探讨整合素β1在小鼠慢性心肌炎中的作用

精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创1/5探讨整合素1在小鼠慢性心肌炎中的作用摘要目的观察整合素1CD29在慢性心肌炎小鼠心肌的表达，探讨其在慢性心肌炎中的作用。方法猪心肌肌凝蛋白致BALB/C小鼠自身免疫性心肌炎模型，观察并记录免疫小鼠发病情况，同时用免疫组化SP法检测CD29在心肌的表达变化。结果实验早期初次免疫后14、30D，小鼠心肌淋巴细胞浸润较明显，CD29在心肌的表达高于正常组P关键词整合素1慢性心肌炎心肌肌球蛋白扩张型心肌病DCM是导致心力衰竭的常见病因，其病因和发病机制目前还不十分清楚,且尚无有效治疗手段。近年来自身免疫学机制在该病发病中的作用日益受到重视1。整合素1CD29是整合素家族中的一员，它在炎症反应、细胞的增殖、分化，组织的修复、凋亡及基因表达的调节上起着重要作用。本研究通过检测CD29在慢性心肌炎小鼠心肌的表达情况，探讨其在心肌炎及DCM发生及发展过程中的作用。1材料与方法动物近交系BALB/C小鼠武汉生物制品研究所，雌雄不限，4周龄，1620G，按随机原则分为实验组和对照组。精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创2/5肌凝蛋白的制备及免疫心肌肌凝蛋白用猪心室肌制备，主要参照文献2。将肌凝蛋白溶于MOL/L磷酸钾缓冲液中，终浓度MG/ML,然后与等体积完全弗氏佐剂SIGMA公司混合研磨成乳浊液，在实验组小鼠双侧腹股沟、腋部皮下及足垫皮下注射，每只小鼠注射肌凝蛋白量为1MG。对照组仅用等量的MOL/L磷酸钾缓冲液与等体积完全弗氏佐剂混合液在相同位置注射。免疫时间为第1、7、30天。分别在初次免疫后第14、30、60和120天处死小鼠前，称取小鼠的体重及心脏重量，并计算二者比值。病理检查心脏离体后，以10甲醛固定，石蜡包埋后切片，部分做常规HE染色，显微镜下观察，余下切片待做免疫组织化学检测。免疫组化SP法将石蜡切片脱蜡及抗原修复，磷酸盐缓冲液PBS冲洗后，加3ML/L过氧化氢处理10MIN再以PBS冲洗后，依次滴加正常羊血清室温30MIN，大鼠抗小鼠单克隆抗体BIOLEGEND公司120037孵育60MIN,PBS洗，生物素标记的兔抗大鼠IGG中山公司140，37孵育30MIN，PBS洗，以二氨基联苯胺DAB显色、苏木素衬染，然后常规脱水、透明、封片，镜检观察结果，呈棕黄色者判为阳性。采用HPIAS2000型图像分析软件统计阳性率。精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创3/5统计学处理实验数据以XS表示，组间比较采用T检验，采用软件进行统计分析。2结果小鼠心脏重量与体重比值与对照组比较，初次免疫后14D实验组小鼠心脏重量与体重比值无显著变化P而在免疫30D后，实验组小鼠心脏重量与体重比值明显增加P2MURUKAMIU，UCHIDAK，HIRATSUAT,ETMYOSINFROMPIGHEARTVENTRICLEPURIFICATIONANDENZYMATICPROPERTIESJBIOCHEMISTRY，197680361193FOUGEROLLESAR，SPRAGUEAG，NICKERSONNUTTERCL,ETOFINFLAMMATIONBYCOLLAGENBINDINGINTEGRINSALPHA1BETAANDALPHA2BETAINMODELSOFHYPERSENSITIVITYANDARTHRITISJCLININVEST，2000105672194IANAROA，CICALAC，CALIGNANOA,ETLATEANTIGEN1MONOCLONALANTIBODYMODULATESTHEDEVELOPMENTOFSECONDARYLESIONANDTCELLRESPONSEINEXPERIMENTALARTHRITISJLABINVEST，200080173805KRIEGLSTEINCF，CERWINKAWH，SPRAGUEAG,ETBINDINGINTEGRIN11REGULATESINTESTINAL精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创4/5INFLAMMATIONINEXPERIMENTALCOLITISJCLININVEST，2002110121773826FIORUCCIS，MENCARELLIA，PALAZZETTIB,ETOFINNATEIMMUNITYANDCOLLAGENBINDINGINTEGRIN11INTNBSINDUCEDCOLITISJIMMUNITY，2002176769807ELGABALAWYH，WILKINS1CD29INTEGRINEXPRESSIONINRHEUMATOIDSYNOVIALMEMBRANESANIMMUNOHISTOLOGICSTUDYOFDISTRIBUTIONPATTERNSJRHEUMATOLOGY，199320223178HURMET,KALIMOINSKELETALMUSCLEDURINGREGENERATIONJMUSCLENERVE，199215448299INOT，KISHIROM，OKUBOM,ETPERSISTENTEXPRESSIONSOFICAM1ANDVCAM1ONMYOCARDIALTISSUEINCHILDRENWITHLYMPHOCYTICMYOCARDITISJCARDIOVASCRES，1997342323810SAETERSDALT,LARSENTH，DALEN1INTEGRINSUBUNITISNOTASPECIFICCOMPONENTOFTHECOSTAMEREDOMAININHUMANMYOCARDIALCELLSJHISTOCHEMJ，20023467323911SCHALLERSIGNALANDBIOLOGICALRESPONSESELICITEDBYTHEFOCALADHESIONKINASEJBIOCHIM精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创5/5BIOPHYSACTA,20011540112112DINGB，PRICER