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精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创1/6探讨熟地黄的益智作用及其机理摘要目的探讨熟地黄的益智作用及其机理。方法对化学药品所致记忆障碍模型小鼠进行学习记忆行为实验并检测相关指标,实验动物随机分为5组,分别为正常对照组、模型组、脑复康组500MG/KG、熟地高剂量组9G/KG、熟地低剂量组G/KG。结果熟地黄能够减少模型动物跳台训练期、测验期错误反应次数并延长测验期触电潜伏期;缩短模型小鼠寻找平台时间,并增加其跨台次数;降低模型小鼠脑内胆碱酯酶活性、AL3含量,保护脑组织;并能使脑内GLU/GABA维持在正常水平。结论熟地黄对于化学药品所致记忆障碍模型小鼠具有增强其学习记忆和空间记忆能力的作用,其作用机制可能与改善中枢胆碱能神经系统功能,降低脑内AL3含量,保护脑组织及维持脑内GLU/GABA的正常水平有关。关键词熟地黄学习记忆记忆障碍模型学习记忆属于高级神经活动,其基本过程可以大致分为获得(ACQUISITION)、巩固(CONSOLIDATION)和再现(RETRIEVAL)三个阶段1。学习和记忆既是脑的高级功能,又是极复杂的神经活动过程,相应的,学习记忆障碍的产生机制也十分复杂,涉及神经生理学、神经病理学、神经药理学、神经生化学、行为药理学等多学科的内容。精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创2/6根据记忆过程的生理生化基础,在进行益智药物研究中,通常在训练前或训练后不同时间给予动物采用一些化学药物,造成各种记忆障碍模型。此种模型较正常动物更能正确反映药物的作用,从而可用于益智药物的筛选或初步分析其作用机理。铝元素具有神经毒性,铝中毒脑病在引起记忆障碍的同时,还导致神经元染色衰变而变性死亡,诱导神经纤维退行性变性,并引起CHAT活性降低,ACH,5HT,NA含量下降2。因此,用慢性铝中毒方法复制学习记忆障碍模型较为理想,不但可以通过行为学实验直观地观察药物的益智作用,而且能进一步从影响学习记忆的多种因素探索其作用机理。熟地黄为玄参科植物地黄REHMANNIAGLUTINOSALIBOSCH的干燥块茎经加工炮制而成,功能补血滋阴,益精填髓。临床中,熟地黄是治疗老年健忘、记忆力减退的常用药3,同时,也是治疗小儿先天不足、脑髓空虚之呆钝,成人肾阴虚之善忘的首选药物之一。我们前期的药理实验4即从记忆的获得、巩固、再现三方面入手,分别采用跳台法训练前10MIN腹腔注射东莨菪碱4MG/KG制备记忆获得障碍小鼠模型,24H后测试;跳台法训练后皮下注射精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创3/6亚硝酸钠120MG/KG制备记忆巩固障碍小鼠模型,24H后测试;跳台法训练5MIN,24H后测试前30MIN灌胃40乙醇ML/10G制备记忆再现障碍小鼠模型。通过这些记忆障碍模型观察熟地黄对记忆的不同阶段的作用,结果表明熟地对上述模型动物的学习记忆能力具有明显的改善作用。可见,此行为实验结果为熟地具有补肾生髓,益智健脑作用提供了一定的客观依据。我们进一步对熟地黄对ALCL3所致记忆障碍模型小鼠记忆力的影响及其机理进行了研究。现报道如下。1材料与方法材料试剂与药品三氯化铝ALCL3,广东台山化工厂;乙酰胆碱酯酶(ACHE)试剂盒,总蛋白试剂盒,南京建成生物工程研究所提供。谷氨酸GLU,北京邦定泰克生物技术公司提供;氨基丁酸GABA,SIGMA产品,上海试剂公司提供。熟地黄,地黄REHMANNIAGLUTINOSALIBOSCH的干燥块茎,购自河南省武陟县药材公司,一等品,按中国药典2000年版,部酒炖法制成熟地黄,水煎,过滤,浓缩至11,4保存备用。脑复康东北制药总厂,研成粉末,1吐温80助溶,生理盐水配制成25MG/ML药液备用。精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创4/6动物昆明种小鼠,体重1822G,雌雄兼用。方法造模及给药方法昆明种小鼠,雌雄各半,随机分为5组,分别为正常对照组、模型组、脑复康组500MG/KG、熟地高剂量组9G/KG、熟地低剂量组G/KG,每组20只动物。各给药组给予相应药物,正常组、模型组灌胃生理盐水,灌胃体积均为ML/10G体重,1次/D,至实验结束。给药同时,除正常对照组外,其余各组均灌胃ALCL34MG/D,连续90D。跳台实验依文献5方法测定小鼠训练期错误反应次数、测试期错误反应次数和测试期触电潜伏期。MORRIS水迷宫实验依文献6方法测定小鼠训练期寻找平台潜伏期及测试期撤除平台后跨越原平台相应位置次数。胆碱酯酶活性检测跳台实验结束后,断头处死各组动物,迅速剥离大脑,将大脑沿矢状缝分成左右半球,取左侧大脑在冰冷的生理盐水中漂洗,除去血液,滤纸拭干,称重,按胆碱酯酶测定试剂盒说明书测定胆碱酯酶活性。铝离子AL3含量测定跳台实验结束后,断头处死各组动物,迅速剥离大脑,取右侧大脑干燥,称重,采用等离子体反射光谱法测定AL3含量。谷氨酸GLU、氨基丁酸GABA含量测定同前取精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创5/6小鼠左侧大脑,按文献方法7进行。脑组织形态学观察同前取小鼠右侧大脑,按常规制作病理组织切片,HE染色,于光学显微镜下观察小鼠脑组织形态学变化,并摄取照片。统计方法数据采用表示,组间比较进行方差齐性检验及T检验。2结果对ALCL3所致记忆障碍小鼠学习记忆能力的影响跳台实验表明,ALCL3所致记忆障碍模型组与正常对照组比较,小鼠训练期和测试期的错误反应次数均明显增多P2吴正治,唐春艳,卢汉平天秦1号对老年痴呆模型的益智作用及机理探讨J中国医药学报,1999,142983陈可冀跨世纪脑科学老年性痴呆发病机理与诊治M北京北京医科大学中国协和医科大学联合出版社,19982654崔瑛,沈云辉,侯士良熟地黄对记忆障碍模型小鼠记忆力影响的实验研究J河南中医学院学报,2003,185325李仪奎中药药理实验方法学M上海上海科学技术出版社,1991716MORRISRDEVELOPMENTSOFWATERMAZE精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创6/6PROCEDUREFORSTUDYINGSPATIALLEARNINGINTHERATJJNEUROSCIMETHODS,1984,11477冯冰虹,李伟煊,罗健,等绞股蓝皂甙XLIII对小鼠脑内谷氨酸和氨基丁酸的影响J中国药理学通报,1998,1432348GIANCARLOP,GIACOMOSNOOTRPICDRUGSANDBRAINCHOLINERGICMICHANISMJPRONEUROPSYCHOPHARMACOLANDBIOLPSYCHIAT,1989,13779胡海涛,钱亦华,杨杰,等淀粉样前体蛋白在痴呆模型大鼠背海马结构
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