方法学选择与评价PPT参考课件.ppt

第三章方法学的选择和评价，李，第三章方法学的选择和评价，第一节实验方法的评价和选择，第二节测量的可追溯性、误差和不确定度，第三节方法学的评价，第一节实验方法的评价和选择，方法学的评价(评价)是通过实验方法来测量分析方法的技术性能，并评价它们是否可接受，目的是确定该方法是否具有足够的方法学性能来说明检测系统的可靠性并满足临床要求。方法学评价的具体内容第1节实验方法的评价和选择第1节实验方法的分类第2节参考材料的分类第4节方法选择的原则第5节方法选择和评价的基本步骤第6节定量实验的方法学评价第6节定性实验的方法学评价第1节定义方法定义是通过研究未发现不准确或不精确的具有最高准确度和最小系统误差的方法，其测量结果最接近“真值”。目的：主要用于评价参考方法和评价原始参考资料，但不直接用于鉴别常规方法。参考方法被定义为这样一种方法，在该方法中，准确度和精密度已得到充分验证，干扰因素很少，与重复测量的随机误差相比，系统误差可忽略不计，并且具有适当的灵敏度、特异性和较宽的分析范围。目的：主要用于鉴别常规方法。常规方法是一种经济实用的临床常规检验方法，其性能指标满足临床需要，具有足够的精密度、准确度、特异性和合适的分析范围。目的：该方法经相关学术机构认可后可作为推荐方法。常规方法、参考方法、测定方法、增加准确度、增加应用范围、不同方法之间的关系、测定方法、初级参考材料、参考方法、次级参考材料、校准品、常规方法、对照材料、不同水平的实验方法和参考材料之间的相关性、返回目录以及参考材料的分类。参考物质也称为标准物质或国际标准物质标准化委员会的定义：参考物质的一种或多种物理或化学成分已经完全确定，可用于校准仪器、评估测定方法或给其他物质一个固定值的参考物质称为认证参考物质。它的固定值是由一个可追踪的测量程序确定的。每个参考值的不确定度为：标准值及其置信水平。完全不确定。2.参考文献的分类。1.主要参考文献的特点：含量测定、稳定性和一致性。数值由确定性方法或高精度方法确定。用途：可用于纠正确定性方法。评估和校准参考方法以及“二级参考”的固定值都被认证为一级参考。2.参考文献的分类。2.二次参考的特性：纯溶液(水或有机溶剂)或特殊基质的纯溶液。可由实验室自己制备或作为商品，物质的量由参考方法或通过与主要参考物质的比较来确定。目的：主要用于将常规方法标准化为定值控制物质。标准物质的分类校准品的特性：冻干产品或溶液可以通过参考方法与一级或二级标准物质固定在一起。目的：校准常规方法和仪器。2.参考物质的分类。质控物质的特性，即质控物质：适用于检测过程，其成分和基质与被检测样品相同或相似，且均匀稳定。目的：对照品用于日常质量控制。对照物质和样品同步测量。将测试结果与对照物质的保证值进行比较，以评估其准确性并检查实验室中是否存在系统误差。第三，方法选择的原则，实用性：样品制备少方法选择的原则，可靠性：精密度：变异系数一般应小于5%。准确度是指测量值与“真值”的符合程度，而一般偏差系数(CB)应小于5%。特异性是指只与待测物质反应，而不与具有相似结构的其他化合物反应的能力。用于测量检测极限的检测极限或“检测极限”通常指从适当的“空白”读数中区分的能力。检测系统可检测的受试物质的最小量，返回到区段列表，4。方法选择和评估的基本步骤，5。提出要求，收集数据，确定候选方法，进行初步评估。原则数据、仪器和试剂、试剂成分的储存稳定性、生物安全性、样品要求、准精密度、特异性和灵敏度、标准化操作程序、设备和设施、服务和技术支持、返回区段列表、5。定量实验的方法学评价定量实验检测系统可以给出具体的数值实验结果。定量实验的方法学评价包括：线性范围、准确度、精密度、灵敏度、特异性、参考区间等性能指标。第六，定性实验的方法学评价，定性实验结果：阳性或阴性或非定性检测性能评价：重复性研究方法学比较，(1)评价前的准备，对实验室工作人员进行培训，使其熟悉待评价的试剂或系统，以根据制造商的要求掌握样品和试剂的加工和储存过程。基质效应定性实验中应注意阴性和阳性质控物质的测定。其次，应进行定性实验的重复性研究，以确定该方法的临界值。对于同一样品，当在重复实验中获得阳性或阴性结果时，获得分析物浓度的概率为50%。根据临界值制备浓度为20%的样品；样品分别检测20次，记录阴性和阳性结果。结果分析：对于浓度分别为50%和20%的样品，“临界值”样品的阴性结果和阳性结果不等于或大于95%，同时浓度为-20%的样品的阴性结果等于或大于95%，阳性和/或阴性结果的数量小于95%。对于测试物质浓度超出临界值20%浓度范围的样品，实验方法将给出稳定的结果。临界浓度不准确，结果数据不充分，方法学的剂量-反应曲线在临界值处是非线性的。不同浓度的实验样品应分别制备并重新评估。(3)定性实验方法的比较和比较方法：另一种定性方法，“金标准”法、定量法或临床诊断法。样本的类型和数量：最好使用常规患者的新鲜样本，阴性和阳性样本分别超过50个。实验过程：性能指标：敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值在10-20天内完成。表3-2:定性实验性能指标由已知样本临床诊断结果判断，定性实验性能指标由已知样本临床诊断结果判断。灵敏度=A/(A C) 100%特异性=D/(B D) 100%阳性预测值=A/(A B) 100%阴性预测值=D/(C D) 100%。计算了实验方法和比较法的比较结果。正符合率=a/(a . c)100%=93.4%负符合率=d/(b . d)100%=95.1%总符合率=(a . d)/n100%=94.1%，返回章节目录，第二节值可追溯性误差和不确定度，1。价值可追溯性的概念和意义。参考3的值可追溯性。错误4的分类和表示。测量不确定度，一，量值溯源的概念和意义，溯源性：通过具有规定不确定度的不间断传输链，可以将测量结果或标准值与规定的参考标准联系起来，从而可以从技术上保证和验证测量结果的准确性。参考资料：文学硕士标准分类，返回目录，第二，参考物质的可追溯性，可追溯性链：测量程序用于设置某一物质，该物质用作下一个测量程序的校准器，依此类推，以形成不间断的比较链，(1)参考物质的可追溯性程序，以及(1)可追溯性链和校准水平。 国际单位制可追溯链：可追溯性测量链的理想终点是国际单位制中其他参考材料的可追溯性：对于没有国际单位制的分析物，可以追溯“国际惯例”中表示的参考材料和参考测定方法。 (1)参考物质值的可追溯性程序，2。参考物质值的传输方案，以及3。校准可追溯性的验证。体外诊断试剂制造商测量的值应与参考方法测量的值相同。体外诊断试剂制造商测量的结果在数学上是等价的，即线性回归方程的斜率为1，截距为0。要求制造商参考材料的测定结果具有互操作性。(1)标准物质的可追溯性程序，4)校准品在可追溯性中的作用，校准品在可追溯性中的作用，实现可追溯性的“桥梁”是实现可追溯性目的最理想和最可靠的方法，可追溯性的可靠评价，实验室之间的质量评价是最容易实现的标准物质可追溯性的长期评价方法，以及(1)标准物质的可追溯性程序，5)可追溯性的目的和评价。可追溯性的目的得以实现：结果的可靠的体外诊断试剂制造商能够按照国际标准化组织17511的要求实现校准产品定值的计量可追溯性，可追溯性的评价室间质量评价是最容易实现值的可追溯性的长期评价方法，(2)参考物质值可追溯性的重要性，通过可追溯参考校准常规方法测量的患者样本结果的准确性源自处理样本和新鲜患者样本之间的矩阵差异。参考方法的准确性不能通过参考完全转移到患者样本，以调整参考值并返回到节点列表。第三，误差的分类和表示是指测量结果和测量真实值之间的差异。首先，系统误差，1。定义是指在对同一测量样本进行多次测试期间，它保持不变或根据某些规则而变化的事实。也称为方法错误和固定错误。由于不断的因素和重复出现，它可以被识别和纠正2。来源方法误差：由检测方法的固有缺陷引起仪器误差：由波长漂移、测量仪器不准确、温度或酸碱度不准确等未校准仪器引起的误差。试剂错误：试剂质量差，实验用水不合格，对照品不纯操作错误：操作不规范，保温时间不足，加样不准确。(2)随机误差(re)。1.随机误差被定义为在对同一测量对象进行多次测试期间，由意外因素引起的不可预测的变化。这也被称为意外错误。随机误差具有不确定的影响，没有大小和方向，呈正态分布。这种错误是无法控制和纠正的。2.源随机误差反映了分析方法的不精确性。不可避免的是，不可预测的测量仪器、试剂、环境和人员可以严格按照标准化操作程序减少随机误差。(3)误差的表示方法，绝对误差：指检测值与真值或约定真值之间的差值。该单位与检测值相同，可用于评估检测结果的准确性。相对误差：指检测值与真值或约定真值的绝对误差之比，通常用百分比表示，能客观地表示检测结果的准确性。总误差：正常样品测量结果和真实值之间的差值是随机误差和系统误差的总和。(1)定义表征合理给予测量值的分散性并与测量结果相关的参数。不确定度是指测量值的分散度甲级标准不确定度：指通过统计分析评估的不确定度。其评定方法为非统计分析法评定的甲级标准不确定度。其评定方法为非统计分析法评定的乙级标准不确定度。其评估方法为乙级评估。(2)不确定度分类，扩展不确定度：指确定测量结果区间的数量，并将测量值分布合理分配给该区间所包含的特定概率。具有一定可信度的测量值都在这个区间内，也称为范围不确定性或传播不确定性。合成标准不确定度：是指当测量结果由其他几个值获得时，根据其他量的方差和协方差计算的标准不确定度。(3)不确定度计算。精确计算不确定性非常困难。一般而言，实验室的不确定度只能近似估计为组合不确定度，其表示为：返回章节目录，测量不确定度和误差之间的主要差异，第3节方法评估，第1节准确度评估，第2节精密度评估，第3节检测限评估，第5节可报告范围评估，第1节准确度评估，(1)定义准确度指测量值接近真实值的程度。一般来说，准确度评价方法以偏差和偏差系数来表示：恢复试验、干扰试验、对比试验、(2)恢复试验和恢复试验。回收试验用于评估实验方法正确测定添加到常规样品中的纯分析物(质量、浓度和活性)的能力。结果从回收率方面评价实验方法的准确性，(2)回收实验，回收浓度=样品最终测定浓度-基础样品浓度，(1)回收实验的基本步骤，(2)回收实验中的注意事项，利用常规样品基体吸收量反复测定计算比例系统误差，准确加入待测标准溶液浓度：比例系统误差=100%-平均回收率，(3)干扰实验，干扰物质可能是测量误差的重要来源。干扰物质引起的误差是持续的系统误差。与分析物浓度无关的常见干扰物质包括：病理条件下的代谢物：糖尿病；患者自身原因：饮酒、药物、饮食等。样品中的因素：溶血、皮脂溢、黄疸等。样品处理中的因素：抗凝血剂、添加剂等。和(3)干扰测试。1.原理：将阳性干扰物加入临床标本的混合溶液(干扰试验样品)中，与无干扰物的相同混合溶液(干扰对照样品)组相比，无偏倚。被称为“配对差异”试验的混合溶液的干扰浓度应具有临床决定性水平。一般来说，最有效的方法是初步筛选一系列高浓度的可能干扰物。2.干涉实验的基本步骤。干扰实验的注意事项：试样：干扰物的浓度和体积经常被选择用于准确添加患者样本的抽吸；为了达到病理标本的最高浓度值，并选择尽可能小体积的干扰物：根据反应原理、制造商的建议和文献提示的测定次数，(4)方法对比试验。 这指的是将测试方法(待评估或验证的方法)与比较方法(参考方法或已知准确度的方法)进行比较，以从测试结果之间的差异来理解待评估方法的测试结果的偏差。 如果这些误差小于总误差，该方法是可以接受的。如果误差太大，必须拒绝该方法，或者需要识别和消除其误差源。(4)方法对比试验。1.基本方法：用试验法和比较法同时测定一组患者新鲜标本，分析两种检测系统测定结果的差异，得到恒定或成比例的系统误差数据。与实验要求相比，根据随机的可接受性，新鲜患者样本应在至少5个工作日内覆盖至少40个样本，从低值、参考区间到高值。实验用两种方法同时进行。正序列和反序列用于确定1、2、3、4、5、6、7、88、7、6、5、4、3、2和1，持续5天。必须进行校准和室内质量控制。数据处理和结果报告。方法比对试验的要点和样品要求：应选择常规检测的新鲜样品作为试验样品的比对方法：一批样品应采用两种方法同时测定，并计算两种检测方法测定结果的差异，以