孕妇血清中乙型肝炎病毒dna含量与胎儿宫内感染的关系

精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创1/7孕妇血清中乙型肝炎病毒DNA含量与胎儿宫内感染的关系【摘要】目的探讨孕妇血清中乙型肝炎病毒DNAHBVDNA含量与胎儿宫内感染发生率的关系。方法用斑点杂交法检测185例乙型肝炎病毒表面抗原（HBSAG）阳性孕妇血清中HBVDNA及新生儿HBSAG。结果胎儿发生宫内感染与其母亲血清HBVDNA含量有关，随着孕妇血清中HBVDNA含量的增高，胎儿发生宫内感染的危险性也呈增高的趋势。结论孕妇血清HBVDNA含量升高是胎儿发生乙型肝炎病毒感染的重要因素之一。【关键词】肝炎病毒，乙型疾病传播，垂直DNA,病毒肝炎，乙型THERELATIONSHIPOFSERUMHEPATITISBVIRUSDNALOADINHBSAGPOSITIVEPREGNANTWOMENTOTHEINTRAUTERINEINFECTIONOFNEWBORNSLIUZHIHUA,XUDEZHONG,YANYONGPING,ETALFOURTHMILITARYMEDICALUNIVERSITY,XIAN710033【ABSTRACT】OBJECTIVETOSTUDYTHERELATIONSHIPOFSERUMHEPATITISBVIRUSHBVDNALOADINHBSAGPOSITIVEPREGNANTWOMENTOINTRAUTERINEINFECTIONOFTHEIRNEWBORNSMETHODSSERUMHBVDNAWEREDETERMINEDBYDOTBLOT精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创2/7HYBRIDIZATIONIN185HBSAGPOSITIVEPREGNANTWOMENSERUMHBSAGWERETESTEDBYELISAINTHEIRNEWBORNSWITHIN24HOURSAFTERBIRTHRESULTSTHEPREVALENCEOFINTRAUTERINEHBVINFECTIONOFTHENEWBORNSWASASSOCIATEDWITHTHEHBVDNALEVELOFTHEMOTHERSWITHTHEINCREASEOFSERUMHBVDNALOAD,THERISKOFFETALINTRAUTERINEINFECTIONWASINCREASINGCONCLUSIONFETALEXPOSURETOHIGHLEVELOFMATERNALHBVDNAISONEOFTHEIMPORTANTDETERMINANTOFINTRAUTERINEINFECTION【KEYWORDS】HEPATITISBVIRUSDISEASETRANSMISSION，VERTICALDNA,VIRUSHEPATITISB乙型肝炎乙肝病毒HBV可经垂直传播感染胎儿。新生儿出生后即使接种乙肝疫苗和乙肝高效价免疫球蛋白，也不能阻止其发展成为慢性HBV携带者，仍然是HBV的潜在传染源1。因此，宫内感染在世界上的乙肝高发区是一个重大的公共卫生问题。HBVDNA是衡量传染性的直接指标。我们用斑点杂交法检测孕妇血清中的HBVDNA含量，探讨孕妇血清HBVDNA含量与胎儿宫内感染的关系。资料和方法一、研究对象精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创3/719951997年在陕西省妇幼保健院产前门诊筛选乙型肝炎表面抗原HBSAG阳性的孕妇185例为研究对象。于孕妇分娩前采集静脉血，将分离的血清贮存于20，其新生儿于分娩后24小时内注射乙肝疫苗之前采股静脉血检测HBSAG。新生儿出生后24小时内HBSAG阳性为胎儿宫内感染。二、方法1血清学检测孕妇血清HBSAG指标检测，新生儿HBSAG检测采用酶联免疫吸附法（ELISA），试剂盒购自上海实业科华生物技术公司，操作按说明书进行，阳性与阴性之比为阳性。DNA斑点杂交（1）HBVDNA全基因探针的制备由PCP19重组质粒中分离。（2）探针的标记采用地高辛标记试剂盒购自德国BOEHRINGERMANNHEIM公司）。HBV探针的标记用随机引物法，显色法检测标记活性。（3）血清标本处理采用酚氯仿抽提法2。（4）斑点杂交试验按试剂盒操作程序进行。（5）孕妇血清HBVDNA定量方法将标准HBVDNA样品（1NG/L）按如下稀释度进行稀释，1100、1200、11000、12000、110000、1100000。其浓度分别为10、5、1、PG/L。以系列稀释的样品为标准阳性对照，进行斑点杂交，根据精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创4/7杂交信号的强弱分为5个等级，0级PG/L。用薄层扫描仪（SHIMAZU,CS9000）对杂交斑点进行扫描，根据不同浓度的标准HBVDNA杂交斑点的扫描峰值作标准曲线，然后以样品杂交斑点的扫描峰值在标准曲线上求出其HBVDNA含量。三、统计学方法等级资料采用线性趋式分析。数据用EPI（版）软件处理。结果一、宫内感染的发生情况185例HBSAG阳性孕妇所分娩的新生儿的血清经ELISA检测，有8例HBSAG阳性，宫内感染率为。二、孕妇血清HBVDNA含量与胎儿宫内感染胎儿宫内感染率，随着孕妇血清HBVDNA含量的增加而呈增高趋势（2，P表1孕妇血清HBVDNA分级与胎儿宫内感染的关系HBVDNA分级总例数宫内感染OR值例数百分比0级390精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创5/71级7212级2913级1804级276讨论新生儿普遍接种乙肝疫苗以来，新生儿乙肝的感染率已经明显下降。但对于发生宫内感染的胎儿，出生后使用乙肝疫苗无效，极易成为慢性HBV携带者，并最终导致肝癌、肝硬化。宫内感染的原因很复杂，目前尚不明确。以往文献报道，与先兆早产、孕妇HBEAG阳性有关2，3。乙型肝炎E抗原HBEAG是存在于病毒颗粒之外的一种可溶性蛋白，实际上是传染性的间接指标。虽然，HBEAG阳性是HBV复制的指标，但HBEAG阳性与HBVDNA并不一致。有研究证实，HBEAG阴性而抗HBE阳性的孕妇中，曾检出乙肝病毒基因4，这些孕妇体内存在有复制能力的突变株。突变发生于PREC的1896位点，突变形成终止密码子，导致HBEAG不能合成与分泌；另一方面，一小部分HBEAG阳性而HBVDNA阴性的孕妇，其婴儿被感染的危险性甚小5。血清HBVDNA是反映病毒在体内复制和宿主传染性的直接指标6。因此，用血清HBVDNA的含量估计宿主的精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创6/7传染性更为直接可靠。本研究结果也表明，随着孕妇血清HBVDNA含量的增加，胎儿发生宫内传染的危险性也增高。孕妇血清HBVDNA含量标志着其乙肝传染性的强弱。由此推论，孕妇传染性强是宫内感染的重要原因。定量检测母血中HBVDNA的含量，可以反映孕妇传染性的强弱，进而估计HBSAG阳性孕妇的胎儿发生宫内感染危险性的高低，然后针对高危人群采取适当措施，以降低宫内感染的发生率。朱启榕等7报道，携带HBV的孕妇产前给予多次注射乙肝高效价免疫球蛋白（HBIG）可以有效减少胎儿宫内HBV感染，并推测其原理是降低了外周血HBV含量。这一问题尚待进一步研究。本课题受国家自然科学基金资助基金编号39370611作者单位710033西安，第四军医大学流行病学教研室（刘志华，徐德忠，闫永平，门可，张景霞）；陕西省妇幼保健院（徐剑秋，蒋美玲）参考文献1GHENDONYPERINATALTRANSMISSIONOFHEPATITISBVIRUSINHIGHINCIDENCEVIROLMETH,1987，1769792林万明主编临床基因探针诊断实验技术上海上海科学技术出版社,1993324325精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创7/73门可,王福生,徐德忠，等乙型肝炎病毒宫内感染及其相关因素的研究第四军医大学学报,1996，1728294CARMANWF,HADZIYANNISS,MCGARVEYJJ,ETALMUTATIONPREVENTINGFORMATIONOFHEPATITISBEANTIGENINPATIENTSWITHCHRONICHEPATITISBINFECTIONLANCET,1989,25885915SCOTTJS,PANPE,PACERA,ETABSENCEOFHEPATITISBVIRUSDNAINHEPATITISBEANTIGENPOSITIVESERAFROMCHRONICHEPATITISBSURFACEANTIGENCARRIERSINMEDVIROL，1990，3