《生物化学实验》教学大纲

生物化学实验课程教学大纲一、课程基本情况课程名称(中文):生物化学实验课程名称(英语):Biochemical experiment课程代码：学习点：0.5通勤时间：24理论时间：实验时间；24课程的本质：学科基础课程应用：园艺适用对象：本科第一课：生化评价方法：实际运行为20%，实验报告为50%，技术评价为30%教育环境：实验室开江大学：生态技术工程学院(a)课程简介：生物化学实验过程以生物体的组成成分蛋白质、核酸、酶等生物聚合物基本特性等为中心进行，有助于学生培养色谱、比色法、电泳、生物化学物质的分离、准备、分析、鉴定和实验方法、操作技术、几种基本仪器的原理和使用，提高学生的基本实验技术，全面分析问题的能力。(b)实验目的和要求：通过本课程的教学，学生可以了解和掌握现代生物科学研究的必要性，了解生物化学技术的基本原理、方法和技术，包括确认生物物质的特性、含量测定、生化分离技术的分离原理(盐析、等电点分离技术、电泳、色谱技术等)。通过学生独立的实验设计和实践，培养学生分析解决问题的能力和实际实践能力，同时培养学生对创新思维和生命科学探索的兴趣和爱好。要求学生上课前预习，写好预习报告，在实验过程中仔细观察，努力记录，放学后做实验报告。(c)实验项目清单：实验编号实验项目名称实验类型实验时间要求实验1生物化学实验基础知识蛋白质和氨基酸的着色反应验证2必经实验2蛋白质等电点测定和沉淀反应设计性3必经实验3纸色谱法分离鉴定氨基酸全面性3必经实验4醋酸纤维膜电泳分离血清蛋白全面性3必经实验5蛋白质的定量测定(紫外分光法)全面性3必经实验6总氮含量的测定.微量kjeldahl法全面性3必经实验7酵母RNA的分离及成分鉴定全面性3必经实验8花椰菜中核酸的分离与鉴定设计性4必经实验9酶的特性全面性2必经实验10小麦萌发前后淀粉酶活性的比较三星4必经实验11维生素c的提取和定量分析全面性4必经实验生物化学实验基础知识蛋白质和氨基酸的着色反应时间：3(a)实验类型：综合性(b)实验目的：1了解实验室规则和常用生化仪器名称，掌握实验记录和实验报告编写方法和实验室一些基本知识，初步掌握缓冲溶液准备方法，部分设备的正确操作。2掌握确认蛋白质的原理和方法。(c)实验内容：蛋白质和氨基酸与一些显色剂反应有一定的颜色反应。(d)寻求：通过实验了解蛋白质的某些颜色反应，并掌握确认蛋白质的方法。(e)每组人数：1(VI)主要设备和支持数量：25套通用设备(7)所属实验室：生化实验室实验2蛋白质等电点测定和沉淀反应时间：3(a)实验类型：设计(b)实验目的：1熟悉蛋白质的沉淀反应。2进一步掌握蛋白质的相关特性3了解蛋白质的性别解离特性。4学习如何测量蛋白质等电点。(c)实验内容：蛋白质的沉淀和变性，蛋白质的等电点测定(d)寻求：用各种沉淀试剂了解蛋白质沉淀的实质，区分可逆的盐析沉淀及不可逆沉淀作用。掌握测定蛋白质等电点的方法。(e)每组人数：1(VI)主要设备和支持数量：25套通用设备(7)所属实验室：生化实验室实验三种色谱法分离鉴定氨基酸时间：3(a)实验类型：综合性(b)实验目的：了解和掌握氨基酸纸色谱的原理和方法。(c)实验内容：以滤纸作为支撑物，样品在不同溶剂系统中分配系数不同，分离各种氨基酸，用任天堂染色，分析迁移速度，识别氨基酸种类。(d)寻求：掌握氨基酸纸色谱的实验原理，确认混合物中氨基酸的组成。(e)每组人数：1(VI)主要设备和支持数量：25套通用设备(7)所属实验室：生化实验室实验四乙酸酯薄膜电泳分离血清蛋白时间：3(a)实验类型：综合性(b)实验目的：熟悉醋酸纤维薄膜电泳分离蛋白质的原理和方法，了解电泳技术的一般原理(c)实验内容：以醋酸纤维膜为支撑物进行电泳，血清中的各种蛋白质在电场中的移动方式不同，可以通过电泳分离。(d)寻求：电泳分离血清蛋白质的方法(e)每组人数：1(VI)主要设备和支持数量：25套通用设备(7)所属实验室：生化实验室实验5蛋白质的定量分析(紫外线吸收法)时间：3(a)实验类型：综合性(b)实验目的：理解紫外线吸收法测定蛋白质浓度的原理熟悉紫外线分光光度计的使用(c)实验内容：本实验根据蛋白质组成中的芳香氨基酸，测定了紫外线280nm波长下的最大吸收峰，在一定浓度范围内，其浓度与吸光度成正比，用紫外线分光光度计绘制了标准曲线，测定了溶液中蛋白质的浓度。(d)寻求：掌握蛋白质的定量测定方法，掌握紫外线分光光度计的使用方法(e)每组人数：4人(六)主要设备和支持数：两组T6 UV-vis分光光度计(7)所属实验室：生化实验室实验6种总氮的测定-微量kjeldahl法时间：3(a)实验类型：综合性(b)实验目的：掌握凯氏定氮法测定蛋白质含量的原理和方法学习使用Kjeldahl instrument。(c)实验内容：用Kjeldahl方法测定了样品中蛋白质氮的含量，并进一步得到了样品中蛋白质的含量。(d)寻求：掌握凯氏仪器的使用方法，学习测定蛋白质含量的一种方法。(e)每组人数：4人(VI)主要设备和支持数：6套kjeldahl仪器(7)所属实验室：生化实验室实验7酵母RNA的分离及成分鉴定时间：3(a)实验类型：综合性(b)实验目的：了解核酸的成分，了解确认核酸和测定RNA含量的方法(c)实验内容：酵母核酸中含有很多RNA，在碱提取物中添加酸性乙醇溶液，可以沉淀核糖核酸，获得RNA粗产物，然后用苔藓黑酚方法确定RNA的含量(d)寻求：掌握酵母RNA的稀碱提取方法，掌握苔黑酚法测定RNA含量的方法。(e)每组人数：4人(VI)主要设备和支持数量：2套TDZ5-WS台式机离心机2套T6紫外分光光度计(7)所属实验室：生化实验室实验8花椰菜中核酸的分离与鉴定时间：3(a)实验类型：设计(b)实验目的：学习和掌握从花椰菜中分离核酸的原理和操作技术(c)实验内容：用冷稀三氯乙酸和稀高氯酸溶液低温提取花椰菜菌，去除酸溶性小分子，然后用有机溶剂提取，去除脂溶性物质，最后利用浓缩液和高氯酸提取DNA和RNA，定性和定量分析。(d)寻求：可以亲自设计实验，掌握从组织中分离核酸的方法，并进行定性和定量分析。(e)每组人数：4人(VI)主要设备和支持数量：2台TDZ5-WS台式机离心机(7)所属实验室：生化实验室实验9唾液淀粉酶的性质时间：3(a)实验类型：综合性(b)实验目的：了解温度、pH、活性剂和抑制剂对酶活性的影响学习如何测量酶的最佳温度，最佳pH值(c)实验内容：本实验通过唾液淀粉酶对淀粉及蔗糖的催化作用，观察了酶的特异性。用淀粉和蔗糖的酶解物和班尼迪克ct试剂的颜色反应，观察了淀粉酶、蔗糖酶的特异性。有些物质可以作为活化剂，提高酶活性，有些物质可以作为抑制剂，降低酶活性，影响淀粉水解的程度。因此，通过碘的颜色反应，判断淀粉水解程度，了解活化剂和抑制剂对酶作用的影响。(d)寻求：了解酶的特异性和温度、pH、活化剂及抑制剂对酶活性的影响(e)每组人数：1(VI)主要设备和支持数量：25套通用设备(7)所属实验室：生化实验室10小麦发芽前后淀粉酶活性的比较时间：3(a)实验类型：设计(b)实验目的：学习测定淀粉酶活性的方法了解小麦发芽前后淀粉酶活性的变化(c)实验内容：小麦发芽酶法提取酶法活性测定酶法活性计算(d)寻求：小麦发芽前后淀粉酶活性测定的自行设计实验(e)每组人数：1(VI)主要设备和支持数量：25套通用设备(7)所属实验室：生化实验室实验维生素c的提取和定量分析时间：3(a)