国药监局饮片补充检验方法--WORD

国家食品药品监督管理局稽查局食药监稽函【2012】200号中药材及中药饮片药品检验补充检验方法和检验项目批准件序号品种名称批准件编号1蒲黄20070072红花20070093胆南星20070104海金沙20070115细辛20070126穿山甲20070137五味子20070148朱砂（水飞）20080039血竭200800410沉香200801711乌梅（炙乌梅）200900112桔梗（饮片）200900313大黄药材201000114白鲜皮（饮片）201000215黄柏（饮片）201000316黄连（饮片）201000417桔梗（饮片）201000518延胡索201000619猪苓（饮片）201000720西红花201100121青黛201100222人工牛黄201100323冬虫夏草201100424乳香201100525没药201100626阿胶201101227石斛饮片201102228菟丝子2011024蒲黄POLLEN TYPHAE检查总灰分 不得过15.0%（中国药典2005年版一部附录IX K总灰分测定法）。金胺O (1) 取本品粉末2g，加70%乙醇20ml，密塞，超声处理20分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。取金胺O对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml中含0.1mg的溶液，即得。照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录VI B）试验，取供试品溶液和对照品溶液各10l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷乙酸乙酯甲醇氨水（4：5：5：1）的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，立即在可见光下检视。供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；若出现相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。 （2）照高效液相色谱法（中国药典2005年版一部附录VI D）测定。 色谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈0.025mol/L磷酸二氢钾溶液（含0.2%三乙胺，并用磷酸调pH值为3.0）（40：60）为流动相；检测波长为484nm。理论板数按金橙峰计算应不低于2000。 对照品溶液的制备 取金橙对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml约含60g的溶液，即得。 供试品溶液的制备 取上述（1）项下的供试品溶液，即得。 测定法 取供试品溶液和对照品溶液各10l，注入液相色谱仪，记录色谱图。 结果判断 供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰在210550nm波长范围的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。 备注：必要时可采用高效液相色谱-质谱联用方法验证。建议采用乙腈-0.05mol/L 醋酸铵（35：65）流动相系统。红花HonghuaFLOS CARTHAMI检查金橙（1）取本品粗粉2g，加70%乙醇20ml，超声处理20分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。取金橙对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml中含0.1mg的溶液，作为对照试剂溶液。照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录VI B）试验，取供试品溶液10l，对照试剂溶液5l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-冰乙酸（7：1：2）为展开剂，展开，取出，晾干，立即在可视光下检视。供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；若出现相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。 （2）照高效液相色谱法（中国药典2005年版一部附录VI D）测定。 色谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.025mol/L磷酸二氢钾溶液（含0.2%三乙胺，并用磷酸调pH值为3.0）（40：60）为流动相；检测波长为484nm。理论板数按金橙峰计算，应不低于2000。对照试剂溶液的制备 取金橙对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml含60g的溶液，即得。供试品溶液的制备 取上述（1）项下的供试品溶液，即得。 测定法 取供试品溶液和对照试剂溶液各10l，注入液相色谱仪，记录色谱图。 结果判断 供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰在210550nm波长范围的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。备注：必要时可采用高效液相色谱-质谱联用方法验证。建议采用乙腈-0.05mol/L的醋酸铵溶液（35：65）流动相系统。五味子WuweiziPRUCTUS SCHISANDRAE CHINENSIS检查 胭脂红、赤藓红、酸性红73 （1）取本品2g（不粉碎），加70%乙醇5ml，超声提取20分钟，离心（3000转/分钟），取上清液作为供试品溶液。另取胭脂红、赤藓红和酸性红73对照试剂适量，分别加70%乙醇溶解并制成每1ml含0.1mg的溶液作为对照试剂溶液。照薄层色谱法（中国药典2005年版第一部附录VI B）试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-氨水-水（1：3：3：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，在可见光下检视。供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点。若出现相同颜色的斑点，则用下列高效液相色谱法验证。 （2）照高效液相色谱法（中国药典2005年版一部附录VI D）测定。 色谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇为流动相A，以0.05mol/L醋酸铵为流动相B,按下表进行梯度洗脱：检测波长为508nm。理论板数按胭脂红峰计算，应不低于2000。 时间（min） 流动相A（%） 流动相B（%） 0-12 2045 8055 12-25 4580 5520 25-30 80 20 对照试剂溶液的制备 取检查（1）项下的对照试剂溶液，作为对照试剂溶 液。 供试品溶液的制备 取检查（1）项下的供试品溶液，作为供试品溶液。 测定法 取供试品溶液和对照试剂溶液各10l，注入液相色谱仪，记录色谱图。 结果判断 供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。 若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰的紫外- 可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。朱砂（水飞）ZhushaCINNABARIS检查 808猩红 （1）取本品粉末0.2g，加乙醇10ml，超声处理10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取808猩红对照试剂适量，加乙腈制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照试剂溶液。照薄层色谱法（中国药典2005年版第一部附录VI B）试验，吸取上述两种溶液各10l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯（9：1）为展开剂，展开，取出，晾干，日光下检视。供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；若出现相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。 （2）照高效液相色谱法（中国药典2005年版一部附录VI D）测定。 色谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.1%的甲酸溶液（85：15）为流动相：检测波长为520nm。理论板数按808 猩红峰计算，应不低于2000。 对照试剂溶液的制备 取808猩红对照试剂适量，加乙醇制成每1ml约含60g的溶液，即得。 供试品溶液的制备 取检查（1）项下的供试品溶液，用微孔滤膜（0.45m）滤过，取出滤液，即得。 测定法 取供试品溶液和对照试剂溶液各10l，注入液相色谱仪，记录色谱图。 结果判断 供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。808猩红对照试剂色谱峰在5191nm显示最大吸收。备注：必要时可采用高效液相色谱-质谱联用方法验证。建议采用乙腈-0.1%的甲酸溶液（80：20）流动相系统。血竭XuejieSANGUIS DRACONIIS检查 苏丹红、808猩红、松香酸 （1）取本品粉末0.2g，加乙醇25ml，超声处理15分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取松香酸、苏丹红、808猩红对照试剂适量，分别加乙醇制成每1ml含松香酸1mg，含苏丹红、808猩红0.1mg的溶液，作为对照试剂溶液。照薄层色谱法（中国药典2005年版第一部附录VI B）试验，吸取上述供试品溶液2l和对照试剂溶液各5l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯（9：1）为展开剂，展开，取出，晾干，再以石油醚（6090）-乙酸乙酯-冰乙酸（9:1：0.1）为展开剂，展开，取出，晾干。日光下检视，供试品色谱中，在与苏丹红、808猩红对照试剂色谱相应的位置，不得显示相同颜色的斑点；紫外光灯（254nm）下检视，供试品色谱中，在与松香酸对照试剂色谱相应的位置，不得显相应的荧光淬灭斑点。再喷以10%硫酸/乙醇溶液，105加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与松香酸对照试剂色谱相应的位置，不得显相应的棕黄色斑点；紫外光灯（365nm）下检视，供试品色谱中，在与松香酸对照试剂色谱相应的位置，不得显相应的蓝色荧光斑点。若出现相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。 （2）苏丹红、808猩红 照高效液相色谱法（中国药典2005年版一部附录VI D）测定。色谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-水（95：5）为流动相，检测波长为520nm，理论板数按苏丹红峰计算，应不低于2000。对照试剂溶液的制备 取苏丹红、808猩红对照试剂适量，分别加乙醇制成每1ml约含40g的溶液，即得。供试品溶液的制备 取检查（1）项下的供试品溶液，用微孔滤膜（0.45m）滤过，取续滤液，即得。测定法 取供试品溶液和对照试剂溶液各10l，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果判断 供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。苏丹红对照试剂色谱峰在3501nm，5171nm显示最大吸收；808猩红对照试剂色谱峰在5181nm显示最大吸收。松香酸 色谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.1%甲酸（75：25）为流动相，检测波长为241nm，理论板数按松香酸峰计算，应不低于4000。对照试剂溶液的制备 取松香酸对照试剂适量，加乙醇制成每1ml约含松香酸100g的溶液，即得。供试品溶液的制备 取检查（1）项下的供试品溶液1ml，加乙醇稀释至10ml，用微孔滤膜（0.45m）滤过，取续滤液，即得。测定法 取供试品溶液和对照试剂溶液各10l，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果判断 供试品色谱中，应不得出现与松香酸对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。松香酸对照色谱峰在2411nm显示最大吸收。沉香Chenxiang检查 松香 （1）取本品粉末1g，置具塞试管中，加石油醚（6090）10ml，振摇10数分钟，滤过，取滤液5ml，置另一试管中，加新配置的0.5%醋酸铜溶液5ml，振摇后，静置分层，石油醚层不得显绿色。若石油醚层显绿色，则进行如下试验。（2） 松香酸 取本品粉末2g，加石油醚（6090）20ml，振摇数分钟，滤过，滤液浓缩至1ml作为供试品溶液。取松香酸对照试剂10mg，加石油醚（6090）10ml溶解，作为对照试剂溶液。照薄层色谱法（中国药典2005年版第一部附录VI B）试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各5l，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚（6090）-乙酸乙酯-冰乙酸（9：1：0.1）为展开剂，展开，取出，晾干。置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与松香酸对照试剂色谱相应的位置，不得显相应的荧光淬灭斑点。再喷以10%硫酸/乙醇溶液，105加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与松香酸对照试剂色谱相应的位置，不得显相应的棕黄色斑点；紫外光灯（365nm）下检视，供试品色谱中，在与松香酸对照试剂色谱相应的位置，不得显相应的蓝色荧光斑点。若出现相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。 （3） 松香酸 照高效液相色谱法（中国药典2005年版一部附录VI D）测定。色谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.1%甲酸（75：25）为流动相；检测波长为241nm；柱温20。对照试剂溶液的制备 取松香酸对照试剂适量，加甲醇溶解并制成1ml含0.1mg的溶液，摇匀，即得。供试品溶液的制备 取本品粉末1g，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，取续滤液，即得。测定法 取供试品溶液和对照试剂溶液各10l，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果判断 供试品色谱中，应不得出现与松香酸对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。备注：必要时可采用高效液相色谱-质谱联用方法验证。乌梅（炙乌梅）WumeiFRUCTUS MUME检查 （1）取本品2粒，加70%乙醇20ml，超声提取20分钟，溶液颜色不得显墨绿色。若溶液呈墨绿色，则采用下列方法检查。 （2）苋菜红、亮蓝、日落黄 薄层色谱法 取本品2粒，加70%乙醇20ml，超声提取20分钟，取上清液离心，作为供试品溶液。另取苋菜红、亮蓝、日落黄溶液（国家标准物质、标示浓度0.5mg/ml，国家标准物质研究中心）各1ml，分别加70%乙醇稀释至5ml，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录VI D）试验，吸取供试品溶液5l，对照品溶液各2l，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-氨水-水（1：3：3：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱的相应位置应不得检出相同颜色的斑点。若检出相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法进一步检查。 （3）高效液相色谱法 照高效液相色谱法（中国药典2005年版一部附录VI B）测定。色谱条件与系统适应性 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相A为甲醇，流动相B为0.02mol/L醋酸铵（冰乙酸调pH 4.0），梯度洗脱程序为：0-45分钟，流动相A,20%50%,流动相B,80%50%。检测波长500nm（检验苋菜红和日落黄）和630nm（检验亮蓝）。理论板数按苋菜红峰计算应不低于4000。测定法分别吸取检查（1）项下供试品溶液5l和检查（2）项下对照品溶液各2l，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，即得。结果判断 供试品色谱中，应不得检出与对照色谱保留时间相同的色谱峰。大黄DaHuangRHEI RADIX ET RHIZOMA检查 土大黄苷 取本品粉末0.1g，加甲醇10ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取土大黄苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液（对照品溶液应临用前现配制）。再取华北大黄（大黄伪品）参照物0.1g，同法制成参照物溶液，照薄层色谱法（附录 B）试验，吸取上述三种溶液各5l，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯-甲酸乙酯-丙酮-甲酸-甲醇（30:5:5:0.1:20）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应不得检出亮蓝色荧光斑点；与参照物色谱相比较，应不得显相同的总体色谱特征。黄柏（饮片）HuangboCORTEX PHELLODENDRT CHINENSIS检查 金胺O （1）取本品粉末2g，加70%乙醇20ml，密塞，超声处理20分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。取金胺O对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml中含0.1mg的溶液，即得。照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录VI B）试验，取供试品溶液和对照试剂溶液各10l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-氨水（4：5：1：1）的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，立即在可视光下检视。供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；若出现相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。（2）照高效液相色谱法（中国药典2005年版一部附录VI D）测定。 色谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.025mol/L磷酸二氢钾溶液（含0.2%三乙胺，并用磷酸调pH值为3.0）（35：65）为流动相；检测波长为432nm。理论板数按金胺O对照试剂色谱中的主峰峰计算，应不低于2000。对照试剂溶液的制备 取金胺O对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml含50g的溶液，即得。供试品溶液的制备 取上述（1）项下的供试品溶液，即得。 测定法 取供试品溶液和对照试剂溶液各10l，注入液相色谱仪，记录色谱图。 结果判断 供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。若 出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰在320450nm波长范围的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。备注：必要时可采用高效液相色谱-质谱联用方法验证。建议采用乙腈-0.05mol/L的醋酸铵溶液（35：65）流动相系统。黄连（饮片）HuangLianRHIZOMA COPTIDIS检查 金胺O （1）取本品粉末2g，加70%乙醇20ml，密塞，超声处理20分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。取金胺O对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml中含0.1mg的溶液，即得。照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录VI B）试验，取供试品溶液和对照试剂溶液各10l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-氨水（4：5：1：1）的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，立即在可视光下检视。供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；若出现相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。（2）照高效液相色谱法（中国药典2005年版一部附录VI D）测定。 色谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.025mol/L磷酸二氢钾溶液（含0.2%三乙胺，并用磷酸调pH值为3.0）（35：65）为流动相；检测波长为432nm。理论板数按金胺O对照试剂色谱中的主峰峰计算，应不低于2000。对照试剂溶液的制备 取金胺O对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml含50g的溶液，即得。供试品溶液的制备 取上述（1）项下的供试品溶液，通过硅胶柱（柱内径：1.0cm，100200目硅胶，2克，干法装柱），取流出液，即得。 测定法 取供试品溶液和对照试剂溶液各10l，注入液相色谱仪，记录色谱图。 结果判断 供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰在320450nm波长范围的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。备注：必要时可采用高效液相色谱-质谱联用方法验证。建议采用乙腈-0.05mol/L的醋酸铵溶液（35：65）流动相系统。总灰分 不得过5.0%（中国药典2005年版一部附录 K）。延胡索YanhusuoRHIZOMA CORYDALIS检查 金胺O （1）取本品粉末2g，加70%乙醇20ml，密塞，超声处理20分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。取金胺O对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml中含0.1mg的溶液，即得。照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录VI B）试验，取供试品溶液和对照试剂溶液各10l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-氨水（4：5：1：1）的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，立即在可视光下检视。供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；若出现相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。（2）照高效液相色谱法（中国药典2005年版一部附录VI D）测定。 色谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.025mol/L磷酸二氢钾溶液（含0.2%三乙胺，并用磷酸调pH值为3.0）（35：65）为流动相；检测波长为432nm。理论板数按金胺O对照试剂色谱中的主峰峰计算，应不低于2000。对照试剂溶液的制备 取金胺O对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml含50g的溶液，即得。供试品溶液的制备 取上述（1）项下的供试品溶液，即得。 测定法 取上述供试品溶液和对照试剂溶液各10l，注入液相色谱仪，记录色谱图。 结果判断 供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰在320450nm波长范围的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。备注：必要时可采用高效液相色谱-质谱联用方法验证。建议采用乙腈-0.05mol/L的醋酸铵溶液（35：65）流动相系统。西红花XihonghuaSTIGMA CROCI检查 金胺O 新品红 柠檬黄 胭脂红（1） 取本品0.5g，剪碎，加70%乙醇10ml，超声处理20分钟，离心，取上清液作为供试品溶液。另取金胺O、新品红、柠檬黄、胭脂红对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照试剂溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录 B）试验，吸取供试品溶液10l，对照试剂溶液5l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-冰乙酸（7：1：2）为展开剂，展开，取出，晾干，在可见光下检视。供试品色谱中，在与金胺O、新品红对照试剂色谱斑点相应的位置上，不得显相同颜色的斑点。上述薄层板再以乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-氨水-水（1：3：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，在可见光下检视。供试品色谱中，在与柠檬黄、胭脂红对照试剂色谱斑点相应的位置上，不得显相同颜色的斑点。若出现相同颜色的斑点，或相同位置有干扰不能判断时，则用下列高效液相色谱法验证。（2） 照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VI D）测定。色谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，0.05mol/L醋酸铵溶液为流动相B，按下表进行梯度洗脱： 时间（min） 流动相A（%） 流动相B（%） 0-30 545 9555在432nm波长检测金胺O和柠檬黄；在509nm波长检测胭脂红；在550nm波长检测新品红。理论板数按金胺O峰计算，应不低于6000。对照品溶液的制备 取金胺O、新品红、柠檬黄、和胭脂红对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml约含25g的溶液，即得。供试品溶液的制备 取上述检查（1）项下的供试品溶液，即得。测定法 取上述供试品溶液和对照试剂溶液各10l，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果判断 供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应谱峰的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。备注：1、必要时可采用高效液相色谱-质谱联用方法验证。建议采用乙腈-0.02mol/L的醋酸铵流动相系统。 2、因柠檬黄保留较弱，建议采用250mm规格液相色谱柱。青黛QingdaiINDIGO NATURALIS检查 孔雀石绿（1） 取本品0.5g，加3%甲酸甲醇溶液10ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取孔雀石绿对照试剂，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述供试品溶液及对照试剂溶液各1020l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-三氯甲烷（5：5）为展开剂，置氨蒸汽饱和的层析缸内，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同的蓝色斑点。若供试品色谱中出现与对照试剂相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。（2）照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VI D）测定。 色谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.05mol/L醋酸铵溶液（用冰醋酸调pH为4.5）（80：20）为流动相；采用二极管阵列检测器；检测波长为618nm。理论板数按孔雀石绿峰计算，应不低于3000。 对照试剂溶液的制备 取孔雀石绿对照试剂适量，加甲醇制成每1ml含20g的溶液，即得。供试品溶液的制备 取检测（1）项下的供试品溶液，用微孔滤膜（0.45m）滤过，取续滤液，即得。 测定法 取上述供试品溶液和对照试剂溶液各5l，注入液相色谱仪，记录色谱图。 结果判断 供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。若 出现保留时间相同的色谱峰，其在200700nm波长范围的紫外-可见吸收光谱应与对照品不相同。 备注：必要时可采用高效液相色谱-质谱联用方法作进一步验证。人工牛黄Renggong NiuhuangCALCULUS BOVIS ARTIFACTUS鉴别 取本品粉末0.5g，加入三氯甲烷10ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取胆红素对照品适量，加三氯甲烷制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法法（中国药典2010年版一部附录 B）试验，吸取上述两种溶液各510l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-三氯甲烷-甲醇-甲酸（20：3：0.5：0.15）为展开剂，展开，取出，晾干，置日光和紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点和荧光斑点。检查 炽灼残渣 取本品1.0g，精密称定，依法测定（中国药典2010版一部附录 J），不得过15.0%。胭脂红、金胺O、金橙 （1）取本品粉末0.5g，加甲醇10ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取胭脂红、金胺O、金橙对照试剂适量，分别加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法法（中国药典2010年版一部附录 B）试验，吸取上述两种溶液各510l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-氨水-水（1：3：3：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与胭脂红、金胺O、金橙对照品色谱相应的位置上，不得显相同红色、黄色、橙红色的斑点。若供试品色谱中出现与对照品相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。（2）照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VI D）测定。色谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇为流动相A，以0.05mol/L醋酸铵溶液为流动相B，按下表进行梯度洗脱；采用二极管阵列检测器；检测波长为508nm、484nm、432nm。理论板数按胭脂红峰计算，应不低于2000。 时间（min） 流动相A（%） 流动相B（%） 012 1090 9055 1220 4570 5530 2040 7080 3020 4041 8010 2090 4146 10 90对照试剂溶液的制备 取胭脂红、金胺O、金橙对照试剂适量，分别加甲醇制 成每1ml含胭脂红0.1mg、金胺0.05mg、金橙0.05mg的溶液，作为对照试剂溶液。供试品溶液的制备 取检查薄层色谱法项下供试品溶液，用0.45m微孔滤膜滤 过，即得。测定法 取上述供试品溶液和对照试剂溶液各10l，注入液相色谱仪，记录色谱图。 结果判断 供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，其在200700nm波长范围的紫外-可见吸收光谱应与对照试剂不相同。备注：必要时可采用高效液相色谱-质谱联用方法作进一步验证。冬虫夏草DongchongxiacaoCORDYCEPS检查 （1）苋菜红、胭脂红、日落黄、亮蓝薄层色谱法 取本品粉末0.5g，加甲醇5ml，密塞，超声处理20分钟，离心，取上清液浓缩至1ml，作为供试品溶液。另取苋菜红、胭脂红、日落黄、亮蓝对照试剂，分别加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照试剂溶液。照薄层色谱法法（中国药典2010年版一部附录 B）试验，吸取上述供试品溶液510l，对照试剂溶液各5l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-氨水-水（1：3：3：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得检出相同颜色的斑点。若检出相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VI D）测定。色谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇为流动相A，以0.05mol/L醋酸铵溶液为流动相B，按下表进行梯度洗脱。采用二极管阵列检测器；检测波长：512nm检测苋菜红、胭脂红和日落黄，628nm检测亮蓝。理论板数按胭脂红峰计算，应不低于2000。 时间（min） 流动相A（%） 流动相B（%） 015 1025 9075 1520 2570 7530 2030 7075 3025 3031 7510 2590 3140 10 10供试品溶液的制备 取检查（1）项下供试品溶液，用0.45m微孔滤膜滤过，即得。对照试剂溶液的制备 取检查（1）项下对照试剂溶液，用0.45m微孔滤膜滤过，即得。测定法 取上述供试品溶液10l和对照试剂溶液各5l，注入液相色谱仪，记录色谱图。 结果判断 供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。 若出现保留时间相同的色谱峰，其在200700nm波长范围的吸收光谱应与对照试 剂应不相同。（2）808猩红 薄层色谱法 取808猩红对照试剂适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照试剂溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版第一部附录VI B）试验，吸取检查（1）项下的供试品溶液10l及上述对照试剂溶液各5l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-环己烷-丁酮-甲酸-水（5：5：2：1.5：0.3）为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在于对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；若出现相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法进一步验证。 照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VI D）测定。色谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-水（95：5）为流动相，检测波长为520nm，理论板数按808 猩红峰计算，应不低于2000。对照试剂溶液的制备 取检查（2）薄层色谱法项下的对照试剂溶液，用微孔滤膜（0.45m）滤过，取出滤液，即得。供试品溶液的制备 取检查（1）项下的供试品溶液，用微孔滤膜（0.45m）滤过，取出滤液，即得。测定法 取供试品溶液10l及对照试剂溶液各5l，注入液相色谱仪，记录色谱图。 结果判断 供试品色谱中，应不得检出与对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。若 检出保留时间相同的色谱峰，则色谱峰在200700nm波长范围的吸收光谱应不相同。备注：必要时可采用高效液相色谱-质谱联用方法验证。乳香RuxiangOLIBANUM检查 松香酸 （1）取本品粉末1g，加乙醇25ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取松香酸对照试剂适量，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照试剂溶液。照薄层色谱法法（中国药典2010年版一部附录 B）试验，吸取上述供试品溶液25l和对照试剂溶液5l，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚（6090）-乙酸乙酯-冰乙酸（9：1：0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与松香酸对照试剂色谱相应的位置，不得显相应的荧光淬灭斑点。若出现相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。（2）照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VI D）测定。色谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-四氢呋喃-0.1%甲酸（35：25：40）为流动相，检测波长为241nm，柱温25，理论板数按松香酸色谱峰计算，应不低于2000。对照试剂溶液的制备 取松香酸对照试剂适量，加乙醇制成每1ml含50g的溶液，即得。供试品溶液的制备 取检查（1）项下的供试品溶液1ml，加乙醇稀释至20ml，用微孔滤膜（0.45m）滤过，取出续滤液，即得。测定法 取供试品溶液510l及对照试剂溶液各10l，注入液相色谱仪，记录色谱图。 结果判断 供试品色谱中，应不得检出与对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。若检出保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰在210260nm波长范围的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同，松香酸对照试剂色谱峰2412nm 显示最大吸收。没药MoyaoMYRRHA检查 松香酸 （1）取本品粉末1g，加乙醇25ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取松香酸对照试剂适量，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照试剂溶液。照薄层色谱法法（中国药典2010年版一部附录 B）试验，吸取上述供试品溶液25l和对照试剂溶液5l，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚（6090）-乙酸乙酯-冰乙酸（9：1：0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与松香酸对照试剂色谱相应的位置，不得显相应的荧光淬灭斑点。若出现相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。（2）照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VI D）测定。色谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-四氢呋喃-0.1%甲酸（35：25：40）为流动相，检测波长为241nm，柱温25，理论板数按松香酸色谱峰计算，应不低于2000。对照试剂溶液的制备 取松香酸对照试剂适量，加乙醇制成每1ml含50g的溶液，即得。供试品溶液的制备 取检查（1）项下的供试品溶液1ml，加乙醇稀释至20ml，用微孔滤膜（0.45m）滤过，取出续滤液，即得。测定法 取供试品溶液510l及对照试剂溶液各10l，注入液相色谱仪，记录色谱图。 结果判断 供试品色谱中，应不得检出与对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。若检出保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰在210260nm波长范围的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同，松香酸对照试剂色谱峰2412nm显示最大吸收。阿胶中铬（Cr）含量检查的补充检验方法铬的测定第一法：石墨炉原子吸收法 测定条件 波长：357.9nm，干燥温度110，持续20s；灰发温度1200，持续 10s；原子化温度2450，持续3s；清除温度2800，持续2s。背景校正为塞曼效应。 标准曲线的制备 精密量取铬标准贮备液（1g/ml）5ml，用2%硝酸溶液稀释至 100ml，作为对照品溶液（50ng/ml）。采用仪器自动稀释功能，制备标准曲线，浓度分 别为0、4、8、20、30、40ng/ml。进样总体积为10l，其中对照品溶液和2%硝酸溶 液总量为2l，2%硝酸溶液8l，注入石墨炉原子化器，测定吸收度，以吸收度为纵坐 标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。 供试品溶液的制备 精密称取本品粉末0.5g，置聚四氟乙烯消解罐内，加硝酸5ml， 混匀，置微波消解炉内，按操作规程安装好装置，按下述程序消解： 第一步：以1600w功率，3分钟内自室温加热至110，保持2分钟； 第二步：以1600w功率，2分钟内自110加热至150，保持3分钟； 第三步：以1600w功率，3分钟内自150加热至185，保持9分钟。 消解结束后，冷却至罐内温度低于70，缓缓放气，取出內罐，置加热板上，于120加热，使NO2蒸汽挥尽，并持续浓缩至23ml，放冷，加水稀释至25ml，摇匀， 作为供试品溶液。同法制备试剂空白溶液。 测定法 精密量取空白溶液与供试品溶液各2l，加2%硝酸溶液8l，注入石墨炉原子化器，照标准曲线的制备项下方法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液中铬的含量，计算，即得。第二法：电感耦合等离子质谱法 照电感耦合等离子提质谱法（中国药典2