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文档简介
核酸检测中的留样处理,1,核酸检测简介,核酸检测标本留样处理,1,2,主要内容,2,核酸检测,什么是核酸检测呢?,3,核酸检测,核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物.有两类:(DNA)和(RNA),组成,核酸(DNA),N个,相连,4,核酸检测,核酸是最基本的遗传物质,绝大部分生物的遗传物质都是核酸。由核酸编码指导蛋白质的合成,从而形成多种多样的生物体。,5,核酸检测,核酸检测,酶免检测,通过一种叫做PCR的技术,在分子水平进行检测。相比于现行的酶免检测,核酸检测可以显著的缩短窗口期。乙肝:从50天缩短至25天丙肝:从72天缩短至59天Hiv病毒:从22天缩短至11天。,6,核酸检测,7,血液样本留取,1.血液中存在大量的PCR抑制物:免疫球蛋白,蛋白酶,血红素,乳铁蛋白,肌红蛋白,多糖等等。这些PCR抑制物的存在会干扰PCR反应的进行。2.环境中存在着核酸酶(RNA酶和DNA酶)可使核酸降解。一次检测要检测出样本中极少的核酸含量,从而确定该袋血是否为合格血液。为了保证这极少量的核酸不被降解,以及PCR反应又能顺利进行。因此,核酸检测对标本的要求很高!,8,血液样本留取,分离胶,分离胶,首选EDTA和枸橼酸盐,避免使用肝素抗凝。无菌无DNA酶、无RNA酶:含分离胶的真空采血管;,9,血液样本留取,采样前对样管进行检查:确保试管无裂痕,无渗漏,管盖无松动,且在有效期内使用。,10,血液样本留取,采血人员应严格按照血站技术操作规程2012版和湘潭市中心血站标本留取和标本交接操作规程的要求进行采血留样。,11,血液样本留取,1.标本留取应检查是否足量,如量少,应更换采血管重新留取,杜绝开盖留取。,12,血液样本留取,2.留样方式:旁袋留样。,3.留样顺序:先留酶免管,后留核酸管。,13,血液样本留取,14,留样后处理,1.贴献血序列号。贴于采血管正中位置,避免贴的过于靠上或者靠下。,15,2.立刻离心,3000转离心10分钟。离心后检查:,留样后处理,试管有无渗漏破损。血液检测量不符合要求。溶血程度核酸管上清液颜色脂血程度其他异常情况。,16,3.离心后标本,2-8保存。4.2-8条件下,送至检验科,进行低温离心。,留样后处理,17,留样不当的后果,18,留样不当的后果,19,留样不当的后果,检测有风险,留样需谨慎!,对于不合
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