含量较低，但与I型过敏性疾病有关。 测定方法： ELISA法参考值： 0.10.9mg/L意义： IgE升高： IgE型多发性骨髓瘤、重链病、肝病、结节病、RA和各种过敏疾病中可见。 IGE下降：出现于c型球蛋白缺乏症、恶性肿瘤、长期免疫抑制剂者和共济失调性毛细血管扩张症等。 二.血清m蛋白(monoclonalimmunoglobulins )检测方法：蛋白电泳法、免疫比浊法和免疫电泳法参考值：阴性意义：检测m蛋白，提示单克隆免疫球蛋白增殖性疾病。 常见于多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、重链症、轻链症和半分子症等。 3 .血清补体检查的基本概念补体(complement ) :一组具有酶活性的糖蛋白，由传统途径的9种成分C1-C9、旁路途径3种成分及其衍生物组成，参与灭活病原体的免疫反应，也参与因破坏自己的组织和自己的细胞而引起的免疫损伤。 1 .补体CH50方法：试管法的参考值： 50000-100000u/l意义：反映补体传统途径激活的活性度。 1、CH50升高见于急性炎症、组织损伤和恶性肿瘤；2、CH50降低见于肾小球肾炎、自身免疫性病、感染性心内膜炎、病毒性肝炎和慢性肝病。 2 .补体C3方法：单向免疫扩散法(1.140.27g/L )免疫比浊法(0.85-1.70g/L )的意义： 1、增加在急性炎症、传染病早期、肿瘤和排斥反应中可见的2.70%以上的急性肾小球肾炎，85%以上的链球菌感染后肾炎，78%卢在活动性SLE和类风湿性关节炎中也能看到。 2 .补体C4方法：单向免疫扩散法(0.553-0.109g/L )的意义： 1，上升见于急性风湿热、结节性动脉周围炎、皮肌炎、关节炎、组织损伤等2 .自身免疫性肝炎、狼疮性肾炎、SLE、1型糖尿病、胰腺癌、多发性硬化症、慢性关节炎3 .补体C1q方法：单向免疫扩散法(0.197-0.04g/L )的意义： 1、骨髓炎、类风湿性关节炎、痛风、过敏性紫癜等所见增加2.SLE和混合性结组织病等所见下降。4.BF法：单向免疫扩散法(0.1-0.4g/L )的意义：增加在某些自身免疫症、肾病综合征、慢性肾炎、恶性肿瘤中可见2 .减少在肝病、急性肾球肾炎、自身免疫性溶血性贫血中可见。 第二节细胞免疫检测主要在包括t细胞、b细胞、k细胞、NK细胞及其亚群的临床上，检测淋巴细胞数量、表面标记和功能，了解机体细胞免疫功能。 t细胞免疫检查1.T细胞表面标志物检查(1).E-玫瑰的形成试验：检查t细胞的数量。 其临床意义：降低免疫缺陷性疾病，如恶性肿瘤、免疫性疾病、大面积烧伤、多发性神经炎等。 升高：可见于甲状腺炎、重症肌无力、慢性活动性肝炎、SLE活动期和器官移植排斥反应等。 (2)T细胞分化抗原测定CD3:参考值(IFA法) 61%-85%的意义：自身免疫性疾病，如SLE、RA等CD4:参考值(IFA法) 28%-58%的意义：恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷症、应用艾滋病、免疫抑制剂者CD8 : 19%-48%的意义：减少在自身免疫性疾病和过敏疾病中可见的CD4 /CD8 :参考值(IFA法)1.660.33意义：提高比率，在恶性肿瘤、自身免疫性疾病、病毒感染、过敏反应等中可见；比率降低在艾滋病中可见器官移植拒绝注： CD1-8增高可能导致t细胞型急性淋巴细胞白血病，b细胞免疫检测1.B细胞表面标志物检测： b细胞表面上表面抗原(CD19、CD20、CD21、CD22、CD40等)和表面受体(BCR、CKR、CR、FC等) BCR (1).B细胞表面免疫球蛋白(SmIg )测定：主要测定外周血b细胞的百分率。 临床意义：SmIg的减少见于免疫缺陷性疾病；SmIg上升见于慢性淋巴细胞白血病、多毛细胞白血病和原发性宏球蛋白血症。 原发性巨球蛋白血症患者SmIgM阳性细胞占78%。 (2).B细胞分化抗原测定：临床意义：上升可见于急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、Burkitt淋巴瘤等；下降可见于无c型球蛋白血症、化疗和免疫抑制剂后。 淋巴细胞功能检查(1).T细胞转化试验：反映t细胞的免疫功能。 临床意义和t细胞花结形成试验。 但是Down综合症明显提高了。 (2)混合淋巴细胞反应：反映机体整体细胞免疫功能，也可应用于HLA细胞单位型，自然杀伤细胞免疫检测自然杀伤细胞活性检测：是判断机体抗肿瘤和抗病毒感染的指标之一。 血液系统肿瘤、实体肿瘤、免疫缺陷病、艾滋病某些病毒感染者活性下降的宿主抗移植物反应者活性增高。 中性粒细胞的吞噬、杀菌功能检测反映了机体的抗感染免疫能力，第四节感染免疫检测病原体及其代谢产物进入人体后，刺激机体的免疫系统，产生相应的免疫产物，免疫产物进入血液。 临床上常用凝集试验、补体结合试验、沉淀试验、免疫荧光发光(IFA )、酶联免疫吸附试验(ELISA )、放射免疫法(RIA )等手段检测血清中的免疫产物和病原体的抗原成分，有助于某些感染性疾病的诊断和早期诊断。 近年来，随着分子生物学的发展，利用聚合酶连锁反应(PCR )和DNA探针分子杂交技术检测病原体的核酸，有助于确定病原学诊断。 1 .细菌感染免疫检查，1 .链球菌溶血素“o”测定患者感染a组溶血性链球菌1周后，ASO开始上升，46周达到高峰，持续数个月或数年，可见于活动性风湿热、风湿性关节炎、急性肾小球肾炎、急性上呼吸道感染、皮肤软组织感染。 抗体滴度逐渐下降，暗示病势缓解。2 .肥达氏(Widal )反应：协助伤寒和副伤寒的诊断。 参考值： o凝聚价1:80伤寒h凝聚价1:160副伤寒a、b、c凝聚价1:40为阳性。 最常见的是未治疗的SLE，活动期SLE几乎100%阳性。 在其他的自身免疫性疾病中也能看到。 抗核抗体有4种荧光核型：均质型，SLE、SS、PSS、MCTD中可见的边缘型见于SLE，SS中可见的粒子型见于SLE，RA中可见的核仁型见于PSS、Crest特征。 抗脱氧核糖核酸测定：可分为抗双链DNA抗体(ds-DNA )、抗单链DNA抗体(ss-DNA )、抗Z-DNA抗体。 抗双链DNA抗体的检测具有重要临床意义，见于活动期SLE，阳性率为70%-90%。 组织和细胞抗体检查：抗线粒体抗体(AMA ) :正常人阳性率不到10%。 大多数肝脏疾病可检测出AMA，原发性胆汁性肝硬化无症状患者占90.5%，有症状患者占92.5%； 慢性活动性肝炎可达到90%以上，但总胆管和肝外胆管闭塞为阴性。 抗甲状腺球蛋白抗体(抗-TG ) :阳性见于桥本甲状腺炎的90%-95%、甲状腺功能亢进症的52%-58%、甲状腺癌的35%。 另外，40岁以上健康女性的检出率为18%。 抗甲状腺微粒体抗体(抗-TM ) :抗-TM阳性检出率：桥本甲状腺炎50%-100%，甲减88.9%，甲状腺肿瘤13.1%，单纯性甲状腺瘤8.6%，甲炎17.2%-25%。 抗乙酰胆碱受体抗体：对重症肌无力的诊断有意义，敏感性和特异性高，约90%的患者为阳性，其他眼肌障碍者均为阴性。 可作为重症肌无力治疗效果的观察指标。 抗平滑肌抗体：狼疮性肝炎患者的阳性率高达80%，急性肝炎患者的阳性率为70%，但发病1周后出现，3个月后消失。 其他自身免疫抗体检测风湿病因子(RF ) :正常为阴性。 类风湿性关节炎(RA )阳性率为70%，RF是RA病情活动程度的判断指标之一。 其他自身免疫性疾病如多肌炎、SLE、硬皮病、干燥综合征等可见阳性。 传单、结核、感染性心内膜炎等感染性疾病多为阳性。 ACA检查：阳性为SLE、PLT减少症、习惯性流产等ANCA检查：为了诊断血管炎狼疮细胞(LE )检查，第八节细胞因子的白细胞介素2(IL-2 )活性和白细胞介素2受体(IL-2R )测定： il-2随着年龄的增长有下降的趋势上升见于自身免疫性疾病、再生障碍性贫血、多发性骨髓瘤和排斥反应等。 减少免疫缺陷性疾病、恶性肿瘤、1型糖尿病